腺病毒介导的心肌蛋白激酶Cε基因转移导致心功能损害

目的本文旨在研究腺病毒介导的成年小鼠心肌直接PKCε基因转移对左室收缩功能的影响。方法使用标准方法建立表达PKCt基因的重组腺病毒载体。直接注射重组腺病毒到FVB／N和ICR小鼠心肌，对照鼠给予相同剂量空载腺病毒。Western免疫印迹测定PKCε蛋白质表达水平。用非开胸经颈总动脉插管的显微外科技术评价小鼠左室收缩功能。结果与对照鼠相比基因转移鼠心肌转基因PKCε蛋白质表达水平增加近4倍，基线左室最大收缩压、最大收缩速率（dP／dt）、-dP／dt明显降低，左室舒张末压、舒张压明显升高（P〈0．01），异丙肾上腺素激发后左室dP／dt剂量依赖的升高明显减弱（P〈0．01），PKCε基因转移鼠心脏／体重比也较对照鼠明显增加（P〈0．01）。结论腺病毒介导的、心肌直接的PKCε基因转移诱发了左室收缩功能的损害，导致了心肌肥厚和心衰。     

2008年心血管临床研究争议与焦点

2008年是国际心血管临床研究不平凡的一年。这一年中，有多项阴性结果的临床研究问世，在世界范围内引起很大反响，有几项研究引起的质疑已经超过了它们所能说明的问题。各国学者们甚至对研究假设的意义和研究证据对扩展临床实践范围的价值产生了怀疑。有些研究还提醒我们使用标志物替代终点了解药物对疾病或疾病严重性的影响仍不能取代对药物影响疾病预后的了解。以下摘要介绍2008年最引人注目的几项临床研究。     

心肌肥厚及肥厚逆转和慢性心力衰竭大鼠模型的建立及评价体系

目的探讨压力负荷型心肌肥厚（POH）、肥厚逆转和慢性心力衰竭（CHF）大鼠模型的建立及其评价体系。方法8周龄SD雄性大鼠100只编码后按4：1比例分为2组：腹主动脉缩窄（AAC）组（80例）和假手术组（20例）,分别行肾上腹主动脉缩窄术或假手术。术后12周,根据超声左心室质量／体质量,AAC组进一步分为心肌肥厚组、肥厚逆转组、心衰组,分别给予正常饮食、福辛普利和卡维地洛灌胃、高盐饮食。结果超声、血流动力学、心质量／体质量、组织形态学等方面证据表明假手术组未发生心肌肥厚和心衰,心肌肥厚组出现明显心肌肥厚,肥厚逆转组表现为心肌肥厚的逆转心衰组则建立了明确的心衰。结论采用AAC法可以建立大鼠POH模型,血管紧张素转换酶抑制剂与B阻滞剂合用可明显恢复POH模型的肥厚心肌而形成肥厚逆转模型,在钠负荷下可促使POH进展为CHF而形成CHF模型。用超声心动图、血流动力学、心肺重量指数、光镜下心肺组织形态学证据结合症状观察,能较好地识别大鼠的心肌肥厚和CHF。     

腺病毒介导的心肌蛋白激酶Cε基因转移的心肌保护作用

目的　蛋白激酶Cε (ProteinKinaseCε,PKCε)转基因小鼠表现了保护心肌缺血 /再灌注损伤的遗传特性 (心肌保护表型 )。本文旨在研究腺病毒介导的成年小鼠心肌直接的PKCε基因转移对心肌缺血 -再灌注损伤的影响。方法　通过克隆PKCεcDNA到人类 5型腺病毒基因组DNA的E1区建立表达PKCε基因的重组腺病毒。直接注射重组腺病毒 3 3× 10 10 菌落形成单位 (pfu) /体重 (kg)到小鼠 (10～ 13周 ) ,对照鼠被直接注射相同剂量的空载腺病毒。Western免疫印迹被用于测定PKCε蛋白质表达水平。通过冠状动脉阻断 /再灌注、染色、照像和微机计算进行心肌梗死分析。结果　PKCε重组腺病毒直接心肌注射优于静脉注射 ;直接心肌注射后 4 8h ,基因转移鼠心肌PKCε蛋白质表达水平比对照鼠增加近 4倍。心脏重、左室重、危险区重和危险区重 /左室重百分数在PKCε基因转移和对照小鼠之间无显著差异 ,而PKCε基因转移小鼠的梗死重 [(35 4± 3 1)mgvs(10 3±1 3)mg]、梗死 /危险区域百分数 (5 1 1%± 0 3%vs 17 0 %± 2 6 % )、梗死 /左室百分数 (30 0 %±3 0 %vs 9 2 %± 0 5 % )明显低于对照鼠 (均P <0 0 1)。结论　腺病毒介导的、心肌直接的PKCε基因转移小鼠表现了对心肌梗死的保护作用。     

PKCε在心肌肥厚中的作用地位

心肌肥厚(Myocardial Hypertrophy,MH)是心脏在负荷增加时的一种常见而重要的适应性反应,可发生于高血压、瓣膜病、心肌梗死等疾病,是增加心血管病病死率和病残率的独立预测因子[1]。MH的发生是多因素的,机械压力刺激、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、内皮素1(ET-1)、α1肾上腺素等神经内分泌和细胞因子均可造成心肌肥厚。这些导致肥厚的刺激因素能通过激活细胞内多种信号分子(如PKC、受体TPK、Ras、MAPK家族、JAK等)诱导相关的基因表达和蛋白质合成增加[2]。蛋白激酶C(pro-tein kinase C,PKC)是1977年在鼠脑的胞质成分中发现的一种蛋白…     

蛋白激酶Cη转基因过渡表达未引起心肌肥厚和心衰——介绍转基因小鼠体内心功能评价方法

目的　蛋白激酶Cη(PKCη)转基因对心脏表型的影响。 方法表达低水平 (Tg PKCη L)和高水平 (Tg PKCη H)靶心脏野生型PKCη的转基因小鼠通过标准技术被建立。Tg PKCη L、Tg PKCη H阳性鼠通过PCR和Southern印迹鉴定 ,转基因阴性鼠作为研究对照。用非开胸经颈总动脉插管的显微外科技术测血液动力学指标和评价小鼠左室收缩功能。Western免疫印迹分析α 骨骼肌肌动蛋白 (α \|SkeletalMuscleActin)和PKCη表达水平。苏木精染色进行心脏组织学分析。 结果与对照鼠相比Tg PKCη L、Tg PKCη H鼠基线左室最大收缩压、左室收缩压、最大收缩速率 (dp/dt)、 dp/dt、左室舒张末压、舒张压均无明显变化 (均P >0 0 5 ) ,异丙肾上腺素激发后左室dp/dt剂量依赖的升高无明显抑制 (均P >0 0 5 )。此外 ,Tg PKCη H、Tg PKCη L鼠心脏 /体重比、心肌α 肌动蛋白表达无显著变化 ,(P >0 0 5 ) ,心肌组织学分析表现了正常的心肌细胞形态。结论　低水平和高水平PKCη的转基因过渡表达未导致心肌肥厚、心衰表型的出现。用非开胸经颈总动脉插管的显微外科方法能敏感、准确地评价小鼠左室收缩功能。     

工作压力对高血压患病危险的流行病学研究

目的 验证工作压力模型－低控制高要求与高血压患病率的相关关系。方法 在心血管疾病防治区－首都钢铁公司的两个工厂选取年龄18－65岁的职工共1556人用问卷方式进行心血管疾病危险因素调查。结果 男性的工作压力变量从高擦拭－低要求变化到中等控制－中等要求,再到低控制－高要求时,高血压患病率从6．5％增加到21．2％,年龄调整后的高血压易患相对危险性（OR,95％可信区间）为3．26（2．30－4．41）。经多元Logistic回归分析调整了年龄、受教育程度、吸烟状况、饮酒和体力活动的混杂影响后,高血压易患相对危险性（OR,95％可信区间）仍为2．31（1．45、3．81）。女性中这种规律不典型。结论 随着工作压力模型从低到高的变化,高血压患病危险也呈逐渐增加的趋势。     

蛋白质钙钾钠混合营养成份对卒中型自发性高血压大鼠高血压及其靶器官的作用

我国南、北方人群膳食调查提示营养成份与血压有关,但营养与高血压的关系尚有争议。为进一步研究混合营养成份对高血压及靶器官损害的影响,我们模拟中国南、北方人群膳食结构,设计了南方型和北方型