成年猪胰岛分离方法的改进

目的 :开发成年猪胰岛分离方法。方法 :取成年猪胰腺体尾部 ,胰管内注入冷 0 .1 %胶原酶消化液 ,在 38.5℃水浴箱中消化后 ,放入 4℃ Hanks液中分离并用 60 0μm的滤过网过滤回收。残留的组织重新悬浮在冷 Hanks液中 ,并放入 Ricordi′s chamber内振荡 5min后再次过滤回收。用Ficoll不连续密度液梯度离心法进行胰岛纯化。结果 :纯化前、后胰岛收获量分别为 ( 850 5± 3349)g-1〔IEQ:( 4 2 53± 2 732 ) g-1)、( 2 334± 1 2 2 3) g-1〕,纯度 >80 %。胰岛收获量与消化后的消化液胰蛋白酶活性显示了弱的负相关 ( r=- 0 .44,P=0 .1 3) ,胰岛收获量≥ 80 0 0 g-1组的消化后消化液胰蛋白酶活性明显低于胰岛收获量 <80 0 0 g-1( 78.3± 2 6.7vs1 37.5± 48.4BAEEU,P<0 .0 5)。结论 :我们采用的胰岛分离方法能够获得大量的猪胰岛细胞 ;胰蛋白酶活性影响胰岛收获量。     

NF-κB活化在氯化钆诱导ANP肺泡巨噬细胞凋亡中的作用

目的：观察氯化钆（GdCl3）诱导急性坏死性胰腺炎(ANP)肺泡巨噬细胞(AM)凋亡时核因子-κB（NF-κB）表达情况,探讨NF-κB在其中的作用及机制。
方法：36只SD大鼠随机分为正常对照组,ANP组,GdCl3治疗组。逆行性胰胆管注射5%牛磺胆酸钠建立ANP大鼠模型,正常对照组大鼠以同法注入生理盐水,GdCl3治疗组制模后即刻自阴茎背静脉注射GdCl3。各组大鼠于成模后6 h经支气管肺泡灌洗获取AM,检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中TNF-α和IL-1β含量及肺组织髓过氧化物酶(MPO)水平。用琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪检测AM的凋亡情况;Western-blot检测AM中NF-κB活性。同时对肺组织行病理学检查。
结果：ANP组TNF-α和IL-1β含量高于对照组（P<0.05）,而治疗组显著低于ANP组（P<0.05）。仅治疗组DNA电泳见典型的细胞凋亡的梯状条带。对照组,ANP组,治疗组AM凋亡率分别为（10.81±0.86）%,（6.47±1.52）%,（17.41±3.36）%,3组间差异均有统计学意义（P<0.05）;Western-blot检测3组AM中NF-κB表达的相对灰度值分别为（0.80±0.05）,（1.96±0.15）,（1.42±0.10）,3组间差异亦有统计学意义（P<0.05）。AM的凋亡率与NF-κB活性呈负相关（r＝-0.554,P<0.01）。
结论：GdCl3可能通过抑制NF-κB的活化诱导大鼠ANP肺泡巨噬细胞凋亡,从而减轻肺损伤。     

直线切割闭合器在全腹腔镜下胃肠Roux-en-Y 吻合中应用

目的：探讨直线切割闭合器在全腹腔镜下胃肠 Roux-en-Y 吻合中应用的可行性与安全性。方法回顾性分析2011年11月至2014年2月间在首都医科大学附属北京天坛医院普通外科全腹腔镜下21例胃远端切除患者的临床和随访资料,其中消化道重建全部采用了使用直线切割闭合器胃肠 Roux-en-Y 吻合。结果所有病例均顺利完成手术,无中转开腹。20例逆蠕动胃肠 Roux-en-Y吻合时间25-40（32.1±5.5）min,1例顺蠕动胃肠 Roux-en-Y 吻合时间为35 min。1例逆蠕动胃肠 Roux-en-Y 吻合患者术后第4天进食,术后6 d 出现胃排空障碍,经保守治疗术后12 d 缓解。其余患者围手术期未出现吻合口出血、瘘、狭窄（梗阻）等并发症。术后随访2周~27个月,1例术后5.5个月因小肠侧侧吻合口狭窄再次开腹手术,其余未见吻合口相关的并发症。结论直线切割闭合器在全腹腔镜胃肠Roux-en-Y 吻合中应用,避免了镜下缝合操作,具有操作简单、易于掌握、安全等特点。     

新生大鼠胰腺nestin阳性细胞的体外分离、培养和分化的研究

目的探索新生大鼠胰腺nestin阳性细胞体外分离、培养并使之形成类胰岛样细胞团的方法。方法应用胶原酶消化新生大鼠胰腺,将消化的组织碎片培养形成类胰岛样细胞团后传代。免疫荧光细胞化学法检测贴壁细胞胰岛素、胰高血糖素及nestin的表达。RT-PCR检测培养1周的贴壁细胞nestin及细胞角蛋白(CK19)的表达。结果在pH 7．6条件下培养24-36 h有部分细胞贴壁生长,改用pH 7．4无血清RPMI 1640培养液培养18-24 d可形成类胰岛样细胞团,传代后可有单层细胞生长。培养24～36 h的贴壁细胞nestin呈阳性,但胰岛素、胰高血糖素阴性,形成的类胰岛样细胞团传代后24 h胰岛素、胰高血糖素呈阳性。培养1周的单层细胞经RT-PCR扩增获得nestin 片段,但未获得CK19相应的片段。结论类胰岛样细胞团传代培养后可表达胰岛素、胰高血糖素; 胰腺nestin阳性细胞具有胰岛干细胞的特点。     

FasL在重症急性胰腺炎肺泡巨噬细胞凋亡机理中的作用

目的 探讨FasL在重症急性胰腺炎（SAP）大鼠肺泡巨噬细胞（AM）凋亡机理中的作用。方法 SD大鼠按数字表法随机分为对照组、SAP组及氯化钆（GdCl3）组3组,每组16只。SAP模型制成6 h后,经支气管肺泡灌洗获取AM。取右肺下叶行HE染色检查,透射电镜观察和双染色法检测AM凋亡情况,用蛋白免疫印迹法（Western blot法）检测各组AM中FasL蛋白表达水平。结果 GdCl3组电镜下可见AM典型凋亡形态学特征,AM凋亡率为 （22.48±1.44） %,明显高于对照组 〔（11.28±1.01）%〕 及SAP组 〔（6.86±1.35）%〕 , 其差异有统计学意义 （P＜0.05）;GdCl3组FasL蛋白相对表达量为（1.230±0.041）%,较对照组 〔（0.936±0.024）%〕 和SAP组〔（0.704±0.011）%〕 明显增高 （P＜0.05）。AM 凋亡率与AM中FasL蛋白表达水平呈线性正相关关系（R2=0.766,P＜0.01）。结论 GdCl3可能通过激活FasL蛋白表达诱导SAP大鼠AM发生凋亡。     

氯化钆预处理对ANP肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞中CYLD及NF-κB的影响

目的:观察氯化钆(GdCl3)预处理对性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠肺泡巨噬细胞(AMs)肿瘤抑制因子CYLD及NF-κB的影响,探讨CYLD在ANP肺损伤中所起的作用。方法:36只SD大鼠随机分成正常对照组,ANP组,GdCl3预处理组。采用5%牛磺胆酸钠逆行性胰胆管注射制备ANP动物模型,GdCl3预处理组在造模前30 min经尾静脉注射GdCl3(10 mg/kg)。术后6 h处死各组动物,经支气管肺泡灌洗获取肺泡AMs,检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中TNF-α和IL-1β含量,Western blot检测AMs中NF-κB及CYLD活性水平。检测肺组织髓过氧化物酶(MPO)的水平变化,并行肺组织病理学检查。结果:假手术组肺组织未见病理改变,ANP组和GdCl3预处理组肺组织均出现充血、水肿、炎性渗出等病理改变,但GdCl3预处理组病变程度轻与ANP组;ANP组肺组织的MPO活性,以及BALF的TNF-α,IL-1β含量较正常对照组明显升高(均P<0.05);正常对照组,ANP组,GdCl3预处理组AMs核蛋白NF-κB的表达量分别为0.08±0.03,0.18±0.06及0.11±0.04,3组AMs的CYLD的表达量分别为0.32±0.09,0.15±0.05和0.27±0.07。ANP组,GdCl3预处理组AMs中NF-κB与CYLD的表达活性均呈负相关(r=-0.708,r=-0.571,均P<0.05)。结论:ANP肺损伤中存在CYLD低表达和NF-κB活化,GdCl3预处理能通过增加CYLD表达,减少NF-κB活化,进而减轻肺损伤。     

肠外营养支持下胃肠道肿瘤患者围手术期甲状腺激素水平变化

目的观察肠外营养支持下胃肠道肿瘤患者围手术期甲状腺激素水平变化。方法行R0根治术的胃肠肿瘤患者36例作为肿瘤组。同期收入院的无甲状腺疾病的患者10例作为对照组。肿瘤组术前1天及术后第14天分别检测血清甲状腺激素（TH）。肿瘤组术后给予15～20 kCal/（kg.d）的肠外营养支持5～7 d,肠蠕动恢复后给予清流食并逐渐过度至流食、半流食。用微粒子捕捉酶免疫分析法检测血清FT3、TT3、FT4及TSH含量,荧光偏振免疫分析法检测血清TT4含量,放射免疫分析法检测血清rT3含量。结果肿瘤组术前FT3水平明显低于对照组（P〈0.05）,rT3水平明显高于对照组（P〈0.01）。肿瘤组术后第14天FT3、TT3明显低于术前水平（P〈0.05）。rT3明显高于术前水平（P〈0.01）。结论①胃肠肿瘤患者术前即已存在非甲状腺疾病综合征（nonthyroid illness syndrome,NTIS）;②胃肠肿瘤患者术后NTIS短期内很难完全恢复。     

慢性浅表性毛囊炎1例报告

慢性浅表性毛囊炎 ,又称坏死性痤疮 ,主要损害为无痛性红色毛囊性脓疱疹。我院收治 1例以持续剧痛为主要表现的慢性浅表性毛囊炎患者 ,现报告如下 :1　病历摘要　　患者 ,男 ,41岁 ,农民。因头皮、颈背部反复出现丘疹、脓疱疹 6ａ ,于 2 0 0 1年 7月 2 2日入本院。 6ａ来头皮、     

成年猪胰岛分离的实验研究

猪胰岛作为异种胰岛组织供体来源日益受到重视,但由于猪胰岛的分离比其他动物困难,至今未能确立能够稳定地获得大量胰岛细胞的分离方法。本研究以开发成年猪胰岛分离方法为目的,采用以往的胰岛分离方法[1],并在此基础上加以改进,尝试了成年猪胰岛的分离。而且探讨了预防性添加胰蛋白酶抑制剂对成年猪胰岛分离的效果。一、材料与方法1.胰腺来源:肉联厂提供的成年杂种猪,猪龄7个月,体重100～120ｋｇ,在相对无菌条件下取出胰腺体尾部,保存在冷Ｅｕｒｏｃｏｌｌｉｎｓ液中送到实验室。整个过程中温缺血时间为15～20ｍｉｎ,冷缺血时间为35～50ｍ…     

卫生装备建设与管理中存在的问题和对策措施

介绍了总装所属部队卫生装备建设工作取得的成效,从制度、效能、队伍、管理手段等方面分析了总装部队卫生装备建设管理工作存在的主要问题,从组织领导、标准配置、监督管理、信息化、培训训练、计量检修等方面探讨了进一步深化卫生装备建设管理的对策建议,指出了卫生装备是后勤装备的重要组成部分,加强卫生装备建设与管理是当前一项非常重要和紧迫的任务。