维甲酸改变人肝癌细胞表面N－糖链的结构及其酶学机制

用３Ｈ－甘露糖标记７７２１人肝癌细胞表面糖蛋白的Ｎ－糖链，经提取和去唾液酸后，用ＣｏｎＡ和ＤＳＡ亲和柱顺序层析将３Ｈ－标记的Ｎ－糖链分成４个类型和天线数不同的组分来研究维甲酸（ＲＡ）对细胞表面Ｎ－糖链的影响。结果：１０μｍｏｌ／ＬＲＡ处理细胞３～５ｄ后，可使Ｃ２Ｃ２二天线复杂型Ｎ－糖链增加，而高甘露糖型及三、四天线，特别是带有Ｃ２，６分支结构的复杂型Ｈ－糖链减少。用ＬＣＡ亲和柱还证明二天线糖链中的核心岩藻糖也减少。进一步发现上述改变的酶学机制是ＲＡ降低Ｎ－乙酰氨基萄葡糖转移酶Ｖ和α－１，６－核心岩藻糖转移酶的活力。结论：ＢＡ通过改变某些糖基转移酶活力而改变细胞表面糖链结构，这可能是ＲＡ使７７２１细胞诱导分化的机理之－。     

醛糖还原酶的分离纯化和性质分析

利用离心、盐析及ＤＥＡＥ－纤维素、羟基磷灰石、葡聚糖－Ｇ１００多步层析法将牛睾丸ＡＲ分离纯化，醛糖还原酶（ａｌｄｏｓｅｒｅｄｕｃｔａｓｅ，ＡＲ），并利用体外酶动力学方法测定其底物特异性，为寻找有效的醛糖还原酶抑制剂提供线索。结果：纯化的酶经ＳＤＳ－ｐＡＧＥ电泳鉴定示一单一蛋白条带，牛睾丸ＡＲＭｒ约为（４００００±１０００）ｕ，ＡＲ底物特异性，按１／ｋｍ大小依次排列为：Ｐ－硝基苯醛，ＤＬ－甘油醛，Ｄ－葡萄糖醛酸，Ｄ－木糖，Ｄ－半乳糖，Ｄ－葡萄糖。     

醛糖还原酶ELISA测定及意义

从牛睾丸分离纯化醛糖还原酶(AR),皮下注射免疫新西兰兔制备抗血清,血清纯化后用辣根过氧化物酶(HRP)标记制备抗体-HRP交联物,利用夹心ELISA(抗体-抗原-酶标抗体)测定了22例糖尿病人及10例正常对照的红细胞AR水平.结果①糖尿病AR水平显著高于正常人;②AR水平病人约有5倍、正常人约有3倍的变异;③病人AR水平与空腹血糖水平明显相关,正常人无相关;④AR水平与性别、年龄、糖尿病病程无关.结论ELISA测定红细胞AR水平方法简便、特异,为研究AR提供了一个有用的方法.     

人肝癌细胞诱导分化的体外研究

作者8年来选用全反式继甲酸（RA）为主要分化诱导剂，用体外细胞培养的方法，并用一系列形态学、生物学、生物化学的分子生物学的新技术和指标来研究RA对人肝癌细胞对SMMC－7721的逆转（分化诱导）作用，获得令人振奋的可喜成果。体外实验有利于药物直接作用于细胞，便于观察指     

全反式维甲酸和佛波酯对HL-60细胞表面N-糖链结构的影响

目的：研究肿瘤细胞分化时细胞膜上糖链结构的改变。方法：通过蛋白酶消化提取细胞表面＾３Ｈ标记Ｎ－糖链,结合外切糖苷酶处理,经序列凝纱亲和层析分析ＨＬ－６０细胞诱导分化后细胞表面Ｎ－糖链结构。结果：全反式维甲（ＡＴＲＡ）和佛波醇－１２豆莞酰－１３－乙酸酯（ＰＭＡ）均引起ＨＬ－６０细胞二天线复杂型和高甘露糖型糖链升高,多天线复杂型糖链减少。但对平分型β－Ｎ－乙酰氨基葡萄糖（ＧｌｃＮＡｃ）糖基的影响却相反     

维甲酸影响新生大鼠皮肤上皮基底细胞DNA及蛋白质合成的体外实验

本文研究了维甲酸(RA)对体外培养的新生大鼠皮肤上皮基底细胞DNA和蛋白质合成的影响。RA(16 μmol/L)明显降低基底细胞~3H-dT掺入;显著增加~3H-亮氨酸和~3H-组氨酸掺入细胞蛋白质。经聚丙烯酰胺凝胶电泳与双相电泳辅以放射自显影术,证实有5种分子量不同的蛋白质受RA诱导合成,其中3种蛋白质为细胞表面膜蛋白。用~3H-甘露糖标记细胞糖蛋白糖链,发现RA可促进~3H-甘露糖的掺入,而且细胞表面糖蛋白中~3H-甘露糖掺入量比对照组增加43％。结果提示RA抑制上皮基底细胞增殖,诱导细胞合成蛋白质,主要为蛋白质的转换率增强,以及增加糖蛋白糖链合成。     

肝癌诱导分化治疗基础和临床研究

肝癌诱导分化治疗基础和临床研究上海医科大学卫生部糖复合物重点实验室（２０００３２）陈惠黎恶性肿瘤的诱导分化治疗是近年来肿瘤生物学和肿瘤治疗学的研究热点和前沿阵地。由于这种治疗方法不损害正常细胞，采取“改邪归正”的手段取代过去有杀伤大量正常细胞副作用的...     

合成酶synthetase不是合酶synthase

合成酶synthetase和合酶synthase在生物化学的酶学分类中属于两种完全不同的酶类，不能混为一谈，而目前临床书籍或杂志中往往发生翻译错误，如贵刊2006年第3期中的“胸苷合成酶基因多态性与结直肠癌易感性的关系”一文中将synthase误译成合成酶。     

肝癌诱导分化治疗基础和临床研究

恶性肿瘤的诱导分化治疗是近年来肿瘤生物学和肿瘤治疗学的研究热点和前沿阵地、由于这种治疗方法不损害正常细胞，已成为肿瘤治疗上新的里程碑。笔者曾用形态学、生物学及生物化学等方法在体外细胞培养水平证明了全反式维甲酸（RA）对人肝癌细胞7721确有诱导分化作用，使其诸多表型向正常逆转。最近还将研究深入到分化机制和体内实验，并应用于临床治疗，今将1992年第一次鉴定后的工作择其主要者介绍如下。一、体外研究Y一谷氨酸转肽酶门一GT）和甲胎蛋白（AFP）是两个公认的人类肝癌的标志，10微摩尔浓度的RA可使人肝癌细胞772］中这…     

Enzyme-linked immunosorbent assay of human placenta type glutathione s-transferase and its application in the diagnosis of hepatocarcinoma

GST-π was purified from human placenta and its antiserum was raised in rabbits. The antibody IgC was purified and degraded into Fab' fragment which was conjugated with horseradish peroxidase (HRP) using N-succinimidyl-4-(N-maleimido-methyl) cyclo-hexane-1-carboxylate (SMCC) as crosslinking reagent to produce Fab'-HRP conjugate. A sandwich ELISA was established for the microquantitative determination of GST-π. The sensitivity was 11 pg/tube, which was far more sensitive than the radioimmunoassay so far reported. Using this method, the serum GST-π of 41 cases normal adult was found to be 1.06±0.94 ng/ml. The upper limit of the normal value was 2.6 ng/ml. In 30 cases of primary hepatocarcinoma, the level of serum GST-π was 24.4± 17.4 ng/ml, which was 23 times higher than the normal average value (P<0.01). The positive rate was 90%. In contrast, serum GST-π in 25 cases of chronic hepatitis was determined to be 1.74±1.16 ng/ml, which was not significantly different from the normal value (P>0.05). The