中国汉族结核病患者 N-乙酰基转移酶2基因型与药物性肝损伤以及抗结核疗效的关系

目的：了解中国汉族结核病患者 N-乙酰基转移酶（NAT2）基因型与异烟肼引起的药物性肝损伤及与抗结核疗效的关系。方法初治结核病患者108例。采用 PCR 直接测序法对 NAT2基因7个单核苷酸多态性位点分析比对,判定 NAT2基因型。分析基因型与药物性肝损伤的关系,比较基因型与抗结核疗效的关系。统计学处理采用χ2检验。结果108例结核病患者中,中间代谢型59例（54．63％）,快代谢型36例（33．33％）,慢代谢型11例（10．19％）,超快代谢型2例（1．85％）。20例药物性肝损伤患者中快代谢型2例,慢代谢型5例,中间代谢型13例。快代谢型患者发生药物性肝损伤可能性较低（OR ＝0．176,95％CI ：0．038～0．809,P ＝0．014）,慢代谢型患者易发生药物性肝损伤（OR ＝4．556,95％CI ：1．231～16．854,P ＝0．044）。NAT2*4／*6A 基因型（OR ＝7．741,95％CI ：2．653～22．586,P ＜0．01）和 NAT2*6A／*6A 基因型（OR＝15．353,95％CI ：1．506～156．552,P ＝0．020）患者易发生药物性肝损伤,NAT2*4／*4型患者则不易发生药物性肝损伤（OR ＝0．176,95％CI ：0．038～0．809,P ＝0．014）。58例痰菌阳性的患者,治疗2个月后仍痰菌阳性12例,其中快代谢型患者8例,疗效差（OR＝7．200,95％CI ：1．794～28．900,P ＝0．008）。结论中国汉族结核病患者中 NAT2基因型以中间代谢型为主。NAT2慢代谢型发生药物性肝损伤的风险较高。NAT2*6A 为药物性肝损伤高风险等位基因,而 NAT2*4／*4则可能为保护性基因型。快代谢型患者早期的疗效较差。     

酶联免疫斑点法在快速诊断活动性肺结核中的应用

目的探讨酶联免疫斑点法（ELISPOT）在临床快速诊断活动性肺结核病中的应用价值。方法：采用T—SPOT．TB试剂盒对36例明确诊断为活动性肺结核的初治患者、30例健康体检者的外周血中结核分枝杆菌特异性T淋巴细胞进行检测,同时对26例活动性肺结核患者做结核菌素（PPD）试验。结果在36例活动性肺结核初治患者和30例健康对照者中,T-SPOT检测的阳性率分别为80．6％与6．7％,此技术用于诊断初治活动性肺结核患者的敏感性为80．6％,特异性为93．3％,阳性预测值为93．5％,阴性预测值为80．0％。在26例同时做PPD试验的活动性肺结核患者中,T-SPOT检测的阳性率略高于PPD试验（80．6％vs61．5％）,但差异无明显统计学意义（P〉0．05）。结论酶联免疫斑点法是一种具有较高敏感性和特异性的检测结核感染的技术,在活动性肺结核病的快速诊断中有较大应用价值。     

手足口病临床特点与外周血T淋巴细胞亚群分析

手足口病（Hand-foot-and-mouth Disease，HFMD）是由多种人肠道病毒引起的一种儿童常见传染病。大多数患者症状轻微，以发热和手、足、口腔等部位的皮疹或疱疹为主要症状，少数患者可出现无菌性脑膜炎、脑炎、急性弛缓性麻痹、神经源性肺水肿和心肌炎等，个别重症患儿病情进展快，可导致死亡[1]。近3年浙江省奉化市手足口病疫情呈现逐年增高趋势，2013年发病率为198.9/10万，约为2011年发病率的3倍多（65／10万）。有研究表明EV71相关手足口病T 细胞异常可作为重症发生的预测指标[5]，但不同病原所致手足口病患儿外周血细胞免疫变化是否也有不同，目前尚无定论。本研究旨在根据本市2010至2013年3年收集的手足口病临床病例样本，探讨该病患儿不同病原感染所致淋巴细胞亚群变化与趋势，现报告如下。     

血清学诊断方法及T细胞斑点试验在结核病诊断中的应用

目的 评价四种结核病血清学诊断试剂盒及结核分枝杆菌感染T细胞斑点试验(T-SPOT)检测在结核病诊断中的应用价值.方法 选取复旦大学附属华山医院、重庆市肺科医院以及苏州市第五人民医院的133例活动性结核病患者,应用PATHOZYME-MYCO IgG(Myco G)、PATHOZYME-TB complex plus (TB complex plus)、Anda Biologicals TB ELISA (Anda TB)和IBL M.tuberculosis IgG ELISA (IBL)四种结核病血清学诊断试剂盒和T-SPOT进行检测,同时以上述医院的50例非结核病患者和81名健康者作为对照组.比较五种检测方法对结核病的诊断效果,并作受试者工作特征(ROC)曲线分析.结果 五种检测方法中,T-SPOT检测的敏感性和特异性均较高,分别为90.2％和80.9％;Anda TB检测的敏感性(67.7％)其次,但特异性较低(76.3％);Myco G、TBcomplex plus及IBL的敏感性相对较低,分别为41.4％、27.1％和27.1％,但特异性极高,均为96.9％.ROC曲线分析显示,T-SPOT检测的曲线下面积(AUC)最高,为0.934,其次为Anda TB和Myco G,分别为0.885和0.817.结论 T-SPOT检测对结核病具有较好的诊断效果.四种血清学诊断试剂盒检测的特异性较高,可与其他诊断方法联用以提高结核病诊断的准确性,尤其适用于阴性结核病和肺外结核病的检查.     

奉化市2010—2013年手足口病病原监测及病毒基因分析

目的探讨手足口病临床病例样本的肠道病毒流行特征。方法收集350例临床诊断为手足口病患者的咽拭子、血浆和粪便标本387份,采用巢式PCR方法进行肠道病毒的检测,对肠道病毒阳性的标本应用测序方法根据5’UTR基因序列进行病毒分型。结果在350例临床诊断病例中,病原学诊断或者核酸检测阳性病例245例,其中男138例,女107例,性别比1.54∶1。387份临床样本中,肠道病毒阳性共217份,检出率为56.1%。245例病原学诊断或核酸检测阳性病例中,人肠道病毒71型(EV71)125例,占51.0%;柯萨奇病毒A组(CVA)16型90例,占36.7%;其他型肠道病毒20例,占8.2%;有10份阳性病例无法鉴定分型,占4.1%。结论奉化市2010—2013年手足口病以EV71及CVA16型为主,其中2010—2012年以EV71为主,2012—2013年以CVA16为主,其他型如CVA4、CVA6、CVA10、CVA12及CVB3等也有发现。     

结核分枝杆菌泛酸激酶的克隆表达及酶学性质

目的:获得具有生物学活性的结核分枝杆菌(Mtb)重组泛酸激酶蛋白. 方法:以结核分枝杆菌模式菌株H37Rv基因组为模板,扩增泛酸激酶基因CoaA(Rv1092c),克隆入原核表达载体pET28a中,重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)中进行IPTG诱导表达. 在优化后的诱导条件(20℃,10 h,0.5 mmol/L IPTG)下,收集细菌进行超声破碎,低温高速离心,得到的上清液经镍离子螯合型亲和层析柱纯化重组蛋白. 高效液相色谱及质谱鉴定重组蛋白. 采用酶联法测定重组蛋白的酶学性质. 结果:得到了高表达、高纯度的重组结核分枝杆菌的泛酸激酶,酶催化过程中对泛酸的kcat和Km值分别为273.81 kat/L, 35.27 μmol/L;对ATP的kcat和Km值分别为169.10 kat/L, 94.43 μmol/L. 重组蛋白经高效液相色谱及质谱鉴定,测得Mr约为39 168. 在5 mmol/L Tris-HCl缓冲液,pH值7.5,25℃条件下,重组CoaA的二级结构中有39.3% α螺旋,13.7% β折叠,14.3% β转角,32.5%无规则卷曲. 结论:成功克隆表达结核分枝杆菌泛酸激酶,酶学性质和二级结构鉴定表明重组泛酸激酶折叠正确,且具有生物学活性,为基于该酶筛选新型抗结核药物奠定了基础.     

酶联免疫斑点法检测肺结核患者特异性结核抗原多肽T细胞的应答

目的 评价我国酶联免疫斑点法(ELISPOT)用于诊断肺结核患者的应用价值.方法 结核特异性ELISPOT法检测76例诊断明确的肺结核患者外周血单核细胞.同时选择30例无结核接触史、胸部X线片无异常且PPI)皮试阴性的成年人作为对照.数据采用卡方检验和非参数Mann-Whitney检验.结果 76例患者总体阳性率为71.0%,健康对照组阳性率为6.7%.按照患者抗结核疗程分为治疗1个月内、治疗6个月内、治疗6个月以卜3组,阳性率分别为87.5%、74.1%和52.0%(X2=35.63,P=0.000).该技术在初治结核患者中的灵敏度为87.5%,特异度为93.3%,阳性预测值为91.3%,阴性预测值为90.3%.结论 结核特异性ELISPOT技术在我国初治(抗结核化疗疗程1个月内)的结核病患者中具有较高诊断价值.     

脓肿分枝杆菌致胫骨骨髓炎一例并文献复习北大核心CSCD

脓肿分枝杆菌是一种不需光、不产色和快速生长的分枝杆菌,主要侵犯肺部、皮肤和软组织,累及骨髓极为罕见。现将复旦大学附属华山医院收治的1例脓肿分枝杆菌患者的诊治情况及相关文献复习报道如下。