体外琼脂克隆培养对胎肝干细胞分化的影响

目的 探讨和建立体外扩增胚胎肝干细胞并抑制其分化的培养条件及方法.方法 胶原酶结合机械消化法制备14 d胎龄大鼠胎肝干细胞悬液.将细胞随机分为两组.一组接种至Ⅰ型胶原包被的培养板中,常规贴壁培养.另一组细胞则接种至软琼脂培养基中进行悬浮培养.倒置显微镜下观察两组细胞的生长.培养2周后收集两组细胞,电镜观察两组细胞超微结构的差异,流式细胞仪检测其CD90.1+、CD49F+等干细胞标志物表达特征,碱性磷酸酶染色检测其分化状态的差异.结果 悬浮培养的胎肝干细胞具有高核浆比、胞浆内细胞器不发达等超微结构特征,并高表达CD90.1、CD49F等干细胞标志物,碱性磷酸酶染色阳性;而常规贴壁培养的胎肝干细胞则在培养过程中显示出显著的分化特征.结论 琼脂克隆培养的胎肝干细胞较有血清贴壁培养分化程度低,在琼脂克隆培养条件下能增殖形成具有显著干细胞特征的克隆球.     

驻银川某雷达部队官兵季节过敏性鼻炎发病现状及分析

目的了解驻银川某雷达部队官兵季节过敏性鼻炎(AR)的发病率,指导官兵对其进行防治。方法 2015年8-10月,以银川地区271名雷达部队官兵为研究对象,用症状视觉模拟评分量表(VAS)、皮肤点刺试验及鼻结膜炎相关生活质量问卷综合评定官兵AR发病率及生活质量,以官兵身份、服役年限及是否患病分组进行统计学分析。结果确诊84例,患病率为31.0%,致敏原主要为蒿属花粉,官兵间患病率无明显差异(P0.05)。服役时间与患病率呈正相关(P0.05)。患有AR官兵各项VAS评分、各项RQLQ评分均有显著性差异(P0.01)。AR官兵与非AR官兵除咳嗽外VAS各项评分、RQLQ评分均有显著差异。结论银川地区雷达部队官兵AR的发病率较高,且服役时间越长患病率较高,对工作生活质量造成严重影响。     

HNF4α在胎肝干细胞促肝组织损伤修复中的作用

目的探讨肝细胞核因子(HNF)4α在胎肝干细胞促大鼠肝组织损伤修复中的作用。方法胶原酶结合机械消化法制备14 d胎龄大鼠胎肝干细胞悬液并进行体外长期培养。采用四氯化碳制作SD大鼠急性化学性肝损伤模型,造模成功后将肝损伤大鼠随机分为移植组(20只)和对照组(20只),移植组将胎肝干细胞经门静脉移植至大鼠肝脏,对照组注射等容计量的生理盐水,分别于注射前6 h,注射后1,3,5周检测大鼠血清谷氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST),并检查肝组织病理学变化,观察肝脏修复情况。采用免疫组化及Western-blot方法检测肝脏治疗前后HNF4α表达情况。结果对照组大鼠肝功能改善缓慢,ALT,AST明显高于移植组(P0.05),移植组大鼠损伤的肝组织逐渐修复,肝功能恢复正常。第5周移植组大鼠术后存活率显著高于对照组(P=0.002)。肝组织损伤后,HNF4α在肝组织的表达明显升高;随着肝组织的逐渐修复,HNF4α表达逐渐下降。western-blot及免疫组化检测亦证实此结果。结论HNF4α在肝脏损伤初期起保护作用。可能系通过促进胎肝干细胞向正常肝细胞分化增殖,并迁移至损坏的肝小叶从而替代损伤的肝实质,从而提高肝损伤后的恢复能力。     

整形美容外科技术在儿童面部外伤的临床应用

正面部作为最重要的审美区域,如果损伤后留下畸形或严重瘢痕,将直接影响患儿外貌,造成严重的心理影响。传统的外科处理方法常常会留下畸形和明显瘢痕外观,比如错位愈合、增生性瘢痕、凹陷性瘢痕、蜈蚣脚样瘢痕等。整形美容外科技术的应用,可以最大程度修复面部外伤后畸形,使术后伤口疤痕最小化,甚至可以做到社交距离"无瘢痕化"。现将整形美容外科技术临床应用经验报道如下。     

儿童面部复杂损伤的整形美容外科修复效果

目的分析儿童面部复杂损伤(伤口长度≥8 cm且累及两个及以上解剖区域)的解剖区域分布, 探讨整形美容外科修复效果。方法 2019年1月至2021年6月, 杭州整形医院整形外科收治复杂面部损伤患儿157例, 男94例、女63例;年龄2～18岁, 平均6.2岁;伤口长度8～20 cm, 平均10.3 cm。用整形美容外科技术根据伤口情况设计不同的一期修复方案, 并进行术后瘢痕早期防治。结果 157例受累解剖区域共331处, 其中颊部最多75处, 致伤原因中锐器(玻璃、瓷砖、刀具等)割伤78例, 居首位。均随访>3个月, 一期愈合146例, 延迟愈合11例;瘢痕增生8例, 149例面部形态及功能恢复良好。结论整形美容外科技术处理儿童面部复杂损伤, 注重解剖和功能复位及减张缝合, 术后联合多种瘢痕防治措施, 效果较满意, 值得临床应用。     

体外不同诱导条件下对大鼠胚胎肝干细胞分化影响的实验研究

目的探讨和比较不同体外条件对大鼠胚胎肝干细胞分化成熟的影响。方法将取自孕14d胎龄F344大鼠胚胎肝组织的肝干细胞分别接种至含10、20、40ng/mLHGF,0.5%、1%、2%二甲基亚砜(DMSO),10ng/mLHGF+0.5%DMSO、20ng/mLHGF+1%DMSO、40ng/mLHGF+2%DMSO以及空白的培养基中进行体外培养15d;诱导15d后,ELISA检测和比较不同组细胞内甲胎蛋白(AFP)和白蛋白(ALB)的浓度,实时定量PCR比较不同组细胞ALB、葡萄糖6-磷酸酶(G-6p)、角蛋白8、18(CK-8、CK-18)的mRNA的表达水平。结果与空白对照组相比,诱导15d后各实验组肝干细胞ELISA检测AFP明显下降(P0.01),ALB明显升高(P0.01);实时定量PCR结果表明各实验组ALB、G-6P、CK-8、CK-18mRNA水平较对照组均明显升高,其中大鼠胎肝干细胞体外最佳诱导条件为20ng/mLHGF+1%DMSO(P0.05)。结论 HGF和DMSO均可在体外诱导大鼠肝干细胞分化,不同浓度HGF和DMSO影响其分化成熟程度;HGF、DMSO对大鼠胚胎肝干细胞的分化具有协同效应。     

趾腓侧皮瓣联合第2趾胫侧皮瓣游离修复拇示指较大缺损创面7例

目的探讨拇示指指端/腹较大皮肤软组织缺损的修复方法, 最大限度保留拇示指功能并恢复指端/腹的感觉。方法自2018年1月至2020年12月, 我科应用趾腓侧皮瓣联合第2趾胫侧皮瓣游离移植修复拇示指指端/腹缺损患者7例(11指), 皮肤软组织缺损面积2.8cm×3.6cm～4.0cm×5.8cm。结果术后皮瓣全部存活, 平均随访5.5个月, 指端/腹外观饱满、有螺纹、无明显瘢痕增生, 皮肤耐磨有弹性, 两点分辨觉6～8 mm, 持物时无异常滑动、无异常感觉;供区隐蔽, 不遗留功能障碍。结论采用趾腓侧皮瓣联合第2趾胫侧皮瓣游离移植修复拇示指指端/腹较大缺损, 能在最大限度保留功能的同时恢复指端/腹的感觉, 且供区隐蔽无功能障碍遗留, 方法可靠。