大鼠骨髓间充质干细胞的分离、培养和鉴定

目的 探讨体外分离和培养大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的生物学特性,对其表型和生长曲线进行初步鉴定.方法 采用全骨髓培养法提取培养MSCs,绘制原代及三代细胞生长曲线,利用免疫组化法检测表面标志物CD34、CD44;流式细胞分析法检测表面标志物CD90.结果 成功培养出MSCs,免疫组化CD44阳性表达,CD34阴性表达;流式细胞术CD90阳性表达.结论 该实验分离培养的细胞群与MSCs的生物学特性相吻合,说明MSCs易于体外分离、培养和扩增.     

急性心肌梗死经皮冠状动脉介入治疗后心肌灌注的方法评价

目的　联合应用TIMI心肌灌注分级 (TMP)、校正的TIMI画面记帧 (CTFC)、心电图ST段变化 (sumSTR)方法评价急性心肌梗死 (AMI)急诊经皮冠状动脉介入治疗 (PCI)后心肌灌注程度 ,探讨心肌灌注程度对临床预后的影响。方法　 77例AMI患者PCI后即刻采用TMP CTFC、TMP sumSTR、CTFC sumSTR三种联合方法评价心肌灌注程度 ,PCI术后 1个月检查双核素心肌灌注显像 ,记录 6个月心脏事件。结果　评价心肌灌注程度 ,与双核素心肌灌注显像对比 ,TMP sumSTR敏感性 86 7%、特异性 85 7%、准确性 86 2 % ;TMP CTFC敏感性 80 %、特异性 77 1%、准确性 78 5 % ;多变量回归分析TMP 0 / 1级 sumSTR <30 %为 6个月心脏事件的独立危险因子 (OR=2 1 5 ,95 %可信区间 2 7～ 6 5 7,P =0 0 0 3) ;Kaplan Meier分析曲线显示TMP sumSTR方法评价的心肌灌注不良组 6个月心脏事件高于心肌灌注良好组 (P <0 0 5 )。结论　TMP sumSTR、TMP CTFC能更好的评价心肌灌注程度 ;TMP sumSTR可预测 6个月心脏事件。     

急性心肌梗死介入治疗后细胞因子变化与心肌灌注的关系

目的：探讨急性心肌梗死（AMI）介入治疗（PCI）后白介素-8（IL-8）、可溶性细胞间黏附分子-1（sICAM-1）变化与心肌灌注的关系。方法：AMI（ST段抬高）病人98例，接受急诊PCI治疗，于术前5min，术后6h、12h、24h分别抽取动脉血标本，采用酶联免疫双抗体夹心法（ELISA）检测sICAM-1及IL-8。PCI术后1mo做双核素心肌灌注显像（DISA SPECT）检查，根据心肌灌注程度分为心肌灌注不良组、心肌灌注良好组。结果：IL-8在PCI术前5min两组均已呈现升高趋势（P=0，728）；术后6h心肌灌注不良组进一步升高达峰值（P=0．001）；术后12h（P=0．009）、24h（P=0．023）心肌灌注不良组仍高于心肌灌注良好组。sICAM-1在PCI术前5min两组间无显著差异（P=0．099）；术后6h、12h、24h均持续高于心肌灌注良好组（P〈0．05）。结论：AMI病人PCI术后心肌灌注不良组血浆IL-8，sICAM-1水平明显高于心肌灌注良好组，提示细胞因子IL-8，sICAM-1参与血运重建后心肌灌注障碍的发生、发展。     

腺相关病毒介导的血管内皮生长因子基因与骨髓间充质干细胞联合治疗大鼠肢体缺血的研究

目的 探讨腺相关病毒(rAAV)介导的人血管内皮生长因子(VEGF)165基因转染大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)移植对血管新生的影响.比较单纯干细胞移植与联合基因治疗的疗效.方法 全骨髓培养法提取培养MSC;rAAV-VEGF165转染MSC中,酶联免疫吸附试验(ELISA)及反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测VEGF的表达;以近交系大鼠建立骨骼肌缺血模型,40只大鼠随机分为4组,每组10只.对照组注射磷酸盐缓冲液(PBS);干细胞组移植等量MSC,转染术后7 d组和转染术后10 d组分别于结扎7 d和10 d后的缺血区移植转染VEGF基因的MSC,移植6周后做Ⅷ因子染色检测血管新生情况.结果成功培养出MSC,免疫组化CD44阳性表达,CD34阴性表达;流式细胞术CD90阳性表达.在转染rAAV-VEGF165后转染组1、3、5、7、9 d上清液中VEGF165分泌水平分别为(131.98±6.00)、(263.96±4.58)、(540.85±5.97)、(208.98±5.06)、(174.45±5.00)ng/L,明显高于未转染组的(68.72±1.99)、(76.47±4.98)、(89.86±1.99)、(84.93±8.97)、(68.71±5.98)ng/L[t值分别为14.14、51.16、79.28、27.56、26.07,(均P＜0.05)],且5 d时达到高峰,此后表达开始下降.琼脂糖凝胶电泳可见在579 bp处见到高亮度条带,证明rAAV-VEGF165成功转染进MSC细胞中.转染后的生长曲线及细胞形态较未转染组无明显变化.Ⅷ因子染色示转染术后10 d组动物缺血区毛细血管密度[(9.35±2.72)条/视野]明显高于对照组[(1.05±0.50)条/视野]和干细胞组[(3.10±1.43)条/视野](均P＜0.01),较转染术后7 d组[(6.95±1.69)条/视野]亦有一定程度的升高(P＜0.05).结论 MSC有利于VEGF基因的稳定表达,可作为VEGF基因的良好细胞载体,且联合应用效果高于单独移植MSC,移植最佳时间为术后10 d.     

重组腺相关病毒介导人血管内皮生长因子165基因在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达

目的探讨以腺相关病毒(rAAV)为血管内皮细胞生长因子165基因(VEGIF165)载体,在体外转染大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),并研究其相关特性。方法 (1)全骨髓培养法提取培养MSCs,利用免疫组化法检测MSCs表面标志CD34、CD44;流式细胞分析法检测CD90。(2)rAAV-VEGF165转染MSCs,采用ELISA及PCR检测VEGF的表达,比较转染前后细胞的变化情况,观察VEGF165基因转染对MSCs的影响。结果 (1)成功培养出MSCs,CD44阳性表达,CD34阴性表达,CD90阳性表达。(2)在转染rAAV-VEGF165后转染组上清中VFGF165分泌水平明显高于未转染组(p<0.05),5 d时达到高峰,此后表达开始下降。琼脂糖凝胶电泳可见高亮度条带。表明rAAv-VEGF165成功转染进MSCs细胞中,绘制生长曲线,显示rAAV-VEGF165基因转染后对MSC生长无影响。结论rAAV-VEGF表达载体可有效感染MSCs,并在体外高效表达,为MSCs联合基因治疗提供了实验依据。     

Kounis综合征一例

<正>1 病例资料患者男性,61岁,因"皮疹、腹泻12 h"入院。患者12 h前进食蚕蛹及鸭肠,进食3 h后躯干出现大面积红色斑丘疹,伴瘙痒,腹泻,皮疹进行性加重,渐出现周身大汗、湿冷、胸闷气短,不伴胸痛、黑曚、晕厥,症状持续不缓解。120送至当地医院,入院后即刻给予吸氧、心电血氧监护。查体:血压76/42 mmHg,心率98次/min,呼吸24次/min,血氧饱和度98%(鼻导管吸氧),意识清楚,烦躁,全身大汗,面色苍白、眼睑水肿明显、     

心电图方法评价急性心肌梗死介入治疗后心肌灌注与临床预后

目的 :用心电图方法包括ST段最大偏移 (maxSTE/sumSTR)评价急性心肌梗死 (AMI)介入治疗 (PCI)后心肌组织灌注程度。方法 :77例AMI患者接受PCI治疗 ,每例于PCI治疗术前、术后 90min记录12导联心电图并计算maxSTE/sumSTR ;术后 1个月内做双核素心肌灌注显像 ;记录住院期间心功能不全及 6个月心脏事件。结果 :maxSTE预测心肌灌注敏感性 80 % ,特异性 85 . 7% ,准确性 83 1% ;sumSTR(70 )预测心肌灌注敏感性 4 6 . 6 % ,特异性 77 1% ,准确性 6 3 .1% ;sumSTR(5 0 )预测心肌灌注敏感性 5 6 . 7% ,特异性 5 4. 3% ,准确性 5 5. 4 %。Logistic多变量回归分析显示仅maxSTE为住院期间心力衰竭、6个月心脏事件独立危险因子。Kaplan -Meier过程分析曲线显示maxSTE高危组 6个月心脏事件高于中低危组 (P <0 . 0 5 ) ,sumSTR 70 %有明显趋势 ,但无统计学差异 (P >0. 0 5 )。结论 :采用心电图ST段变化方法评价AMI血运重建后心肌灌注程度具有较好的临床应用价值 ;maxSTE方法优于sumSTR方法 ,临床应用更为准确 ,方便 ,灵活。     

视黄酸相关孤儿受体-白介素-23信号通路诱导病理性Th17细胞分化介导血压升高机制研究

目的:探讨视黄酸相关孤儿受体(RORγt)-白介素-23(IL-23)信号通路在病理性辅助性T细胞17(Th17)分化及盐敏感性高血压(SSHT)发病中的免疫机制,揭示RORγt-IL-23R信号通路通过调节Th17细胞的功能在高血压中的作用.方法:收集临床病例共90例,根据盐负荷试验,筛选盐敏感性高血压患者、非盐敏感...     

心力衰竭病人NT-proBNP与心功能水平相关性研究

近年来研究认为,血浆脑钠肽（BNP）是由心室心肌细胞分泌的由32个氨基酸组成的多肽物质,具有利钠、利尿、扩张血管、抑制肾素-血管紧张素-醛固酮系统和交感神经系统兴奋的作用。BNP的合成过程中除了生成具有生理活性的C末端的BNP以外,     

CXCL16及其受体与冠状动脉粥样硬化的关系

近年来,经皮冠状动脉介入治疗已成为冠心病的有效治疗手段。然而,支架植入后再狭窄的出现严重限制了临床预后。多种机制因素参与支架内再狭窄的发生发展过程。CXCL16及其受体在炎症反应中扮演重要角色,本文就CXCL16及其受体与支架内再狭窄的形成机制进行综述。