CD151基因转移对大鼠心肌梗死缺血心肌eNOS表达影响的实验研究

目的 通过将携带人CD151基因的重组腺病毒相关病毒(rAAV)载体注入缺血心肌,观察CD151对缺血心肌eNOS表达的影响.方法 制作大鼠急性心肌梗死模型,将rAAVCD151注入缺血心肌.4周后取注射部位心肌,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测外源性CD151 mRNA的表达,Western blot检测CD151的表达,检测eNOS的表达情况,了解高表达CD151对eNOS表达的影响.结果 术后4周,CD151组心肌组织检测到外源性CD151 mRNA的表达,假手术组、对照组、GFP组未检测到外源性CD151 mRNA的表达,且CD151组心肌组织CD151蛋白表达水平高于假手术组、对照组、GFP组(P＜0.05);CD151组eNOS与磷酸化eNOS比值明显增加,与对照组、GFP组比较明显增加(P＜0.05).结论 rAAV-CD151可以有效地转染大鼠心肌组织,激活eNOS,促进缺血心肌的血管生成,改善左室功能.     

CD151基因转移对大鼠缺血心肌VEGF表达影响的实验研究

目的 通过将携带人CD151基因的重组腺病毒相关病毒(rAAV) 载体注入缺血心肌, 观察CD151对缺血心肌VEGF表达的影响.方法 制作大鼠急性心肌梗死模型,将rAAV-CD151注入缺血心肌.4 w后取注射部位心肌,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测外源性CD151 mRNA的表达、Western印迹法检测CD151及VEGF的表达情况,了解高表达CD151对VEGF表达的影响.结果 术后4 w,CD151组心肌组织检测到外源性CD151 mRNA的表达,假手术组、对照组、GFP组未检测到外源性CD151 mRNA的表达,且CD151组心肌组织CD151蛋白表达水平高于假手术组、对照组、GFP组(均P＜0.05);CD151组VEGF表达无明显增加,与对照组、GFP组比较无明显增加(均P＞0.05).结论 rAAV-CD151可以有效转染大鼠心肌组织,促进缺血心肌的血管生成,改善左室功能,但对VEGF表达没有影响.     

慢病毒介导fgl2基因沉默对心肌微血管内皮细胞Ang-1、Ang-2mRNA表达及细胞增殖、迁移的影响

目的:观察纤维介素2(fgl2)基因沉默对心肌微血管内皮细胞(MMVECs)增殖、迁移及血管生成素-1、-2(Ang-1、Ang-2)mRNA表达的影响。方法:制作并包装人fgl2RNA干扰慢病毒fgl2-RNAi-LV。将细胞分为单纯MMVECs组(对照组)、GFP空载体慢病毒转染组(GFP组)和fgl2-RNAi-LV转染组。稳定转染4d后,应用实时定量RT-PCR法检测各组fgl2、Ang-1和Ang-2mRNA的表达,MTT法检测细胞增殖,Transwell法检测细胞迁移能力。结果:与对照组及GFP组比较,fgl2-RNAi-LV转染组fgl2mRNA表达明显下调(F=180.301,P<0.001),Ang-1、Ang-2mRNA的表达明显增加(F=59.450和54.572,P<0.001),MMVECs的增殖能力与迁移能力增强(F=5.341和6.122,P<0.05);对照组与GFP组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:fgl2基因沉默促进MMVECs的增殖、迁移,其分子机制可能与Ang-1、Ang-2mRNA表达上调有关。     

急性冠状动脉综合征患者血清Fgl2水平升高的临床意义北大核心CSCD

目的检测急性冠状动脉综合征（ACS）患者外周血清中纤维介素（Fgl2）的水平,分析它与ACS及冠状动脉狭窄程度的相关性,探讨Fgl2在ACS中的临床价值。方法选择冠心病患者46例,其中急性心肌梗死患者（AMI组）12例、不稳定型心绞痛患者（UAP组）19例、稳定型心绞痛患者（SAP组）15例和非冠心病者（NCHD组）16例。冠心病患者根据冠状动脉造影结果,按冠状动脉病变支数分为三支病变组、双支病变组与单支病变组。酶联免疫吸附法（ELISA）测定各组血清Fgl2水平,比较各组血清Fgl2水平变化。按照Gensini评分评价冠心病患者冠状动脉狭窄程度,并评价血清Fgl2水平与冠状动脉狭窄程度的相关性。结果ACS组Fgl2水平明显高于SAP组和NCHD组（P〈0．05）,SAP组与NCHD组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。不同病变支数组之间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。Gensini评分显示,AMI组与UAP组、SAP组之间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论ACS患者急性期血清Fgl2水平明显增加,可能是冠心病特别是ACS冠状动脉微血栓形成有预测价值的急性时相性蛋白之一。冠心病患者冠状动脉狭窄程度与血清Fgl2水平无明显相关性。     

CD151对心肌梗死血流动力学的影响及其信号机制

目的 探讨CD151对大鼠心肌梗死模型血流动力学的影响及其分子学机制.方法 制作大鼠心肌梗死模型,将携带人CD151基因的重组腺病毒相关病毒(rAAV)载体注入缺血心肌.4周后,心导管测定心脏功能,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测外源性CD151 mRNA的表达,Western blot检测CD151、PI3K、Akt的表达.结果 心肌梗死后左室功能明显下降,CD151高表达能够明显改善左室功能,并可上调磷脂酰肌醇3-激酶和磷酸化的蛋白激酶B的表达.结论 CD151基因的导入能够改善心室功能,其分子机制与PI3K/Akt信号通路的激活有关.