LncRNA HAGLR靶向miR-143/Hedgehog信号通路对HPV16/18感染的宫颈癌细胞活性作用机制

目的 研究LncRNA HAGLR靶向miR-143/刺猬因子(Hedgehog)信号通路对人乳头瘤病毒(HPV)16/18感染的宫颈癌细胞活性作用机制。方法 CaSki细胞购自美国标准生物品收藏中心。选取宫颈癌患者的癌组织(符合宫颈癌确诊标准)与癌旁5 cm宫颈组织标本各10例。将LncRNA HAGLR转染到宫颈癌细胞中后分为宫颈癌组、NC组及转染组。实时荧光聚合酶链反应(RT-PCR)检测LncRNA HAGLR、miR-143水平。噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖。流式细胞仪检测细胞凋亡。Western印迹检测音猬因子重组蛋白(Shh)、神经胶质瘤相关基因同源蛋白(Gli)1蛋白水平。双荧光素酶报告检测LncRNA HAGLR、miR-143、Shh、Gli1靶向。结果 宫颈癌组织中LncRNA HAGLR表达明显高于在癌旁组织(P<0.05)。宫颈癌组与NC组各指标对比无明显差异(P>0.05)。与NC组相比,转染组LncRNA HAGLR、增殖能力、Shh、Gli1水平明显降低,miR-143、凋亡率明显增加(P<0.05)。结论 LncRNA HAGLR靶向...     

miR-222-3p对人乳头瘤病毒感染的宫颈癌细胞活性及糖酵解的作用及其机制

目的：探讨miR-222-3p对人乳头瘤病毒（HPV）感染阳性宫颈癌细胞活性及糖酵解的作用及其机制。方法：将Siha细胞分为宫颈癌组（未转染的HPV感染Siha细胞）、miR-222-3p-NC组（HPV感染Siha细胞转染miR-222-3p-NC）、miR-222-3p mimics组（HPV感染Siha细胞转染miR-222-3p mimics）及miR-222-3p siRNA组（HPV感染Siha细胞转染miR-222-3p siRNA）。qPCR检测各组Siha细胞miR-222-3p相对表达;CCK-8检测各组Siha细胞活性;流式细胞仪检测各组Siha细胞凋亡率;Transwell小室检测各组Siha细胞侵袭数目;划痕实验检测各组Siha细胞迁移距离;试剂盒检测各组Siha细胞葡萄糖及乳酸水平;免疫印迹检测各组丙酮酸激酶M2型（PKM2）、乳酸脱氢酶A(LDHA)、磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B(AKT)蛋白表达;荧光素酶证实miR-222-3p对PI3K、AKT的调控作用。结果 ：宫颈癌组、miR-222-3p-NC组、miR-222-3p mimics...     

C-Fos与HR-HPV病毒负荷量在宫颈病变及宫颈癌中表达的相关性研究

目的探讨原癌基因蛋白(C-Fos)在宫颈病变组织及宫颈癌中的表达及与高危人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染的相关性。方法收集2012—2014年就诊于唐山市妇幼保健院125例慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤变及宫颈癌患者的宫颈组织标本及相应宫颈脱落细胞标本,采用免疫组化(SP)法检测宫颈组织C-Fos基因蛋白的表达,同时采用杂交捕获法(HC-Ⅱ)检测相应宫颈脱落细胞中HR-HPV病毒负荷量,分析二者在宫颈病变及宫颈癌组织中表达的相关性。结果 125例标本中HR-HPV阳性81例,其中1≤病毒负荷量(RLU/CO)≤100共40例,100~1 000共33例,>1 000为8例;C-Fos在慢性宫颈炎、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ及宫颈癌中阳性表达率分别为0%,33.3%,42.9%,52.2%,67.5%,经Spearman秩相关分析显示,HR-HPV病毒负荷量与C-Fos表达有相关性(r=0.533,P=0.000)。结论随宫颈病变程度进展,HR-HPV病毒负荷量与C-Fos表达率均逐渐升高,且二者具有相关性,有望将二者联合检测应用于临床,进而预测宫颈病变及宫颈癌的病变程度。