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目的构建新城疫病毒JL02/2000株P和NP基因真核表达质粒,并在BHK-21细胞中表达,为该病毒的反向遗传操作系统的建立奠定了基础。方法根据新城疫病毒(JL02/2000毒株)的全基因组中的NP、P基因分别设计引物,应用RT-PCR方法扩增NP基因和P基因,将扩增的NP基因和P基因片段连接到pMD18-T载体上,限制性内切酶EcoRⅠ和XbaⅠ酶切鉴定确认后回收目的条带,分别插入到真核表达载体pCI上,经测序确认pCI-NP、pCI-P辅助质粒的构建。将pCI-NP、pCI-P转染BHK-21细胞,两次换液,72h后回收细胞,经RT-PCR检测NP和P基因片段。结果构建的辅助质粒pCI-NP和pCI-P经双酶切和测序鉴定到目的片段。pCI-NP、pCI-P转染后,RT-PCR检测到NP和P基因片段。结论新城疫病毒pCI-NP、pCI-P辅助质粒构建成功,pCI-NP、pCI-P可在BHK-21细胞中表达,为该病毒的反向遗传操作系统的建立奠定了基础。 相似文献
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郭海宁 《世界核心医学期刊文摘》2019,(1)
目的探讨核磁共振在急性期缺血性脑卒中诊断中的应用价值。方法抽取2017年2月至2018年2月来我院诊治的缺血性脑卒中急性期患者480例,对其核磁共振检查结果进行回顾性分析。结果 480例缺血性脑卒中急性期患者的病灶在常规序列扫描T_1WI、T_2WI、FLAIR序列中信号不完全一致,而在DWI序列中均呈高信号,且ADC值减低,具有特异性。结论核磁共振DWI序列扫描在急性期缺血性脑卒中的诊断中不仅准确性高,而且有助于判断脑组织梗死范围,其他常规序列有助于明确颅内有无其他病变存在,可为临床制定治疗方案提供可靠依据,能够作为诊断急性期缺血性脑卒中的首选检查方法推广应用。 相似文献
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DHS加螺纹钉固定治疗老年股骨转子间骨折 总被引:2,自引:2,他引:0
2003年1月~2008年12月,笔者采用DHS加螺纹钉固定治疗老年股骨转子间骨折86例,疗效满意.
1 材料与方法
1.1 病例资料本组86例,男42例,女44例,年龄61~93岁.其中61~70岁28例,71~80岁39例,81~90岁17例,>90岁2例.左髋45例,右髋41例.Evans分型:Ⅰ型14例,Ⅱ型23例,Ⅲ型43例,Ⅳ型6例.均为闭合性骨折.合并内科疾病55例,其中高血压21例,陈旧性脑梗死3例,矽肺1例,糖尿病15例,冠心病12例,老慢支3例. 相似文献
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目的评价实验室构建的欧洲型PRRSV和PCV2二联重组痘苗病毒猪体免疫效果。方法分别用重组痘苗病毒rVTT-PCV2-ORF2-EU-ORF3-ORF5和rVTT-EU-ORF3-ORF5进行猪体免疫试验,每周采血,分离血清,采用ELISA检测病毒特异性抗体、中和抗体检测及细胞因子水平,评价免疫效果。结果 rVTT-PCV2-ORF2-EU-ORF3-ORF免疫组35d时,猪血清欧洲型PRRSV GP3和GP5及PCV2ORF2特异性抗体,显著高于野毒组(t=6.61,t=9.21,t=10.34,P〈0.05);猪血清中和抗体35d时,各免疫组均可产生较高的免疫水平,差异均无统计学意义(t=0.48,P〉0.05);重组痘苗病毒疫苗rVV-ORF2-EU-ORF3-ORF5免疫可诱导IL-4和IFN-γ产生,增强猪体细胞免疫应答水平。结论欧洲型PRRSV、PCV2二联重组痘苗病毒疫苗能诱导猪体产生体液和细胞免疫应答,为欧洲型PRRSV、PCV2的新型疫苗研究奠定了实验基础。 相似文献
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