糖蛋白M6B对RAW264.7巨噬细胞炎症因子表达的影响

目的 研究糖蛋白M6B（glycoprotein M6B,GPM6B）对巨噬细胞炎症因子IL-1β、TNF-α、IFN-γ和IL-6的影响。 方法 ①Western blot和qPCR检测RAW264.7经典激活的巨噬细胞（classically activated macrophage, M1）和替代激活的巨噬细胞（alternatively activated macrophage, M2）中GPM6B表达量变化。②分别用对照组（sh-Scramble）和GPM6B干涉组（sh-GPM6B1和sh-GPM6B2）的慢病毒感染RAW264.7巨噬细胞系,荧光显微镜下观察病毒的感染效率。Western blot和qPCR检测GPM6B的干涉效率。③qPCR检测对照组和GPM6B干涉组促炎因子IL-1β、TNF-α和IFN-γ的mRNA表达水平,ELISA法检测上清中IL-1β和IL-6的含量。④Western blot检测干涉GPM6B后炎症相关分子p65和Iκα的磷酸化水平变化。 结果 ①相比于对照组,RAW264.7巨噬细胞M1型中GPM6B蛋白和mRNA水平均显著升高（P<0.05）,而M2型中GPM6B蛋白和mRNA水平均显著降低（P<0.05）。②与sh-Scramble组相比,sh-GPM6B1组和sh-GPM6B2组GPM6B蛋白和mRNA水平均显著降低（P<0.05）。③干涉GPM6B后促炎因子IL-1β、TNF-α和IFN-γ的mRNA表达水平和上清中IL-1β和IL-6均显著降低（P<0.05）。④干涉GPM6B后炎症相关分子p65和Iκα的磷酸化水平降低。 结论 干涉GPM6B可抑制RAW264.7巨噬细胞促炎因子的表达。     

足麻方联合尿素软膏治疗结直肠癌化疗相关性手足综合征临床观察

目的:观察足麻方联合尿素软膏治疗结直肠癌化疗相关性手足综合征瘀血阻络证的效果.方法:58例随机分为两组,两组均涂抹尿素软膏,治疗组加用足麻方浸洗.结果:总有效率治疗组高于对照组.结论:足麻方治疗手足综合征安全有效.     

靶向C D19嵌合抗原受体载体的构建及其稳转细胞体外活化效应的研究

目的：构建靶向CD19嵌合抗原受体载体并通过建立稳转细胞系检测其在体外的活化效应。方法合成获取CD19的CAR片段,转入pCMV6?Entry质粒,构建pCMV6?Entry?CAR载体。通过重组酶的作用将pCMV6?Entry?CAR载体和pLenti6．3／V5?DEST载体进行重组,形成pLenti6．3／V5?DEST?CAR载体,将其包装入慢病毒并感染Jurkat细胞建立稳转细胞系。将稳转的Jurkat细胞和Raji细胞共孵育后,利用ELISA检测上清IL?2的含量,判断Jurkat细胞的活化状况。结果成功构建了pLenti6．3／V5?DEST?CAR载体,感染筛选后的Jurkat细胞可稳定表达CD19的CAR,与Raji细胞共孵育后细胞上清中IL?2的浓度增加至22 pg／ml。结论实验中构建的pLenti6．3／V5?DEST?CAR载体能够稳定转染并表达于Jurkat细胞系中,并能有效促进其激活效应。为下一步优化CAR T细胞提供基础。