核桃楸皮化学成分的鉴定及其抗肝癌活性成分筛选

目的：鉴定核桃楸皮的化学成分,并对其进行体外抗肝癌活性成分筛选。方法采用75％乙醇回流法提取核桃楸皮,经分级萃取、硅胶柱层析及制备型高效液相色谱分析等方法得到单体化合物,通过化合物的理化性质及核磁共振技术鉴定化合物成分;采用MTT法评价其体外抗肝癌活性。结果从核桃楸皮中分离得到2种黄酮类化合物,经鉴定分别为木犀草素和刺芒柄花素。 MTT检测结果表明,木犀草素对肝癌细胞HepG2和正常肝细胞LO2都有一定的毒性作用,IC50分别为（103．32±21．34）、（131．13±13．48）μmol/L;刺芒柄花素对肝癌细胞HepG2的毒性作用较小,其IC50＞200μmol/L。结论核桃楸皮含2种黄酮类化合物：木犀草素和刺芒柄花素,其中木犀草素具有明显的抗肝癌作用。     

《湿米粉生产和经营卫生规范》（DBS 44/017-2021）执行现况分析

目的 分析《广东省食品安全地方标准湿米粉生产和经营卫生规范》（DBS 44/017—2021）（以下简称《卫生规范》）在广东省湿粉类食品生产企业中的执行情况,了解规范执行过程中存在的问题并为规范修订提供前期基础。方法 采用完全随机抽样的方法抽取广东省湿粉类食品生产企业进行问卷调查,调查内容包括企业基本情况、食品安全管理人员基本情况及对《卫生规范》知晓情况、《卫生规范》核心条目执行情况、《卫生规范》实施对产销量的影响。结果 112家湿粉类食品生产企业的产量、厂区规模和建厂时间跨度较大,79.46%企业认为规范可行性好,64.29%企业规范执行情况较好,其中岗前培训执行率最高（100.00%）,冷藏保存执行率最低（41.96%）。原料验收、原料储存、设备清洗、工作人员着装要求、生产过程管理、包装管理等条目执行力度欠佳。结论 广东省湿粉类食品生产企业对规范的执行情况总体存在一定不足,可能与《卫生规范》核心条目执行情况有关,原料管理、卫生管理和冷藏管理等还有待提高。     

金黄色葡萄球菌腺苷酰转移酶耐药基因的克隆及其原核表达

目的在大肠杆菌中克隆表达金黄色葡萄球菌氨基糖苷类耐药基因,即腺苷酰转移酶基因,为其功能研究奠定基础。方法按金黄色葡萄球菌腺苷酰转移酶蛋白编码序列设计引物,以金黄色葡萄球菌基因组DNA为模板,扩增腺苷酰转移酶基因,所得片段与pGEX-4t-1(+)载体连接,转化至感受态大肠杆菌BL21(DE3),提取质粒进行双酶切及测序鉴定,IPTG诱导重组蛋白表达,SDS-PAGE及Western-blot对重组蛋白作鉴定。结果使用金黄色葡萄球菌基因组为模板,成功扩增约800bp目的片段,重组质粒双酶切见目的片段,测序显示腺苷酰转移酶基因长783bp,始于ATG,止于TAG,预测的等电点和相对分子质量分别为7.75和29×103,目的基因与Genbank腺苷酰转移酶同源性为99%,SDS-PAGE及Western-blot显示在55×103见重组蛋白表达。结论在大肠杆菌中成功克隆表达了金黄色葡萄球菌腺苷酰转移酶基因。