国产化学发光甲功五项试剂盒与雅培试剂对比及临床应用探讨

[目的]将国产化学发光甲功五项试剂盒与雅培试剂进行灵敏度、线性范围、参考值、反应模式、示踪物、底物、分离相等方法和参数,以及临床样本检测对比。[方法]将两组试剂测量334例临床血清样本检测结果进行分析。[结果]国产试剂在临床检测方面与雅培试剂符合良好。[结论]国产化学发光甲功五项试剂盒质量已经达到国外水平。     

氯和二氧化氯灭活甲型肝炎病毒机理的研究

为探讨氯和二氧化氯灭活HAV机理及用PCR评价消毒效果的可行性,采用细胞培养、ELISA及大片段逐步步移RT-PCR方法对消毒前后HAV感染性、HAAg抗原性及HAV核酸全序列进行检测。结果,以含有效氯10 mg/L消毒液作用30 min,或含二氧化氯7.5 mg/L的消毒液作用10 min,对HAV感染性的灭活率均为100％,均可破坏HAV核酸5’非编码区;但检测两者HAAg抗原性P/N值分别为3.21(阳性)与2.02(阴性)。结果表明,HAV感染性的灭活与HAV核酸5’非编码区破坏是一致的,可用PCR技术检测HAV核酸5’非编码区以判定HAV灭活与否。     

应用免疫层析法检测食品中的沙门菌

〔目的〕建立一种简便快速的胶体金免疫层析法 (GICA)用于检测食品中的沙门菌。〔方法〕抗沙门菌多抗用抗原吸收法封闭与其他肠道杆菌的交叉反应 ,标记胶体金溶胶制成探针 ,采用多膜复合的方法制备免疫层析条。〔结果〕该层析条可检出人工染菌的畜禽肉、牛奶和米饭等食品中的沙门菌 ,灵敏度为 2 .1× 10 6cfu/ml,用常见溶液和自来水处理染菌食品样品 ,检测结果无异。〔结论〕该方法简便快速 ,无需特殊仪器设备 ,适合现场检测之用。     

免疫磁性粒子分离水和食品中鼠伤寒沙门菌的初步研究

自新中国成立以来,各种传染病的发病率,尤其是烈性传染病得到了有效的控制.但常见的肠道传染病诸如通过水和食品为媒介引起的食物中毒、伤寒、菌痢,却每年都有发生,甚至有时是暴发流行.     

胸腺素α原对老龄鼠免疫功能的调节

目的探讨胸腺素α原对老龄鼠免疫功能及甲状腺激素分泌的调节作用。方法采用分光光度法检测血清溶血素和抗体形成细胞;ＭＴＴ法检测淋巴细胞转化;放免法检测血清甲状腺激素（Ｔ３、Ｔ４及ＴＳＨ）;并称小鼠胸腺、脾脏重量,计算相应指数。结果与对照组相比,胸腺素α原可明显提高胸腺及脾脏指数;促进血清溶血素的分泌,并提高抗体形成细胞水平;促进淋巴细胞转化;促进血清Ｔ３、Ｔ４分泌,降低ＴＳＨ的分泌。结论胸腺素α原不仅具有免疫刺激活性,也可调节Ｔ３、Ｔ４、ＴＳＨ的合成分泌。     

几株硝化菌的筛选及其初步鉴定

目的 :筛选、分离能够用于治理氨氮污染和军事坑道生活污物、污水的硝化菌。方法 :通过富集培养从土壤中筛选的硝化菌 ,在进行形态学检验和硝化速率测定后 ,设计引物扩增硝化菌的特征性基因NorB ,随机选择一个PCR产物进行测序 ,并与Genbank上的序列比较同源性。结果 :筛选到 7株能够降解亚硝酸盐的细菌 ,经革兰氏染色后发现全部为阴性 ,其菌落形态以小、圆、淡黄色为主 ,细菌形态多为短杆状 ;各菌株的硝化速率在 4 .35～ 4 .80 (mg·L 1·d 1)之间。用PCR均能扩增出预期大小片段。对其中的某一个PCR产物直接测序 ,与Genbank中的序列比较 ,发现该基因与硝化菌N .hamburgensis的Norb基因同源性高达 99%。结论 :可以初步断定 ,我们所筛选到的菌为硝化菌     

免疫磁性粒子的制备及性能初步观察

目的：将免疫磁性分离技术应用到水和食品致病微生物检验工作中，达到快速地从样品中分离致病生生物的目的，以提高检测速度。方法：对磁性粒子首先进行高分子物质的包被，继而进行了三种磁性粒子对细菌的非特异性吸附现象和免疫磁性粒子对细菌特异性结合能力的观察。结果：示经包被的磁性粒子对细菌有很强的非特异性吸附，免疫磁性粒子对相应的细菌方法节省很多时间，可快速从样品中分离出致病微生物。     

氯灭活甲型肝炎病毒与其核酸变化关系的研究

为了解氯灭活ＨＡＶ与ＨＡＶ核酸变化的关系，采用大片段逐步步移ＲＴ一ＰＣＲ技术对ＨＡＶ核酸全序列进行扫描。结果，在２５℃以１０ｍｇ／Ｌ有效氯作用３０ｍｉｎ，可完全灭活ＨＡＶ，而５ｍｇ／Ｌ有效氯作用６０ｍｉｎ则不能。在ＨＡＶ核酸全序列中，各部分对氯的抗力不一，以５′ＮＴＲ为敏感。用１０ｍｇ／Ｌ有效氯作用３０ｍｉｎ，检测其为阴性，其次为３′ＮＴＲ，当１０ｍｇ／Ｌ有效氯作用６０ ｍｉｎ时，亦为阴性；结构区的某些片段对氯的抗力较强。以１０ｍｇ／Ｌ有效氯作用３０ｍｉｎ，进一步缩小氯对ＨＡＶ核酸作用敏感区间｛即近５′ＮＴＲ）的检测发现，病毒最初的１～６７１ｂｐ检测呈阴性，而６６９～１０２３ｂｐ仍呈阳性。结果表明，氯灭活ＨＡＶ与其核酸５′ＮＴＲ的损伤一致，在充分了解氯对ＨＡＶ作用机理的基础上，ＰＣＲ可用于消毒效果的评价。     

基因芯片检测肠道致病菌技术的建立和应用

目的 快速、准确地检测水中存在的肠道致病菌。方法 采用基因芯片技术对水中常见肠道致病菌进行检测和鉴定，包括检测靶基冈的扩增、基因芯片的制备、杂交反应和杂交结果的检测与分析四个步骤。结果 应用基因芯片对涉及9个菌属的143株致病菌在相同的条件下进行了杂交检测，得到菌属(科)特异性的杂交图谱，从而达到对细菌进行检测鉴定的目的。结论 制备的基因芯片能够同时检测沙门菌属、志贺菌属、埃希菌属、葡萄球菌属、变形杆菌属的细菌以及小肠结肠炎耶尔森菌、副溶血性弧菌等。     

军团菌D-RAPD基因分型研究

〔目的〕建立军团菌的基因分型方法。〔方法〕采用D—RAPD技术 ,应用 6条简并随机引物对 5株军团菌 (包括 3株嗜肺军团菌 )进行基因分型研究。〔结果〕除引物 4 ,其余 5个随机引物均能对军团菌菌株扩增出特异性的DNA条带 ,其中引物 2的分型效果较好。用引物 2、引物 3两引物 ,引物 2、引物 5两引物 ,引物 3、引物 5两引物 ,分别对 5株军团菌DNA进行扩增 ,结果 3对引物在扩增条带的数量和长度上均能有效区分 5株军团菌。〔结论〕D—RAPD技术快速、简便 ,是在分子水平对致病微生物进行检测、发病机理分析、流行病学研究的理想方法。