HBx基因下调p21对HepG2细胞增殖与凋亡的影响

目的:构建转基因细胞模型HepG2/HBx,观察HBx基因对HepG2细胞增殖、周期和凋亡的影响, 探讨细胞周期蛋白P21在其中的作用和意义.方法:应用脂质体转染和G418筛选构建稳定表达HBx的转基因细胞HepG2/HBx,RT-PCR和Western blot鉴定HBx mRNA与蛋白的表达.分别以四唑蓝(MTT)比色法、流式细胞术检测HepG2/HBx细胞及对照组HepG2与HepG2/pcDNA3.1细胞(转染空载体pcDNA3.1的HepG2细胞)的增殖、周期和凋亡.另半定量RT-PCR检测各组细胞中细胞周期蛋白P21与抑癌基因p53mRNA的表达.结果:HepG2/HBx细胞中有HBx mRNA和蛋白的表达.HepG2/HBx细胞生长速度加快.HepG2/HBx中G0/G1期细胞比例较对照组显著减少(43.34%±3.11%vs57.69±4.28%,P<0.01),S期细胞比例明显增加(28.69%±1.17%vs22.41%±1.99%,P<0.05),同时还发现与对照组相比其凋亡率也显著降低(1.19%±0.06%vs 5.43%±0.42%, P<0.001).细胞周期蛋白p21 mRNA在HepG2/HBx细胞中的表达较对照组细胞显著降低(0.16±0.05vs0.78±0.15,P<0.001),而p53表达则无显著变化.结论:HBx基因可下调细胞周期蛋白P21mRNA的表达,可能参与HBx基因加速HepG2细胞周期进程、促进细胞增殖以及抑制细胞凋亡的作用.     

重症急性胰腺炎新分类再评价的单中心临床研究

目的 探讨新的急性胰腺炎（AP）分类标准的临床应用价值.方法 回顾性分析2005年1月至2012年12月收治的649例重症急性胰腺炎（SAP）患者资料,按新的分类标准将其分为中度AP（MSAP）和重度AP（SAP）,比较两组患者的Ranson、APACHEⅡ、BISAP、MCTSI、Marshall评分,器官衰竭发生率,临床治疗情况,预后及病死率.结果 649例传统分类的SAP患者按照新分类标准分为MSAP559例和SAP 90例.两组患者的性别、年龄、病因差异均无统计学意义.新分类的MSAP患者入院时的Ranson、APACHEⅡ、BISAP、MCTSI、Marshall评分分别为（1.5±1.3）、（7.6±4.8）、（1.6±0.9）、（6.0±1.8）、（0.0±0.4）分,新分类的SAP患者分别为（3.4±1.7）、（16.8±5.7）、（2.7±0.9）、（6.9±2.1）、（4.3±2.0）分,两组差异均有统计学意义（P值均＜0.01）.MSAP患者发生呼吸衰竭1例次,肾脏衰竭1例次,循环衰竭0例次,发生2个脏器衰竭0例,3个脏器衰竭1例,新分类的SAP患者分别为30、23、l例次和20、11例,两组差异具有统计学意义（P值均＜0.01）.新分类的SAP患者需要入住的重症监护病房（ICU）、血液净化、机械通气、介入引流、外科手术等例数的百分比均显著高于MSAP组,且需要时间也长于后者,两组间的差异均有统计学意义（P值均＜0.01）,但两组患者需要肠内营养支持的例数差异无统计学意义.新分类的SAP患者的院内病死率为35.6％（32/90）,显著高于MSAP组的2.0％（11/559）,平均住院时间为（36.3 ±30.2）d,也显著长于MSAP患者的（23.0±18.8）d,两组间的差异均具有统计学意义（P值均＜0.01）.结论 采用新的AP分类方法能更精确地反映病情的严重程度,更准确地判断预后并指导临床治疗.     

HBx上调HepG2细胞DNA修复酶hMTH1表达的意义

目的: 探讨DNA氧化损伤修复酶hMTH1在HBx致肝细胞癌发生机制中的作用.方法: 应用HPLC/ECD法检测稳定表达HBx的转基因细胞HepG2/HBx及其对照组HepG2与HepG2/pcDNA3.1细胞中的8-OHdG的含量;并以β-actin为内对照, 应用RT-实时PCR定量检测各组细胞中可水解8-OHdG的DNA修复酶hMTH1的表达.结果: 8-OHdG在He pG2/HBx细胞中的含量(fmol 8-OHdG/mg DNA)显著高于对照组HepG2和HepG2/pDNA3.1细胞(36.5±6.25 vs8.52±1.65, 9.12±2.69, 均P<0.05). DNA修复酶hMTH1在HepG2/HBx细胞中的表达较两对照组细胞明显增高(1.213±0.100 vs 0.087±0.026, 0.112±0.052 hMTH1/β-actin mRNA×100, 均P<0.05).结论: H B x 可能通过诱导氧化应激增加HepG2细胞内DNA氧化损伤产物8-OHdG的含量, 从而反应性上调DNA修复酶hMTH1的表达.     

暴发性胰腺炎合并急性肺栓塞两例临床分析

重症急性胰腺炎(SAP)发病急骤,变化迅速,病情危重而复杂,其早期并发症包括急性肾功能衰竭、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)、腹腔间室隔综合征(ACS)、后腹膜出血等,发病72 h内出现致命性并发症称暴发性胰腺炎(FAP).有关SAP合并急性肺动脉栓塞在国内外报道较少,但该并发症一旦出现,预后极差,因此需要引起医护人员的高度重视.     

高容量血液滤过对重症急性胰腺炎的治疗作用

目的: 观察高容量血液滤过(HVHF)治疗重症急性胰腺炎(SAP)的临床疗效, 评价其在SAP治疗中的作用, 探索治疗SAP的新方法.方法: 采用回顾性对照临床研究, 将我院2004-12/2008-12因SAP住院治疗的患者45例分为2组: 对照组24例, HVHF组21例. 所有患者均符合2004年中国急性胰腺炎诊治指南(草案)中SAP的诊断标准, 发病后48 h内入院, 经CT证实均无明确胆道梗阻. 自动生化检测仪检测2组SAP患者治疗前后血清淀粉酶及肾功能、常规检测血常规、CRP等, 记录生命征、腹部症状并统计并发症及死亡率.结果: 与对照组相比, HVHF 组患者的APACHEⅡ评分明显降低, 治疗第3天与第7天HVHF组显著低于对照组(6.6±1.5 vs 9.9±2.5, 3.4±1.1 vs 6.4±2.0, 均P <0.05);局部症状与体征缓解时间明显缩短, HVHF组腹痛缓解时间较对照组明显缩短(51±16 h vs 71±34 h,P <0.05);腹部压痛缓解时间与对照组相比也显著缩短(71±16 h vs 102±34 h, P <0.05);血尿淀粉酶指标、WBC、CRP及肾功能生化指标明显好转;并发症发生率和死亡率均降低(14.3% vs 37.5%, 4.8% vs 20.8%, 均P <0.05);平均住院时间显著缩短(P <0.05);住院费用无明显增加.结论: HVHF能迅速减轻SAP患者腹部症状与体征, 改善器官功能, 显著改善预后, 其机制可能通过阻断SAP早期全身炎症反应综合征.     

郝斌教授:桃李芬芳,润物无声

郝斌,男,1963年12月出生,2002年光荣加入中国共产党.他于1981～1986年就读于原白求恩医科大学(现吉林大学白求恩医学部)临床医学专业,毕业后进入山西医科大学第二医院普通外科工作.1996 年至原北京邮电总医院(现北京协和医院西院)进修,师从汪忠镐院士学习血管疾病诊疗技术,学成后于1999年在山西医科大学第...     

The Effects of HBx Gene on the Expression of DNA Repair Enzymes hOGG1 and hMYHα mRNA in HepG2 Cells

To observe the alteration in the expression of DNA repair enzymes hOGG1 and hMYHa and the change in 8-OHdG levels in the HBx gene-transfected cells HepG2/HBx and to explore the mechanisms of the HBV-associated hepatocellular carcinoma, the gene-transfected cells HepG2/HBx which stably expressed HBx was established, and the effect of HBx on the cell cycle and proliferation of HepG2 was examined. By using the β-actin as the interior control, real-time polymerase chain reaction （Real-time qPCR） was employed to quantitatively detect the expression of DNA repair enzymes hOGG1 and hMYHα in the HepG2/HBx, the control cells HepG2 and HepG2 transfected with pcDNA3.1 vector （HepG2/pDNA3.1）. The 8-OHdG levels were determined by HPLC/ECD in the established gene-transfected cells HepG2/HBx and the control cells HepG2 and HepG2/pcDNA3.1. Our results showed that the expression of DNA repair enzyme hMYHα in the HepG2/HBx （0.021±0.007） was significantly lower than that of HepG2 （0.099±0.041） （P〈0.05） and HepG2/pDNA3.1 （0.121±0.005） （P〈0.05）. However, the no significant differences existed in the expression of DNA repair enzyme hOGG1 among the three cell strains （P〉0.05）. The 8-OHdG level in the HepG2/HBx was significantly higher than that in HepG2 and HepG2/pcDNA3.1 （P〈0.05）. It is concluded that HBx gene may inhibit the expression of DNA repair enzyme hMYHα mRNA to impair the ability to repair the intracellular DNA oxidative damage, to increase the oxidative DNA-adduct 8-OHdG and to affect the nucleotide excision repair function, thus participate in the occurrence and development of hepatocellular carcinoma.     

我国重症急性胰腺炎临床救治现状与思考

经过国内外学者的共同探索和努力，重症急性胰腺炎的治疗理念日趋完善，疗效有显著提高，尤其是内镜和微创技术的广泛应用．带来了重症急性胰腺炎治疗策略上的变化．但仍面临着巨大的历史挑战。如何进一步规范重症急性胰腺炎的治疗，提高救治成功率，同时真正规范地开展相关临床科研，提高该领域的研究质量，还需作出很大的努力.     

HBx基因对HepG2细胞DNA修复酶表达的影响

乙型肝炎病毒X基因(HBx)可通过与宿主细胞的多种蛋白相互作用,参与肝细胞癌(HCC)的发生和发展[1].但其详细机制尚未完全阐明.