WD患者ATP7B基因exon8 DNA突变检测方法的研究

目的对肝豆状核变性(又称Wilson病,WD)ATP7B基因的突变热点外显子8进行PCR扩增产物Msp I酶切和电泳分析及DNA直接双向测序,进而对实验中的方法进行优化研究。方法对102例患者和20例健康人提取基因组DNA,PCR扩增ATP7B基因第8号外显子,扩增产物进行Msp I酶切反应,并进行DNA直接双向测序;讨论分析改进PCR扩增、Msp I酶切的方法学,并对测序结果与临床表型做相关性研究。结果102例WD患者,用反复多次改进的实验方法研究分析后,发现35例存在Msp I酶切结果异常并经测序证实,8号外显子Arg778Leu纯合突变占所有WD病人的34.31%,其中1例伴Leu770Leu多态性同义突变;对照组未检出突变。结论改进实验方法后发现PCR扩增良好,适宜测序;WD突变热点8号外显子中Arg778Leu为主要突变形式,PCR-Msp I酶切反应可作为WD病人ATP7B8号外显子Arg778Leu突变的筛选方法,直接双向测序是确定8号外显子突变位点的可靠方法之一。     

谷胱甘肽治疗帕金森病30例临床观察

目的 探讨还原型谷胱甘肽(古拉定，GLT)对帕金森病人治疗效果，观察GLT治疗后病人血超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH—Px)、丙二醛(MDA)水平的变化。方法 选择30例临床未治疗或服用美多巴因副反应被迫减药病人，应用GLT进行治疗，治疗前后行血SOD、GSH—PX、MDA测定，并设立对照组、正常人组比较；治疗、Px对照组进行了治疗前后H—Y分级及Webster评分。结果 治疗组和正常人组比较，血SOD、GSH—Px显减低(P＜o．01)，MDA显增高(P＜o．01)；GLT治疗后，SOD、GSH—Px值较治疗前明显升高(P＜o．05、P＜o．01)，MDA值下降(P＜o．05)，而对照组改变不明显。治疗前后评分，治疗后临床症状有显改善(P＜o．01)，与对照组比较，两组有显差异(P＜o．01)。结论 GLT对PD病人有较显治疗作用。     

代谢组学应用于中医药研究的思考

代谢组学是关于生物体内源性代谢物质种类、数量及其变化规律的学科。本论文在分析国内外有关代谢组学应用于中医药研究的文献基础上,探讨代谢组学与中医证候、中医整体观、中药质量标准化研究、中药的活性成分的研究以及中药方剂研究的关系,认为代谢组学能够以现代化的科技手段实现对活体组织器官进行无损伤、几乎接近生理条件的动态研究,这种研究特点与中医学的整体观、系统观和辨证论治思维相吻合,与中医认识和解释疾病的方法相一致;采用系统生物学的策略和方法,以基于疾病和药物干预下的系统代谢网络的整体性和动态性的变化来评价中药整体效应,用以解释中药方剂对疾病的治疗作用,使得代谢组学成为中药现代化研究中一个非常合适的方法。代谢组学将会是中医药现代化研究较为合适的切入点而且非常有用的技术手段。     

肝豆状核变性中医证型与统一 Wilson病评定量表相关性分析

目的探讨肝豆状核变性(又称威尔逊病, Wilson Disease,WD)病人中医证型与统一 Wilson病评定量表相关性。方法纳入 2016年 8月至 2018年 9月在安徽中医药大学第一附属医院住院的肝豆状核变性病人 80例,对其进行中医证候辨证分型,进行统一 Wilson病评定量表评分。采用方差分析、二元 logistic回归分析探讨不同中医证型 WD与统一 Wilson病评定量表评分的相关性。结果 80例病人中,痰瘀互结证是最为常见的中医证型,其次为湿热内蕴证。痰瘀互结证( 36.82±21.13)分的神经功能评分高于脾肾阳虚证( 12.25±14.40)分,且低于肝气郁结证( 59.5±22.74)的神经功能评分,差异有统计学意义;肝气郁结证的神经功能评分明显高于脾肾阳虚证,差异有统计学意义;湿热内蕴证( 5.33±1.85)分及脾肾阳虚证( 5.50±2.28)分的肝脏功能评分均高于痰瘀互结证( 3.51±1.59)分,均差异有统计学意义;肝气郁结证( 9.67±2.34)分精神症状评分高于痰瘀互结证( 2.00±1.73)分、湿热内蕴证( 2.67±2.35)分及脾肾阳虚证( 1.50±1.62)分,差异有统计学意义。神经功能评分与痰瘀互结证呈正相关(OR＝1.767,P＜0.05)而与脾肾阳虚证呈负相关( OR＝0.849,P＜0.05),肝脏功能评分与湿热内蕴证、脾肾阳虚证与呈正相关(OR＝1.384,P＜0.05,OR＝2.976,P＜0.05)而与痰瘀互结证呈负相关( OR＝0.516,P＜0.05)精神症状评分与肝气郁结证呈正相关( OR＝3.128,P＜0.05)。结论 Wilson,病不同中医证型之间的统一 Wilson病评定量表功,能评分具有一定的差异性,并且不同中医证型与统一 Wilson病评定量表功能评分具有一定相关性。     

铜对大鼠学习记忆和海马区超微结构的影响

目的观察铜负荷饮食对大鼠空间学习记忆行为和海马超微结构的影响。方法 40只雄性大鼠随机分为模型组和空白对照组各20只,采用Morris水迷宫实验测试大鼠学习记忆能力,采用原子吸收法检测肝、脑组织铜元素含量,电镜技术观察海马区超微结构变化。结果 Morris水迷宫实验:模型组大鼠在定位航行试验中平均逃避潜伏期较正常对照组显著延长,空间探索试验中穿越平台次数较正常组明显减少(P<0.01),与正常对照组比较,模型组大鼠肝、脑组织铜含量明显增加(P<0.01),海马组织内模型组大鼠神经元突触间隙明显变宽(P<0.05),突触后致密物厚度明显变薄(P<0.05)。结论铜可能通过损伤海马超微结构引起大鼠学习记忆功能障碍。     

帕金森病发病机制的研究

帕金森病(PD)也称震颤麻痹,是中老年人常见的中枢神经系统变性疾病,由缓慢发生的选择性中脑黑质多巴胺能神经元丧失和纹状体多巴胺含量显著减少,导致锥体外系的一系列症状,以静止性震颤、运动迟缓、肌强直、姿势步态异常为主要特征.     

毒邪在肝豆状核变性致病中的作用

目的:目的:探讨毒邪在肝豆状核变性发病中的地位。方法:阐述传统医学及现代医学对毒邪的认识,毒邪对机体造成的损害,并重点阐述毒邪在肝豆状核变性致病中的作用。结果:毒邪是临床上常见的致病之邪,它可造成机体多方面的损害,肝豆状核变性是一全身性疾病,涉及多个系统、器官,铜浊毒邪内聚体内是其发病的病理生理学基础,也是从毒论治的依据所在。结论:毒邪在肝豆状核变性致病中起着十分重要的作用,铜毒内蓄,损伤肝络、脑络以及全身的络脉是肝豆状核变性的病机关键,从毒论治是肝豆状核变性的临床治疗的重要途径。     

提高帕金森病动物模型制作成功率的方法学探讨及模型综合评价

目的探讨提高6-OHDA帕金森病(PD)大鼠模型制作成功率的方法,并对模型进行综合评价。方法取SD大鼠90只,将6-OHDA立体定向注射于左侧黑质区及中脑腹侧被盖,观察大鼠的行为、黑质抗氧化指标、线粒体呼吸链及黑质细胞形态学的变化。结果①经阿朴吗啡诱导后共筛选出成功模型64只,成功率为71%;②模型大鼠黑质区ROS、MDA水平均明显升高,而GSH-Px活性则明显降低;③模型大鼠黑质区存在线粒体呼吸链功能障碍;④免疫组化发现注射侧黑质区多巴胺能神经元较对侧明显减少(P<0.001);⑤电镜观察发现模型大鼠黑质细胞同时存在凋亡、变性和坏死样改变。结论应用本方法可较快建立稳定的成功率较高的PD大鼠模型,该方法是通过增强氧化应激、干扰线粒体呼吸链功能、诱导凋亡甚至引发坏死等不同机制损毁多巴胺能神经元的,同PD的发病机制基本一致。     

抗震止痉胶囊合谷胱甘肽对帕金森病患者血抗氧化酶影响

目的：观察中药制剂抗震止痉胶囊合谷胱甘肽治疗帕金森病（PD）的临床疗效及其对患血抗氧化酶的影响。方法：将西医常规治疗疗效明显衰减的PD病人88例随机分为中药组（30例）、中药加谷胱甘肽组（29例）及西医常规治疗组（29例）,分别给予相应的治疗,另设正常对照组20例,观察其疗效,并检测各组用药前后的血抗氧化酶活性。结果：（1）显效率比较：中药组56．7％,中药加谷胱甘肽组为75．8％,西医常规治疗组为44．8％,中药加谷胱甘肽组与中药组及西医常规治疗组比较,其显效率均有显差异（P＜0．05,P＜0．01)。（2）Webster评分比较;中药组和中药加谷胱甘肽组治疗前后Webster评分比较均有显差异（P＜0．05,P＜001）。（3）对血抗氧化酶的影响。中药组、中药加谷胱甘肽组、西医常规治疗组治疗前抗氧化指标均较正常组明显差异（P＜0．05或P＜0．01）,中药加谷胱甘肽和中药组对PD患血抗经酶活性均有增强效应（P＜0．05,P＜0．01）;而西医常规治疗组血抗氧化酶活性治疗后明显下降（P＜0．05）。结论：抗震止痉胶囊合谷胱甘肽对西医常规治疗疗效明显衰减的PD患具有较好的疗效。提示其对PD可能具有神经保护治疗作用,而西医常规治疗在一定程度上降低了PD病人的抗氧化能力,提示长期服用左旋多巴可能会在一定程度上加速病情进展。     

中西药并用治疗短暂性脑缺血发作临床研究

目的观察中西医结合治疗短暂性脑缺血发作（TIA）的临床疗效。方法将70例TIA患者随机分为治疗组35例，对照组35例，治疗组采用血塞通、自拟化痰逐瘀汤配合西药治疗，对照组单用上述西药治疗。结果治疗组总有效率明显高于对照组（P〈0.01）。结论中西医结合治疗TIA优于单用西药治疗。