豫医无毛小鼠无毛基因部分内含子突变研究

目的 研究豫医无毛小鼠突变的分子机制。方法 对豫医无毛小鼠和昆明小鼠的基因组DNA进行PCR扩增,对二者扩增片段克隆后测序,对结果进行比较,以确定豫医无毛小鼠无毛基因的特异性程度。结果 本实验共测出豫医无毛小鼠DNA序列1746bp和昆明小鼠DNA序列1733bp,两者不同之处有32处,均位于内含子,突变形式包括插入、缺失和点突变。结论 无毛性状的产生可能与内含子中的插入、缺失和点突变有关。     

幽门螺杆菌iceA基因对SGC7901细胞生长的影响

目的 观察幽门螺杆菌(Hp)野生株与iceA基因插入失活突变株对人胃上皮细胞株SGC7901细胞生长的影响,研究Hp毒力基因iceA相关的细胞毒性效应.方法 分别将幽门螺杆菌野生株与iceA基因插入失活突变株与SGC7901细胞共培养48 h,观察比较细胞形态学变化;用MTT法检测分析共培养12～36 h细胞增殖活性;流式细胞仪分析48 h细胞周期和24、48 h细胞凋亡.结果 Hp野生株组和突变株组引起相似的细胞形态学改变;30 h和36 h时各组细胞的增殖活性表现出明显差异(P<0.05),培养30 h时突变株组(0.745±0.006)的细胞增殖活性高于野生株组(0.728±0.017)(P<0.05);细胞周期结果显示,野生株组G2期阻滞,而突变株组为S期阻滞;培养24、48 h野生株组[(33.04±10 69)%、(52.28±3.41)%]和突变株组[(44.23±11.34)%、(57.32±0.88)%]均可以诱导细胞产生明显凋亡(P<0.05),但二者在诱导细胞凋亡的能力方面差异无统计学意义(P>0.05).结论 幽门螺杆菌对于SGC7901细胞生长状态产生明显的影响,iceA基因的插入失活突变对于SGC细胞的形态变化和凋亡的影响无明显差异,对细胞增殖和细胞周期影响差异较明显.     

淫羊藿甙对家兔血管平滑肌细胞凋亡相关基因表达水平的影响

目的：观察葡萄糖调节蛋白基因78（GRP78）在动脉粥样硬化组织中的表达,探讨淫羊藿甙防治动脉粥样硬化的可能机制。方法：淫羊藿甙诱导培养的兔血管平滑肌细胞凋亡,组织原位杂交观察凋亡基因GRP78在兔斑块组织中的表达水平。结果：兔斑块组织原位杂交显示该基因片段在动脉粥样硬化斑块组织中表达水平增高。结论：葡萄糖调节蛋白78基因在AS细胞质中表达增高,可能是淫羊藿甙作用靶点之一,如上调该基因促进则可促进平滑肌细胞凋亡,将对动脉粥样硬化治疗产生一定作用。     

论《内经》的发病观与医学微生物学、免疫学的关系

<黄帝内经>是中医药学的经典之作,它以辩证唯物主义为基础,体现了先进的、科学的世界观和方法论,为中医学的发展奠定了理论依据和指导思想.中西医结合,不能仅停留于实验室水平,应当从理论上加以融合,相互促进,共同提高.我们试从发病的角度探讨<内经>与医学微生物学和免疫学之间的相互关系,旨在为中西医理论层面上相结合起抛砖引玉之用.     

人铜锌超氧化物歧化酶真核表达载体的构建及在酿酒酵母中的分泌表达

目的:探讨酿酒酵母中人铜锌超氧化物歧化酶(hCu/Zn-SOD)的分泌表达.方法:采用RT-PCR技术从人胃总RNA中分离扩增hCu/Zn-SOD的cDNA,与酿酒酵母交配因子(MF)α信号肽编码序列融合,将融合基因插人大肠杆菌-酵母细胞穿梭型质粒pYES2.0,构建真核分泌表达质粒pYES-MS,将其转化入酿酒酵母的缺陷型菌株INVScl中,用半乳糖进行诱导表达,采用SDS-PAGE、蛋白质免疫印迹分析及电泳谱活性染色测定表达产物分泌情况及其活性.结果:该工程菌可高效表达一相对分子质量约为21 000的蛋白并与兔抗人Cu/Zn-SOD多抗有特异的免疫反应,同时在培养基上清中检测到此表达蛋白的分泌,具有特异性SOD酶活性.结论:作者成功构建了pYES-MS/INV菌株,该菌株大量表达有天然酶活性的hCu/Zn-SOD,并有部分hCu/Zn-SOD分泌到酵母细胞外,为开发hCu/Zn-SOD的基因工程产品奠定了良好的基础.     

维生素C提取工艺的改进

维生素Ｃ是人体必需的一种维生素,也是一种重要的医药产品,在临床上具有广泛的治疗作用。除去维生素Ｃ发酵液中的不溶性和可溶性蛋白质及多糖等易乳化的杂质是生产维生素Ｃ的关键,直接影响到维生素Ｃ的质量和收率。目前,国内大都采用调等电点加热除蛋白法,其缺点为高温使蛋白质变性的同时,发酵液中的2酮基Ｌ古龙酸钠有部分分解破坏,影响收率。为解决这一问题,作者查阅了有关絮凝剂在抗生素中的一些应用资料[1～4],将絮凝技术应用于维生素Ｃ提取工艺中,通过多次实验,系统地研究了絮凝处理的最适条件。1　材料与方法11　仪器及试剂　ＭＤ2002…     

医学微生物学运用多媒体教学的体会

目前,随着科学技术的进步,多媒体教学以其设计上的创新性、内容上的配置性、教学上的高效性将教学过程变得生动活泼,成为目前重要的教学手段,已广泛应用于教育领域。《医学微生物学》作为医学院校的一门重要的基础课程,主要是研究病原微生物的生物学性状、致病性以及相关的诊断、防治原则。就其内容而言,非常适合使用多媒体教学。通过多年的教学实践,现将几点体会总结如下。     

鼠冠状病毒S蛋白的研究进展

2003年爆发的严重急性呼吸道综合征(severe acute respiratory syndrorae，sARS)的病原体被确立为一种新的冠状病毒SARS-CoV。世界各国的科学家正努力研究SARS病毒的生物学特征和可能的药物防治靶点及疫苗。     

幽门螺杆菌分离株iceA基因克隆及序列分析

目的 克隆幽门螺杆菌中国郑州市慢性萎缩性胃炎患者分离株MEL-Hp27 iceA基因,测序后对其进行序列分析.方法 根据iceA基因上下游基因序列设计引物,PCR扩增iceA基因,并将其连接至pMD19-T载体,测序后采用相关数据库和生物信息学软件对基因序列进行分析.结果 成功克隆幽门螺杆菌Hp27菌株iceA基因序列,扩增产物大小约为790 bp;重组质粒pMD19-T-iceA单酶切产生3 820 bp片段,双酶切产生3 000和820 bp的2个片段;Hp27iceA基因与大多数美国来源菌株同源性＞85%,与日本、印度等地区来源菌株同源性＜70%.序列分析结果表明,所克隆到的基因为iceA2亚型,与美国株Alaska strain 219、Alaska strain 213关系最近,同源性分别为87%和95%,与芬兰株Finland strain 9496等菌株存在聚类关系,同源性88%～93%,与CR9等其他菌株距离较远.结论 成功克隆幽门螺杆菌Hp27菌株iceA基因序列;不同地区幽门螺杆菌分离株的iceA基因间存在着一定差异.     

淫羊藿甙对家兔血管平滑肌细胞凋亡相关基因表达水平的影响

目的:观察葡萄糖调节蛋白基因78(GRP78)在动脉粥样硬化组织中的表达,探讨淫羊藿甙防治动脉粥样硬化的可能机制.方法:淫羊藿甙诱导培养的免血管平滑肌细胞凋亡,组织原位杂交观察凋亡基因GRP78在兔斑块组织中的表达水平.结果:兔斑块组织原位杂交显示该基因片段在动脉粥样硬化斑块组织中表达水平增高.结论:葡萄糖调节蛋白78基因在AS细胞质中表达增高,可能是淫羊藿甙作用靶点之一,如上调该基因促进则可促进平滑肌细胞凋亡,将对动脉粥样硬化治疗产生一定作用.