细胞凋亡与动脉粥样硬化

细胞凋亡是细胞生命的基本特征之一,在动脉粥样硬化的发生和发展过程中起了重要作用。内皮细胞、平滑肌细胞和巨噬细胞在动脉粥样硬化的发病过程中均存在凋亡现象,氧自由基、某些生长因子、一氧化氮、内毒素及氧化低密度脂蛋白等可诱导细胞凋亡,这为认识和探讨动脉粥样硬化发生机理及防治提供了理论基础。     

参麦注射液对内皮细胞增殖和迁移的影响

目的：探讨参麦注射液对血管生成的影响。方法：采用MTT法检测参麦注射液对牛血清和肿瘤细胞条件培养液促进的牛主动脉内皮细胞增殖的影响，采用琼脂糖刮除法检测参麦对牛血清和肿瘤条件培养液促进的牛内皮细胞迁移的影响。结果：在含10％新生小牛血清培养液中和在肿瘤细胞条件培养液中，参麦都能明显抑制牛主动脉内皮细胞增殖，且呈量效关系，对肿瘤细胞条件培养液诱导的内皮细胞迁移抑制作用显著。方法：参麦能抑制牛内细胞增殖和迁移，具有抑制血管生成的作用。     

姜黄素具有抑制血管生成与诱导肿瘤细胞凋亡双重作用

目的　探讨姜黄素的抗肿瘤机制。方法　采用鸡胚绒毛尿囊膜模型观察姜黄素对血管生成的影响 ;利用培养的肿瘤细胞SMMC 772 1,采用电子显微镜及流式细胞仪观察姜黄素诱导SMMC 772 1细胞凋亡的作用。结果　姜黄素能明显抑制鸡胚绒毛尿囊膜内的血管生成 ,2 0 μmol·L-1的姜黄素即可诱导SMMC 772 1细胞凋亡。结论　姜黄素的抗肿瘤机制是多方面的 ,既可抑制血管生成又可诱导肿瘤细胞凋亡     

白及须根醇提物抗胃溃疡作用研究

目的研究白及须根醇提物抗大鼠乙醇急性胃溃疡的活性及其作用机理。方法实验设正常组、模型组、阳性对照组、白及须根醇提物低、中、高剂量组,用无水乙醇诱导大鼠胃溃疡模型。初次采用扫描仪扫描大鼠胃溃疡情况。ELISA检测血清中IL-1β、TNF-α、IL-10等因子的水平,初步分析其作用机理。结果白及须根醇提物可以减小溃疡面积;ELISA数据显示,血清中IL-1β、TNF-α、IL-10等因子与模型组相比均有显著性变化。结论白及须根醇提物具有显著抗胃溃疡作用,须根醇提物组分可通过降低IL-1β等因子和提高IL-10、VEGF等因子的水平发挥抗胃溃疡作用。     

香草扶正合剂对Lewis肺癌模型小鼠癌细胞自噬的影响

[目的]探讨香草扶正合剂(Xiangcao Fuzheng Mixture,XCFZ)的抑瘤作用及其机制。[方法]建立Lewis肺癌小鼠移植瘤模型,随机分为模型组,XCFZ低、中、高剂量组,顺铂组(阳性对照组),并设置空白组。模型组以双蒸水0.2mL·d-1灌胃,XCFZ低、中、高剂量组分别以XCFZ低、中、高剂量0.2mL·d-1灌胃,XCFZ低、中、高剂量浓度分别为0.93g·mL-1、1.86g·mL-1、3.72g·mL-1;顺铂组以0.64mg·mL-1的顺铂溶液0.1mL·(2d)-1腹腔注射,同时以双蒸水0.2mL·d-1灌胃。每天固定时间给药,给药14d。称取小鼠体质量、瘤质量和去瘤后体质量,并计算抑瘤率,常规石蜡切片观察肿瘤组织病理改变,透射电镜观察瘤组织自噬小体,Western blot检测瘤组织自噬相关基因Beclin1、自噬相关蛋白5(autophagy related 5,Atg5)、微管相关蛋白1轻链3-β(microtubule associated protein 1 light chain 3-β,LC3b)蛋白表达水平,实时荧光定量PCR技术(Real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测瘤组织Beclin1、Atg5、LC3b、Unc-51样自噬激活激酶1(Unc-51 like autophagy activating kinase 1,ULK1)、B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)mRNA表达水平。[结果]与模型组比较,各给药组瘤质量降低(P＜0.01)。顺铂组抑瘤率最高,其次为XCFZ中剂量组。与模型组比较,XCFZ中剂量可升高小鼠去瘤后体质量(P＜0.05),增加肿瘤组织Atg5、Beclin1、LC3b蛋白及Atg5、Beclin1、LC3b、ULK1 mRNA表达水平,并升高Bax/Bcl-2 mRNA比值(P＜0.05,P＜0.01)。与顺铂组比较,XCFZ中剂量可升高小鼠去瘤后体质量(P＜0.01),增加肿瘤组织Atg5、LC3b蛋白及Beclin1 mRNA表达水平(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.05)。[结论]XCFZ对肺癌小鼠模型肿瘤生长具有抑制作用,其抑瘤作用可能与自噬诱导相关;或与增加自噬相关蛋白Beclin1、Atg5表达,引发凋亡相关。     

蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白海藻酸钙-壳聚糖纳米胶囊的制备

目的制备蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白海藻酸钙-壳聚糖纳米胶囊。方法反相乳化法制备纳米胶囊。以CaCl2溶液浓度、蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白与海藻酸比例、壳聚糖溶液浓度为影响因素,粒径、Zeta电位为评价指标,正交试验优化制备工艺。然后,考察纳米胶囊微观形态、载药量、包封率、药物释药性能。结果最佳条件为CaCl2溶液浓度20 mmol/L,蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白与海藻酸比例1∶1,壳聚糖溶液浓度1%,所得纳米胶囊大小均匀,分散性好,表面光滑饱满,平均粒径(210±5.12)nm,PDI 0.16±0.03,Zeta电位(-25.46±0.56)mV,载药量(16.35±1.35)%,包封率(83.69±4.31)%,人工胃液中24 h内累积释放率(81.86±3.15)%。结论该方法稳定可靠,可用于制备具有良好的体外缓释性能的蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白海藻酸钙-壳聚糖纳米胶囊。     

土牛膝治疗急性咽喉炎的实验研究

目的观察土牛膝提取物对大白兔急性咽喉炎的治疗作用。方法将18只大耳白黑眼兔(WHBE)随机分为3组,分别给予相当于临床用药量的10倍、20倍的土牛膝提取液及等体积蒸馏水,连续灌胃7 d,然后建立家兔声带炎症模型,观察、测试各组家兔炎症发生情况。结果各土牛膝剂量组急性咽喉炎好转度好于模型组,且呈明显量效关系。结论土牛膝提取物可以显著抑制家兔急性咽喉炎的症状。     

八角莲内闭联异松树脂醇二酯脱氢酶全基因的克隆及分析

目的:通过末端快速扩增(RACE)技术获得临安地区八角莲内闭联异松树脂醇二酯脱氢酶基因的全序列,探讨八角莲内异松树脂醇二酯脱氢酶基因的序列特点.方法:以浙江省临安地区八角莲为材料,根据同源序列法分别进行3′末端 RACE和5′末端RACE,获得闭联异松树脂醇二酯脱氢酶基因的全序列.结果:以八角莲属的八角莲为材料获得闭联异松树脂醇二酯脱氢酶全基因序列为国际首次报道.此cDNA全长序列991bp,5′端非翻译区42 bp,3′端非翻译区112 bp.开放阅读框编码278个氨基酸,分子量为29253.3道尔顿,等电点为6.328.提交GeneBank序列号为EU573789.RT-PCR初步分析发现该酶的mRNA产物在茎内含量丰富.氨基酸序列比对表明闭联异松树脂醇二酯脱氢酶的物种差异性较大.结论:获得八角莲内闭联异松树脂醇二酯脱氢酶全基因.     

姜黄素对血管生成影响的实验研究

目的：从姜黄素对内皮细胞增殖和迁移的影响角度,探讨姜黄素抗血管生成的作用机理。方法：用MTT法检测姜黄素对牛主动脉内皮细胞及人胃腺癌细胞系SGC-7901细胞增殖的影响;用琼脂糖刮除法检测姜黄素对牛内皮细胞迁移的影响。结果：姜黄素能明显抑制牛内皮细胞增殖,对非内皮细胞包括肿瘤细胞也有抑制作用,但同内皮细胞相比,差异显著,说明姜黄素能特异性抑制内皮细胞增殖;姜黄素能显著抑制牛内皮细胞迁移,在实验浓度范围内,其抑制作用呈明显量效关系。结论：姜黄素是一种特异性血管生成抑制剂：抑制内皮细胞增殖和迁移可能是姜黄素抑制血管生成的机理之一。