外周血中表面活性蛋白D mRNA的表达与非小细胞肺癌关系的探讨

非小细胞肺癌(NSCLC)约占肺癌的75％，血行播散是其复发转移的主要方式，不仅严重影响患者预后，而且是选择治疗方案的关键因素。Ⅱ型肺泡上皮细胞被认为是肺癌的祖细胞，能够合成分泌SP-D．正常外周血单核细胞中不表达SP-D mRNA。Christoph Betz等学者首次提出SP-D mRNA可     

竞争性RT-PCR定量检测AFP mRMA在肝癌组织中的表达

通过检测外周血AFP mRNA可确定原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)表达高低与肝癌复发、转移及预后密切相关[1～3].本文建立了一种具有内参照的定量检测AFP mRNA的竞争性RT-PCR方法,并初步对肝癌组织及癌旁组织中AFP mRNA的表达进行定量分析,现报道如下.     

乙型肝炎病毒总DNA、共价闭合环状DNA和HBsAg在各种慢性乙型肝炎病毒感染者中的定量检测

目的 定量检测慢性乙型肝炎(CHB)、乙型肝炎肝硬化(LC)、肝细胞癌(HCC)患者HBV总DNA(tDNA)、HBV共价闭合环状DNA (cccDNA)和HBsAg,并探讨其特点.方法 荧光定量PCR检测21例CHB、23例LC和25例HCC患者外周血和肝组织标本HBV tDNA、HBVcccDNA,化学发光法定量检测外周血HBsAg.正态数据采用ANOVA分析和t检验,相关性分析采用Pearson检验,非正态数据采用秩和检验.结果 在CHB、LC和HCC患者中,外周血HBVtDNA分别为(5.38±2.08)、(4.96±1.65)和(4.18±0.91)lg拷贝/mL,肝组织HBV tDNA分别为(7.18±1.91)、(6.51±1.87)和(5.87±1.47)lg拷贝/μg,肝组织HBV cccDNA分别为(3.53±2.03)、(2.63±2.13)和(0.58±1.40)lg拷贝/μg,外周血H BsAg分别为(3.30±0.65)、(3.12±0.52)和(2.60±1.03)lg IU/mL,CHB与HCC患者比较,差异均有统计学意义(t=2.446,P=0.013;t=2.562,P=0.014;t=5.799,P＜0.01;t=2.709,P=0.003),LC与HCC患者肝组织HBVcccDNA及HBsAg定量比较,差异有统计学意义(t=-3.894,P＜0.01;t=-2.237,P=0.023).外周血均未检出HBV cccDNA.HBsAg定量与外周血HBV tDNA(r=-0.290,P=0.016)、肝组织HBV tDNA(r=0.372,P=0.002)及肝组织HBV cccDNA(r=0.378,P=0.001)均有关.结论 HBV tDNA、HBV cccDNA、HBsAg在CHB、LC、HCC患者呈逐渐降低趋势,HBsAg定量与外周血HBV tDNA、肝组织HBV tDNA及肝组织HBV cccDNA有关.     

聚酸酐-氨基葡聚糖作为干细胞载体的研究

研究聚酸酐-氨基葡聚糖三维载体材料对胎儿肝干细胞黏附及增殖的影响,寻找胎儿肝干细胞新的载体材料。采用改进的两步胶原酶灌注消化法加Percoll液不连续密度梯度离心的方法,分离胎儿肝干细胞。选取胎儿肝干细胞的传代细胞,种植于聚酸酐-氨基葡聚糖三维载体材料上。倒置显微镜下观察细胞的黏附和生长状况;计算细胞贴壁率;MTT法检测各组细胞的吸光度值(OD值);收集载体支架上细胞并计数。取细胞载体进行组织学切片,HE染色光镜下观察。在细胞培养第7 d进行免疫荧光化学染色和流式细胞仪检测。结果表明,聚酸酐-氨基葡聚糖三维载体能促进肝干细胞在材料内黏附并保持其在机体内的形态;载体材料内的肝干细胞功能活跃;在材料表面和三维空间内部培养的肝干细胞均能持续增殖;经过连续40 d共同培养聚酸酐-氨基葡聚糖三维载体对干细胞无毒性,人胎儿肝干细胞可以很好的贴附于聚酸酐-氨基葡聚糖三维载体支架上,细胞增殖活力良好,标志物持续表达,培养7 d得到的细胞数量增多19.7%。聚酸酐-氨基葡聚糖三维载体能促进肝干细胞的增殖,可作为肝干细胞的载体应用于肝脏组织工程。     

IL-10、ALDH_2的单核苷酸多态性与原发性肝细胞癌遗传易感性的研究

目的探讨白细胞介素-10(IL-10)和乙醛脱氢酶2(ALDH2)的10个单核苷酸多态性(SNP)与天津地区汉族人原发性肝细胞癌(HCC)易感性的相关性。方法研究用从外周血血凝块及肝组织中提取的基因组DNA、肝组织提取总RNA的逆转录产物作为扩增模板,应用聚合酶链式反应、寡核苷酸基因芯片杂交的方法对115例天津地区汉族人IL-10启动子区3个多态位点(-1082A／G、-829T／C、-592A／C)等位基因和基因型频率进行分析,慢性乙型肝炎、肝硬化、健康对照各30例,HCC25例。HCC组和健康对照组同时进行了ALDH26个多态位点(rs1064933、rs671、rs11066025、rs7397491、rs2158028、rs2106696:前2个位于外显子区域,后4个位于内含子区域)的分析。另外,对于肝癌组还分析了两种基因包括ALDH2 rs1062136 A／T在内的10个多态位点的基因型在肿瘤组织及正常肝组织(手术切缘)中是否存在差异。应用卡方检验比较各组问的等位基因和基因型频率,分析等位基因及基因型与HCC及肝病的相关性。     

半定量RT-PCR检测9个基因在肝癌中的差异表达

目的对AFP、COL1A2、UBD、FOXM1b、GPC3、SPINT2等6个高表达基因和DLC-1、WWOX、IGFBP3等3个低表达基因在肝癌和癌旁不同距离组织中的表达进行研究,以确定从癌组织逐渐向正常组织的过渡过程中,这些基因的表达是否存在趋势性变化,以及这些基因的表达与临床病理特征之间是否存在联系。方法收集肝癌手术标本并保存于-80℃;从肝癌及其对应的癌周组织中提取mRNA,然后应用RT-PCR技术对9个基因进行扩增,PCR产物行凝胶电泳;最后用电泳条带灰度分析软件对9个基因的表达情况进行半定量分析。     

肝细胞癌多基因甲基化异常及其临床意义

目的 探讨肝细胞癌中多基因甲基化异常的发生率,研究肝细胞癌中多基因甲基化异常的临床意义.方法 收集60例肝细胞癌及相应的癌旁组织、16例肝炎后肝硬化组织、5例慢性肝炎和5例正常肝组织,筛选消化道肿瘤中APC、RASSF1A、p16、GSTP1、MGMT、DAPK、SOCS-1和RIZ18个甲基化异常频率高的肿瘤抑制基因,应用甲基化特异件聚合酶链反应(MSP)检测8个肿瘤抑制基因在所有标本中的甲基化状态.比较不同基因甲基化与非甲基化肝细胞癌患者的临床病理特征和生存情况.结果 肝细胞癌组织中,RASSF1A、APC、GSTP1、p16、RIZ1和MGMT基因的甲基化率分别为95.0%、90.0%、73.3%、65.0%、61.6%和60.0%,均高于相应的癌旁组织(均P＜0.05);癌旁组织中,MGMT、GSTP1和RIZ1基因的甲基化率分别为41.6%、40.0%和25.0%,均高于肝硬化组织(均P＜0.05).p16基因甲基化的肝细胞癌患者的平均年龄大于非甲基化者;巨块性肝细胞癌中,MGMT基因甲基化者的比例高于非甲基化者;MGMT基基甲基化者的无瘤生存期短于非甲基化者.结论 不同基因在肝细胞癌、癌旁和肝硬化组织中的甲皋化率差异显示了肝细胞癌发生中渐进的表观遗传学改变;GSTP1、RIZ1和MGMT基因的甲基化异常具有肿瘤风险评估和早期诊断价值,而MGMT基因的甲基化异常同时具有预后评估价值.     

微囊化转基因修饰细胞的研究进展

本文综述了近年来有关微囊化转基因修饰细胞的研究进展。包括生长激素、第Ⅸ凝血因子、神经营养因子和尿素酶基因等在内的多个基因已用于动物模型中，结果表明微囊化转基因修饰细胞具有临床应用前景。     

RT—PCR检测外周血中肝癌细胞的研究进展

应用ＲＴ－ＰＣＲ技术检测外周血中肝癌细胞是近年发展起来的新方法，白蛋白ｍＲＮＡ和ＡＦＰｍＲＮＡ为肝组织特异表达，通过检测这二个转录子作为肝癌细胞存在于外周血的标记，有助于判断肝癌的转移，复发。本文综述了近年有关这方面的研究进展。     

516例性病患者病原体检测结果分析

我们应用聚合酶链反应 (ＰＣＲ)技术对５１６例性病患者进行淋球菌 (ＮＧ)、沙眼衣原体 (ＣＴ)和解脲支原体 (ＵＵ)三种病原体的检测 ,并分析其感染情况 ,现将结果报道如下。１资料与方法１ １１９９８年５月～２０００年２月期间我院性病门诊患者５１６例 ,男性尿道炎患者３５４例 ,女性宫颈炎、尿道炎、阴道炎患者１６２例 ;有２３对为夫妻 ;有５４例进行了一次至多次复查 ,从２周到１年不等。１ ２标本采集及处理 :用无菌特制拭子 ,男性进入尿道２～３ｃｍ ,女性进入宫颈口２ｃｍ并做停留后取出 ,置于１ ５ｍｌ灭菌离心管中 ,加入１ｍｌ…