RpN47重组抗原的表达及其产物反应原性的初步鉴定

目的探讨梅毒螺旋体外膜蛋白（TpN47）重组抗原及其临床意义。方法采用PCR技术扩增TpN47重组抗原,再进行T-A克隆及测序,然后亚克隆至原核表达载体中,以亲和层析法纯化重组蛋白。将重组蛋白作为抗原制备酶联免疫吸附试验（ELISA）检测试剂盒,对正常人血清200份、类风湿性关节炎（RA）阳性血清55份、系统性红斑狼疮（SLE）阳性血清34份及梅毒可疑患者阳性血清135份进行检测,其结果与梅毒血凝试验（TPHA）、梅毒甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）的检测结果进行比较。结果成功地构建了pET32-TpN47重组表达载体,重组的TpN47蛋白在大肠杆菌BL21中得到稳定表达。对梅毒可疑阳性血清采用ELISA、TPHA、TRUST检出阳性率分别为81.48%、98.52%、71.11%;TRUST测出的8份可疑阳性样品及31份阴性样品TPHA检测结果均为阳性,而ELISA检测结果阳性19份。ELISA检测阳性率与TRUST和TPHA比较,差异均有统计学意义（均P〈0.01）。结论TpN47重组抗原具有较好的免疫反应活性,ELISA试剂特异性、敏感性次于TPHA,但明显高于TRUST。     

哮喘大鼠血单个核细胞中STAT5b mRNA和IL-4 mRNA的表达及布地奈德的影响

目的研究哮喘大鼠血单个核细胞中信号转导和转录激活因子STAT5bmRNA和IL-4mRNA的转录表达及布地奈德(BUD)对其表达的影响。方法30只体重为140￣200g清洁级SD雌性大鼠,随机分为3组:哮喘组(A组)、BUD组(B组)、正常对照组(C组)。对血中嗜酸性粒细胞(EOS)计数;应用双抗体夹心ELISA测定血浆中IL-4和IFN-γ水平;采用SYBRGREENI荧光定量PCR法测定STAT5bmRNA和IL-4mRNA的相对含量。结果(1)A组血中单个核细胞STAT5bmRNA和IL-4mRNA的表达均高于B组和C组(P<0.01);B组与C组之间差异无统计学意义(P>0.05)(。2)STAT5bmRNA与IL-4mRNA的表达呈正相关(P<0.01),且两者的表达分别与血浆中的IL-4水平、EOS绝对值呈正相关(P<0.01),与血浆中IFN-γ水平呈负相关(P<0.01)。结论哮喘大鼠血中单个核细胞STAT5bmRNA和IL-4mRNA的表达增强且呈正相关;布地奈德可以下调STAT5bmRNA和IL-4mR-NA的表达,可能是其抑制哮喘气道炎症形成的重要机制之一。     

前列腺素D2受体类药物对支气管哮喘大鼠气道炎症的影响

前列腺素代谢产物与支气管哮喘(简称哮喘)慢性气道炎症的发生和维持有密切关系,其中前列腺素D2(PGD2)能通过细胞膜上PGD2受体:DP1和CRTH2受体影响嗜酸粒细胞(eosinophil,Eos)和T细胞等迁移和活化,以及白细胞介素(IL)分泌的改变,在哮喘气道炎症发病机制上起重要作用.为此,我们对PGD2受体类药物应用后动物哮喘模型气道炎症的改变情况进行了初步研究.     

临床检验基础实践技能在临床应用的调查分析

对二级医院、三级医院检验科开展的化验项目进行调查，发现《临床检验基础》教材中一些实践技能项目已被逐渐淘汰或被其他方法替代，而一些原来不够重视的新项目已局部或广泛开展，尤其是检验仪器的使用越来越普遍，因此。应及时调整教学内容和课时，以适应医学检验技术的发展。     

大鼠哮喘模型中嗜酸性粒细胞和IL-10改变研究

目的探讨大鼠哮喘模型中白细胞介素-10(IL-10)、嗜酸性粒细胞(EOS)的变化及其在哮喘发病机制中的作用。方法30只SD大鼠随机分为正常对照组、3周哮喘组和4周哮喘组,用ELISA法测定各组大鼠外周血清IL-10,并计数外周血和肺泡灌洗液(BALF)中EOS。结果各哮喘组IL-10显著低于对照组(P均<0.05),且4周哮喘组IL-10显著高于3周哮喘组(P均<0.05);外周血EOS计数各哮喘组显著高于正常对照组(P均<0.05);在BALF中,各哮喘组显著高于正常对照组(P均<0.01),但2个哮喘组间无显著性差异。血清IL-10浓度与外周血和BALF中EOS绝对计数无显著相关性。结论大鼠哮喘模型中有血清IL-10下降现象,在4周后有升高趋势,但仍低于正常对照组,其升高趋势与EOS计数无线性相关,IL-10升高趋势与气道重塑可能相关。     

孟鲁司特和卡介苗多糖核酸对哮喘大鼠血单个核细胞中STAT5b mRNA和IL-4 mRNA表达的影响

目的：研究孟鲁司特和卡介苗多糖核酸对哮喘大鼠血单个核细胞中信号转导子和转录激活子5b(STAT5b) mRNA和白细胞介素4（IL-4）mRNA的转录表达的影响。方法：52只体重为140~200 g清洁级Sprague-Dawley雄性大鼠,随机分为4组：哮喘组、孟鲁司特组、卡介苗多糖核酸组和正常对照组。用卵白蛋白制备大鼠哮喘模型。计数血中嗜酸性粒细胞(EOS);应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验测定血浆中IL-4和γ-干扰素（IFN-γ）浓度;采用SYBR GREEN I荧光实时定量PCR法测定STAT5b mRNA和IL-4 mRNA的相对表达量。结果：①哮喘组血单个核细胞中STAT5b mRNA和IL-4 mRNA的表达量高于其他各组（P<0.01）;在孟鲁司特组和卡介苗多糖核酸组中两者的表达量相近（P>0.05）。哮喘组除了IFN-γ水平低外,其余无论是STAT5b mRNA,IL-4 mRNA,EOS绝对值等都是4组中最高的（P<0.01）;除哮喘组外,其余组的各项指标相近（P>0.05）。②STAT5b mRNA表达量与IL-4 mRNA表达量、IL-4浓度、EOS绝对值呈正相关(P<0.01),与IFN-γ浓度呈负相关（P<0.01）。结论：哮喘大鼠血单个核细胞中STAT5b mRNA和IL-4 mRNA的表达增强且呈正相关;孟鲁司特和卡介苗多糖核酸可以下调STAT5b mRNA和IL-4 mRNA的表达,可能为其抑制哮喘气道炎症形成的重要机制之一。［中国当代儿科杂志,2009,11（2）：133-137］     

乙型肝炎病毒DNA阳性患者血清中前S1蛋白的检测及其临床意义

乙型肝炎病毒的外层衣壳上存在主要蛋白、中分子蛋白和大分子蛋白.这3种蛋白含有表面抗原(HBsAg)、前S1蛋白和前S2蛋白.中分子蛋白的N末端加上128个氨基酸序列构成大分子蛋白,这128个氨基酸序列就是前S1蛋白的所在部位.前S1蛋白的21-47肽段是HBV感染肝细胞的结合位点,与HBV侵入肝细胞有关.本文通过对212例乙肝患者血标本进行前S1蛋白、乙肝三系及HBV-DNA的联合检测,对它们作相关分析,并探讨乙型肝炎病毒(HBV)DNA阳性患者血清中前S1蛋白的检测意义.