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目的 真核表达人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,SV)融合蛋白(fusion protein,),并完成蛋白纯化及纯度测定.方法 根据编码F蛋白的基因序列设计引物,CR方法扩增出3'端带His标签的F基因序列,克隆入pGEM-T-easy载体,经核酸序列分析后,进一步克隆到pcDNA3.1( )真核表达载体,限制性内切酶鉴定,用脂质体Lipofectamine2000转染COS-7细胞,2 h后再用Westem blot检测目的蛋白的表达.Ni柱亲和层析纯化COS-7细胞表达的F蛋白,高效毛细管电泳分析纯化后蛋白纯度.结果 核酸序列分析证实获得带His标签的RSV F基因序列,没有发生无义突变.转染COS-7细胞后,利用Western blot方法检测到F蛋白的特异性条带,纯度达99%以上.结论 初步建立了真核表达RSV F蛋白的纯化方法,为进一步优化RSV F蛋白制备条件及单克隆抗体及诊断试剂等研究奠定了基础. 相似文献
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Nafise Tabasi Mahmoud Mahmoudi Maryam Rastin Hamid Reza Sadeghnia Mojtaba HosseinPour Mashhadi Shahrzad Zamani Taghizade Rabe 《Food and Agricultural Immunology》2015,26(1):138-156
Renal cell carcinoma (RCC) is the most common renal malignancy in adults and exhibits highly intrinsic and acquired resistance to standard therapeutic strategies. We sought to determine the anti-cancer activity of hydroalcoholic extract of Nigella sativa seeds (NSE) and thymoquinone (TQ). Human renal cell carcinoma (ACHN) and fibroblast L929 cell lines were treated with NSE and TQ, and cytotoxicity was measured using 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium (MTT) assay. Cell death pattern was determined by annexin V and propidium iodine (PI)-staining methods. Exposure to NSE, TQ and cisplatin significantly inhibited the growth of ACHN cells and showed significant increase of early apoptotic cells. Normal cells were more resistant to NSE and TQ-induced effects. The present study demonstrates that N. sativa and TQ exert anti-proliferative and pro-apoptotic effects on ACHN cells in a concentration and time-dependent manner, which suggests their potential to be used as a new therapeutic strategy for renal cancers. 相似文献
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MR Hedayati-Moghaddam MM Marjaneh IE Mashhadi 《International journal of STD & AIDS》2012,23(8):e11-e16
Being responsible for providing care for HIV/AIDS in a society, physicians should be knowledgeable and have favourable attitudes. We designed a cross-sectional study to assess knowledge and attitudes towards HIV/AIDS of private practicing physicians in Mashhad, Iran. A total of 346 general practitioners and specialists completed anonymous self-administered questionnaires with response rate of 91.1%. For knowledge questions, the mean proportion of correct responses was 53.5% (±13.2). Misconceptions about HIV transmission were the main areas of insufficient knowledge. Surprisingly only 20% knew how to manage a patient who had experienced sexual contact with an HIV-positive partner. While 84% disagreed that 'HIV-infected individuals deserved to catch infection' owing to high-risk behaviours, 38% sympathized less with people who were infected via extramarital sex. It seems that knowledge and attitudes towards HIV/AIDS among the studied physicians is not favourable and is an area that requires attention to enable effective management of the disease in Iran. 相似文献
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目的:探讨上皮样血管瘤(EH)的临床及组织病理学特征。 方法:回顾性分析16例已确诊患者的临床及病理资料,并对相关文献进行综述。 结果:16例患者中女8例,男8例;平均年龄(45.44±12.52)岁;病程3个月~20年;皮损主要表现为红色至暗红色丘疹、结节,可伴瘙痒和糜烂,好发于头皮、耳部,其中发生在头部10例、耳部5例、外阴1例;皮损单发者5例,多发者11例。皮损组织病理学检查均具有典型的血管增生,管壁增厚,内皮细胞呈上皮样突向管腔,管周大量淋巴细胞及嗜酸性粒细胞浸润。结论:上皮样血管瘤少见,诊断需要临床与病理密切结合。加强对该病的认识,可避免误诊误治。 相似文献