人脂肪干细胞来源外泌体对四氯化碳诱导肝纤维化模型大鼠的治疗作用

文题释义： 脂肪干细胞：是指从脂肪组织中分离得到的一种间充质干细胞,不但具有跨胚层多向分化潜能,在不同培养条件下可以分化成肌肉、软骨、脂肪组织、神经组织或肝脏组织,而且具备取材方便、来源广阔、增殖能力强、免疫原性低等优点,近年来成为干细胞治疗的热点。 外泌体：是一种细胞主动分泌的大小均一、直径为50-150 nm的脂质双分子层结构囊泡,可由树突细胞、淋巴细胞、成纤维细胞、间充质干细胞和肿瘤细胞等多种不同细胞类型释放。 背景：肝纤维化具有较高的发病率和死亡率,肝星状细胞的活化和增殖是肝纤维化进程中的关键环节。目前还没有针对单一环节或靶点的有效抗纤维化药物。 目的：分析人脂肪干细胞来源外泌体对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化的影响。 方法：①通过酶溶解法获取健康人群来源脂肪中干细胞,体外培养获取一定数量细胞后通过多重超滤法获取外泌体。体外培养的肝星状细胞经转化生长因子β1活化后利用不同浓度外泌体进行处理,通过定量PCR检测细胞内α-平滑肌动蛋白的表达明确其活化程度,以及分别使用CCK-8及流式细胞术检测各组外泌体处理后活化肝星状细胞的生长率及凋亡率。②通过腹腔注射四氯化碳构建肝纤维化大鼠动物模型,尾静脉注射外泌体进行治疗。检测各组动物的肝功能及血清Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原,肝组织Ishak评分及肝纤维化半定量,以及通过免疫荧光法检测肝组织内基质金属蛋白酶组织抑制剂1、基质金属蛋白酶9及α-平滑肌动蛋白的表达。实验方案于2017年1月经同济大学动物实验伦理委员会以及医学伦理学委员会批准。 结果与结论：人脂肪干细胞来源外泌体可抑制活化的肝星状细胞增殖,其可能的机制为抑制活化巨噬细胞的增殖,减少胶原纤维、α-平滑肌动蛋白及基质金属蛋白酶组织抑制剂1的表达,并促进基质金属蛋白酶9的表达。提示外泌体可治疗四氯化碳诱导肝纤维化。 orcid: 0000-0002-7141-8135 (Li Hongchao) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

干细胞来源的肝细胞:研究HBV感染的前景广阔新工具

正乙型肝炎病毒(HBV)感染常导致肝硬化和肝细胞癌,是引起进行性肝脏疾病的主要病因。遗传特征研究发现,HBV的复制周期特异性地依赖于宿主物种类型及其肝细胞。尽管用克隆的病毒基因组转染肝肿瘤来源的细胞系后可实现HBV复制和病毒颗粒组装,然而只有在人原代肝细胞(PHH)或树     

肝细胞移植的临床应用前景

<正>肝细胞移植经过50多年的基础与动物实验研究,被证明可有效解决肝移植相关问题,包括器官短缺和术后肝功能异常等。现阶段,临床上一般采用同种异体肝细胞移植治疗遗传代谢性肝病,但成功率仍较低。该方法受制于细胞移植的局限性以及移植细胞的选择性增殖,因此难以进行临床推广。肝部分切除术、放射治疗、增强细胞移植活性并减轻细胞消亡的给药治疗等方法可产生不同的移植效果,进而造成患者预后存在较大差异。动物实验表明,自体肝细胞选择性生长可获得最佳的移植效果,但     

胆管细胞向肝细胞分化:再生医学的机遇

<正>肝脏在出现急性细胞毒性损伤或外科手术切除后会发挥强大的再生能力,以代偿受损肝实质功能。肝细胞或胆管细胞损伤后,肝实质通常由现有已分化的肝实质细胞和胆管上皮细胞(BECs)增殖和补充来修复。然而对于慢性肝细胞损伤,已分化肝细胞的细胞修复能力不足,肝细胞进入复制性衰老阶段,增殖能力丧失,无法再生成肝实质细胞。此时,慢性肝损伤患者表现出胆管反应,BEC复制水平增加,与疾病晚期病理表现一致。基于此,终末小胆管会产生多潜能性BEC,有助于肝实质的修复。最近研究证明,BEC能够在肝细胞增殖受阻时转化为肝细胞。实际上,肝损伤人群和动物模型均表现出胆管细胞向肝细胞转化,其特征为肝细胞生长或增殖减少和衰老~([1])。     

警惕肝癌细胞株的污染

正人原发性肝肿瘤细胞株是临床前研究模型的重要工具,对特定基因、蛋白质和通路进行功能研究和验证具有重要意义。Cellosaurus数据库(2017年5月22日版;http://web.expasy.org/cellosaurus/)已纳入100余种源自肝细胞癌(HCC)的细胞株。总的来说,肿瘤被剥离后细胞在体外生长的效率限制了可用细胞株的数量。Qiu等~([1])最近研究发现,如果保存方法得当,肝癌细胞株中自然存在的分子改变可在不同的模型中如实表达。Cellosaurus细胞库中至少有35种不同的肝癌细胞株。     

药物性肝损伤潜在的新型生物标志物:细胞外囊泡

<正>药物性肝损伤(DILI)可致急性肝功能衰竭甚至死亡,迄今仍缺乏敏感、特异的诊断标记物。如何早期识别并干预,及时更改用药方案以避免持续性肝损伤,具有重大临床意义。目前临床常用肝损伤指标如血清ALT、AST等对DILI的诊断缺乏特异性,且在肝组织损伤较重时才有所变化,蛋白质组学、代谢     

间充质干细胞在肝脏疾病治疗中的历史性回顾及发展

正肝移植是目前治疗失代偿期肝硬化和急性肝衰竭的唯一手段。然而,肝源受限和免疫排斥使得终末期肝病必须寻求新的治疗策略。干细胞自我更新及多向分化的特性符合其可用于终末期肝病治疗的条件。动物实验已证实干细胞治疗可改