人脐带间充质干细胞对重症急性胰腺炎患者树突状细胞成熟、分化的作用及参与炎症调节的机制研究

目的:探讨人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)对SAP患者树突状细胞(DCs)成熟、分化的作用及参与炎症调节的机制。方法:采集郑州大学附属郑州中心医院行剖宫产的足月胎儿脐带4～5 cm,原代分离培养hUC-MSCs,采用流式细胞术进行表型鉴定和成脂、成骨染色。采集5例SAP患者外周血20 ml,采用淋巴细胞分离液分离...     

过表达促红细胞生成素脐带间充质干细胞抑制缺血缺氧SH-SY5Y细胞凋亡及机制

背景：前期研究成功构建过表达促红细胞生成素的脐带间充质干细胞(erythropoietin-overexpressed umbilical cord mesenchymal stem cells,EPO-MSCs),发现其可以显著减少缺血缺氧人神经母细胞瘤细胞株(SH-SY5Y)细胞的凋亡。目的：探究EPO-MSCs对缺血缺氧SH-SY5Y细胞可能的神经保护机制及其相关表观遗传学机制。方法：用氧-葡萄糖剥夺法缺血缺氧诱导SH-SY5Y细胞损伤,分别与慢病毒转染空载质粒的脐带间充质干细胞(NC-MSCs)、EPO-MSCs共培养后进行转录组测序,根据组间差异基因进行相关分析。同时应用多因子法检测缺血缺氧性脑病患者和对照组脑脊液上清及共培养细胞上清炎性因子表达水平。蛋白组学检测NC-MSCs、EPO-MSCs差异表达蛋白。应用染色体靶向切割和标签化(CUT&Tag)测序技术检测基因组H3K4me2修饰情况,并与转录组测序联合分析。慢病毒载体感染构建稳定敲低REST的SH-SY5Y细胞,应用qRT-PCR、Western blot检测REST的表达水平,然后再缺血缺氧处理并与EPO-...     

促红细胞生成素基因修饰的人脐带间充质干细胞对神经元周期和凋亡的调控作用及机制

目的 探讨促红细胞生成素(EPO)基因修饰的人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)对神经元周期和凋亡的调控作用及机制。方法 将对数生长期SH-SY5Y细胞随机分为MSCs组、正常对照(NC)-间充质干细胞(MSCs)组及EPO-MSCs组，MSCs组细胞不做任何转染，NC-MSCs组及EPO-MSCs组细胞分别转染对照病毒空载体和过表达EPO慢病毒载体。应用荧光显微镜和流式细胞术验证NC-MSCs组及EPO-MSCs组细胞转染效率，应用Western blot检测MSCs组、NC-MSCs组及EPO-MSCs组细胞中EPO蛋白表达，实时荧光定量聚合酶链反应检测MSCs组、NC-MSCs组及EPO-MSCs组细胞中EPO mRNA表达，酶联免疫吸附法检测MSCs组、NC-MSCs组及EPO-MSCs组细胞上清液中EPO蛋白表达。将SH-SY5Y细胞分为常氧组和缺氧缺血组，常氧组细胞正常培养，缺氧缺血组细胞置于含体积分数0.5%O₂三气体培养箱中24 h制备缺氧缺血细胞模型；将缺氧缺血SH-SY5Y细胞随机分为MSCs共培养组、NC-MSCs共培养组、EPO-MSCs...