带科绦虫线粒体基因组全序列研究进展

带科绦虫（Taeniidae）幼虫引起的绦虫蚴病（Larval cestodiasis／infections with larva of cestodes）如棘球蚴病、囊尾蚴病等是一类重要的人兽共患寄生虫病,在我国和世界各地普遍流行,危害严重。本文将对带科绦虫线粒体基因组序列分析的研究进展、应用和今后发展方向做一简要综述。迄今,     

豆状囊尾蚴体外培养方法的建立及其分泌产物的分离鉴定

目的 建立豆状囊尾蚴体外长期培养方法,并对其培养分泌产物进行鉴定。方法 将豆状带绦虫虫卵经口感染新西兰白兔（2 000枚/只）,感染后3个月,从感染兔腹腔中收集豆状囊尾蚴。将虫体随机分为PBS组、 RPMI 1640组、胆汁组（RPMI 1640+10%兔胆汁）和血清组（RPMI 1640+10%无外泌体胎牛血清）,10个/组,37℃、 5%CO2培养后5 min、 1 h、 2 h、 12 h、 24 h、 36 h、 48 h及其后每天进行观察,记录豆状囊尾蚴头节翻出情况、虫体活力、体外存活时间及形态改变等,筛选适宜的培养条件。取50个幼虫在细胞瓶（25 cm2）中按筛选出的培养条件培养,每隔48小时收集培养液离心浓缩,取上清,蛋白质免疫印迹（Western blotting）检测豆状带绦虫烯醇化酶（Tpeno）和Tp14-3-3蛋白的表达情况。收集豆状囊尾蚴培养上清,提取外泌体,分别与阴性兔血清、 CD63抗体、抗Tpeno单克隆抗体1D7和抗Tp14-3-3多克隆抗体孵育45 min,再加入胶体金标记的IgG,透射电镜观察外泌体形态,免疫电镜检测其标记蛋白CD63、 Tpeno...     

丝状噬菌体展示技术在寄生虫学中的应用

本文介绍丝状噬菌体展示技术及其在寄生虫病预防、诊断和治疗中的应用。包括：①噬菌体展示技术概况，丝状噬菌体及其载体的优势; ②构建寄生虫噬菌体抗体库、确定抗原决定簇、模拟抗原决定簇用于研制诊断试剂和疫苗等。     

中国白兔白介素-10基因的克隆、表达及其抗体的制备

目的了解一次性自毁式注射器的生物相容性。方法进行细胞毒性试验、豚鼠迟发型超敏反应试验、兔皮内刺激试验等,并根据相关标准对试验数据进行分析和评估。结果一次性自毁式注射器的细胞毒性试验、迟发型超敏反应试验、皮内刺激试验均为阴性。结论一次性自毁式注射器具有良好的生物相容性。     

犬科动物棘球绦虫感染检测方法研究进展

棘球蚴病（Echinococcosis）又称包虫病（hydatiddisease）,是由棘球属（Echinococcus）绦虫的幼虫——棘球蚴（echinococcusorhydatidcyst）寄生于动物（包括人）所致的一类严重危害人体健康和阻碍畜牧业发展的人畜共患寄生虫病,呈世界性分布。     

猪带绦虫胰岛素受体TsIR-4810的鉴定及LBD区表达

目的 克隆鉴定猪带绦虫胰岛素受体TsIR-4810基因,并表达其LBD 区。方法 设计猪带绦虫胰岛素受体TsIR-4810特异性引物,并分段进行RT-PCR扩增。TsIR-4810的完整ORF序列经BLAST同源比对,SMART预测其结构域,SWISS-MODEL同源建模,并用PhyML构建系统发育树。将TsIR-4810的LBD区克隆至pET-30a中进行诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Western-blot鉴定。结果 获得的目的基因完整的ORF为4 920 bp,其编码蛋白的氨基酸序列与其他生物的胰岛素受体一样,具有相对保守的分泌信号肽、受体L1和L2结构域、FnⅢ结构域、跨膜区和受体酪氨酸激酶域。构建的LBD重组菌株诱导表达了63 ku的目的蛋白,与预期大小相符,且主要以包涵体形式存在。结论 TsIR-4810为猪带绦虫胰岛素受体基因,其LBD区的成功表达,将为开展基于胰岛素受体LBD区的新型疫苗和药物奠定基础。     

猪囊尾蚴AgB基因的克隆表达及其免疫学特性分析

目的 克隆猪囊尾蚴 AgB 基因并在大肠杆菌中表达,为研制猪囊尾蚴病诊断试剂和基因工程疫苗奠定基础.方法 从猪囊尾蚴虫体中提取总 RNA,利用反转录聚合酶链式反应及重叠延伸 PCR 法扩增 AgB 完整序列,并克隆到原核表达载体 pGEX-4T-1,在大肠杆菌中诱导表达.通过 SDS-PAGE、Western-blotting检测AgB的表达和免疫反应活性.通过对包涵体的洗涤、纯化及变复性研究,纯化目的蛋白.采用ELISA法检测纯化蛋白检出猪囊尾蚴阳性血清率和免疫小鼠血清中抗猪囊尾蚴抗体的水平.结果 测序证实扩增出AgB基因序列并正确插入到原核表达载体.表达质粒在大肠杆菌BL21中高效表达.纯化的目的蛋白,具有良好的抗原性和免疫原性.结论 成功扩增了全长AgB基因并得到了高效表达,纯化了具有免疫性的重组蛋白,为进一步开展AgB的诊断试剂和重组疫苗研究奠定了基础.