Small interfering RNA inhibits SARS-CoV nucleocapsid gene expression in cultured cells and mouse muscles

SARS-CoV isa newly identified coronavirus that causes severe acute respiratory syndrome （SARS）. Currently, there is no effective method available for prophylaxis and treatment of SARS-CoVinfections. In the present study, the influence of small interfering RNA （siRNA） on SARS-CoV nucleocapsid （N） protein expression was detected in cultured cells and mouse muscles. Four siRNA expression cassettes driven by mouse U6 promoter targeting SARS-CoV N gene were prepared, and their inhibitory effects on expression of N and enhanced green fluorescence protein （EGFP） fusion protein were observed.     

黑柴胡中新三萜皂甙的结构鉴定

从黑柴胡(Bupleurum smithii Wolff)根中分离出10个化合物,均为首次由该植物中获得。其中二个新三萜皂甙,即柴胡皂甙k和l(saikosaponin k and l),其结构经紫外、红外、核磁共振氢谱,碳谱和质谱等波谱测定和解析,分别确定为3β,16β,23,28-四羟基齐墩果烷-11,13(18)-二烯-3-O-β-D-吡喃木糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)-β-D-吡喃呋糖甙和3β,16α,23,28,30-五羟基齐墩果烷-11,13(18)-二烯-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)-β-D-吡喃呋糖甙。     

几种中西药抗人实验模拟运动病效果观察

目的 :选用中药“治晕灵”的主要成分生姜、明天麻等六味草药煎成汤剂、或半量汤剂配西药脑益嗪、山莨菪碱各1 4临床常用量配成复方中西药制剂 ,与目前常用抗晕药晕海宁等中、西药的药效进行比较 ,看中药制剂或中西药复方制剂是否具有较好的抗运动病效果。方法 :选 7名敏感被试者 (女性 ,19～ 2 1岁 ) ,用旋转刺激诱发运动病至出现恶心。按拉丁方设计 ,与安慰剂 (淀粉 10 0mg)及晕海宁 (5 0mg)进行对比 ,分别观察了生姜合剂 (30ml)、晕可平 (30ml)、山莨菪碱 (10mg)、脑益嗪 (2 5mg)及上述复方中西药制剂口服后的运动病耐力。结果 :与安慰剂比较 ,晕海宁、山莨菪碱、脑益嗪、晕可平、生姜合剂、复方中西药制剂分别使运动病耐力提高 5 .4%、7.5 %、5 .9%、7.4%、32 .3 %、2 0 .4% ;生姜合剂效果较优 ,除口服时有辛辣味外 ,无明显的副作用。复方中西药制剂各成分未显示协同作用 ,而只是简单的作用相加。结论 :生姜合剂具有较好的抗运动病作用     

Immune responses against SARS-coronavirus nucleocapsid protein induced by DNA vaccine

The nucleocapsid （N） protein of SARS-coronavirus （SARS-CoV） is the key protein for the formation of the helical nucleocapsid during virion assembly. This protein is believed to be more conserved than other proteins of the virus, such as spike and membrane glycoprotein. In this study, the N protein of SARS-CoV was expressed in Escherichia coli DHSalpha and identified with pooled sera from patients in the convalescence phase of SARS. A plasmid pCI-N, encoding the full-length N gene of SARS-CoV, was constructed. Expression of the N protein was observed in COS1 cells following transfection with pCI-N. The immune responses induced by intramuscular immunization with pCI-N were evaluated in a murine model. Serum anti-N immunoglobutins and splenocytes proliferative responses against N protein were observed in immunized BALB/c mice. The major immunoglobulin G subclass recognizing N protein was immunoglobulin G2a, and stimulated splenocytes secreted high levels of gamma interferon and IL-2 in response to N protein. More importantly, the immunized mice produced strong delayed-type hypersensitivity （DTH） and CD^8＋ CTL responses to N protein.     

人羊膜间充质细胞具有分化成软骨及成骨细胞的潜能

目的:人羊膜间充质细胞具有比骨髓间充质干细胞更强的扩增能力和免疫原性低等优势。建立体外适宜的诱导培养条件,观察人羊膜间充质细胞定向分化为软骨细胞和成骨细胞的能力。方法:实验于2005-09/2006-12在贵州省细胞工程重点实验室完成。①材料来源:经产妇知情同意,无菌采集健康足月分娩新生儿胎盘6份,实验经医院医学伦理委员会批准。②实验方法:采用机械法剥离羊膜组织,二步酶消化法分离收获人羊膜间充质细胞,按2.2×10~8L~(-1)密度接种,传至第1～2代用于诱导分化实验。向软骨细胞诱导分化时,人羊膜间充质细胞按3×10~8L~(-1)密度接种,诱导培养液为含体积分数0.01的胎牛血清、10 mg/L转化生长因β1、100 nmol/L地塞米松、50 mg/L抗坏血酸、1%培养基添加物。向成骨细胞诱导分化时,人羊膜间充质细胞按6×10~7L~(-1)密度接种,诱导培养液为含体积分数0.1的胎牛血清、100 nmol/L地塞米松、50 mg/L抗坏血酸、5 mmol/Lβ-甘油磷酸。③实验评估:原代细胞用流式细胞仪分析表型,免疫细胞化学染色进行波形蛋白表达鉴定。分别于体外诱导第7,14,21,28天采用免疫细胞化学法检测软骨特异性Ⅱ型胶原的表达,细胞化学法检测蛋白聚糖的表达,钙-钴法检测成骨细胞特异性碱性磷酸酶的表达,茜素红S检测钙盐沉积情况。结果:①免疫组化与表型特征:人羊膜间充质细胞高表达间充质干细胞表面标志CD29、CD44和间充质细胞标志波形蛋白。②向软骨细胞诱导分化:诱导14 d后,人羊膜间充质细胞由长梭型逐渐变为多角形,可检测到Ⅱ型胶原蛋白表达及软骨细胞特异性细胞外基质蛋白聚糖。③向成骨细胞诱导分化:诱导21 d后,可观察到人羊膜间充质细胞的胞浆内有碱性磷酸酶表达,且可见钙盐沉积。结论:人羊膜间充质细胞具有分化成软骨细胞和成骨细胞的特性,可作为骨及软骨组织工程种子细胞的新来源。     

山东泰安地区两个自然村人群血脂状况调查

目的:调查了解山东泰安地区农村人群的血脂水平,为该地区农民心脑血管疾病的预防提供基础数据。方法:实验于2006-06随机选取泰安市两个自然村650人进行健康检查,男270人,女380人,年龄2～88岁。①650人均于早晨空腹采集静脉血3mL,静置凝固后,2h内分离血清,采用全自动生化分析仪常规测定患者血脂指标总胆固醇、三酰甘油水平。②总胆固醇>5.2mmol/L判定为高胆固醇血症,三酰甘油>1.7mmol/L判定为高三酰甘油血症。结果:650人全部完成血样采集与血脂指标检测。①不同性别血脂水平比较:被检人群男性三酰甘油水平显著高于女性[(1.16±1.47),(0.95±0.84)mmol/L,P<0.05];男女总胆固醇水平基本相似(P>0.05)。②不同年龄段血脂水平比较:8人因具体年龄段不祥被排除,剩余642人分为3个年龄段:2～30岁、31～50岁、51～88岁。结果31～50岁人群三酰甘油水平显著高于2～30岁人群[(1.14±1.47),(0.88±0.70)mmol/L,P<0.05],略高于51～88岁人群(P>0.05);51～88岁人群总胆固醇水平>31～50岁人群>2～30岁人群,相邻年龄段间比较差异均有显著性意义(P<0.001)。③各年龄段男女间血脂水平比较:2～30岁人群和51～88岁人群三酰甘油水平性别间差异均无显著性意义(P>0.05),但总胆固醇水平女性均显著高于男性[(2.38±1.47),(1.85±1.26)mmol/L,P<0.05;(4.48±0.92),(4.18±0.76)mmol/L,P0.01]。31～50岁人群男性三酰甘油水平显著高于女性[(1.51±2.06),(0.90±0.80)mmol/L,P<0.01],总胆固醇水平基本相似(P>0.05)。④各年龄段男女高血脂症构成比:31～50岁人群高三酰甘油血症构成比显著高于2～30岁、51～88岁人群(23.1%,5.5%,9.3%,P<0.01);随着年龄增高,各年龄段高胆固醇血症构成比逐渐升高,相邻年龄段间差异均有显著性意义(2.7%,8.6%,15.6%,P<0.01)。31～50岁人群男性高三酰甘油血症、高胆固醇血症的构成比显著高于女性(P<0.01);2～30岁、51～88岁人群男女间高血脂症的构成比基本相似(P>0.05)。结论:①山东泰安地区农村人群高三酰甘油血症,31～50岁年龄段患病率最高;高胆固醇血症患病率随年龄增长逐步上升,提示中年人健康体检尤为重要。②高脂血症应从青少年开始加大预防和保健力度,进行广泛和反复的健康教育,倡导健康的生活方式和生活行为。     

应用Ilizarov外固定器治疗儿童马蹄内翻足12例

1临床资料1997-10/2003-5采用Ilizarov外固定器结合足部小手术矫正足部畸形12例(12足),男9例,女3例,年龄3.3～9.2岁,平均5.5岁.其中先天性者8例(均为僵硬型,其他手术方法治疗后复发),神经源性3例(系脑脊膜膨出引起),外伤性者1例(烧伤引起).手术前根据患儿年龄、患足畸形程度、大小及X线片形态结构特点,选择合适的Ilizarov外固定器.     

Interventional radiologic procedures in the renal transplant

Percutaneous interventional procedures can be valuable in the evaluation and treatment of urologic complications of renal transplantation. Thirty-three patients underwent percutaneous procedures, including relief of obstruction by catheter nephrostomy, diagnostic antegrade pyelography with Whitaker testing, aspiration of various fluid collections (lymphocele, hematoma, urinoma, and abscess), and renal artery angioplasty, during a three year period at three institutions, to provide temporizing treatment and anatomic data. Surgical intervention was sometimes avoided, but more often it could be deferred to allow the patient to stabilize prior to surgery. Complications that required surgery occurred in two patients.     

多肽研究XX:丙型肝炎病毒(HCV)合成多肽的抗原性及线性抗体谱

依据蛋白质的亲水性、可亲性、柔韧性、抗原性、电荷分布及HPLC滞留系数等六种性质,使用“Goldkey”软件系统给出了HCV-BK各蛋白抗原决定簇预测曲线,共设计、合成15个多肽片段:P1(475～495),P3(449～468),P4(658～663),P5(645～663),P6(484～489),P7(475～489),P15(655～662),P16(230～237),P17(225～237),P18(1220～1240),P19(1694～1735),P24(1230～1240),P25(1482～1493),P26(384～389)和P27(2355～2389)。发现NS1区%和NS4区P19有很强的抗原性。用其检测PT-HC,阳性率分别为60%和63%。