去除第11天甲氨蝶呤方案预防同胞相合供体造血干细胞移植后急性移植物抗宿主病

目的:探讨去除第11天甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)急性移植物抗宿主病(acute graft-versus-host disease,a GVHD)预防方案在同胞相合供体异基因外周血造血干细胞移植(allogeneic peripheral blood stem cell transplantation,allo-PBSCT)中的疗效和安全性。方法 :回顾性分析2015年1月至2017年8月接受同胞相合alloPBSCT治疗的32例患者临床资料,GVHD预防方案为环孢素(Cs A)联合MTX 15 mg/m2第1天,10 mg/m2第3、第6天。结果:中位随访时间14(7,30)个月,32例患者移植后全部造血重建。可评估患者中性粒细胞和血小板中位植入时间分别为13(11,18)d和16.5(14,36)d。a GVHD总体发生率为40.6%,Ⅱ~Ⅳ度a GVHD为25.0%。慢性GVHD(c GVHD)总体发生率为48.3%,其中轻度13.8%,中度20.7%,重度17.2%。移植后30 d内口腔黏膜炎的发生率为40.6%,Ⅲ~Ⅳ度口腔黏膜炎的发生率为18.8%。相比采用标准MTX预防方案的研究结果 ,重度口腔黏膜炎发生率显著降低(P     

他克莫司对人肾小球系膜细胞增殖的影响

目的探讨他克莫司对体外培养的人肾小球系膜细胞增殖的影响及可能机制。方法采用四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测不同浓度的他克莫司处理后系膜细胞的增殖情况;用流式细胞仪检测不同浓度的他克莫司作用48、72h后系膜细胞细胞周期的改变;用流式细胞仪检测不同浓度的他克莫司作用72h后系膜细胞发生凋亡的情况。结果①浓度为1μmol/L的他克莫司对系膜细胞的增殖无明显抑制作用;作用24、48和72h后,浓度为5～20μmol/L的他克莫司能显著抑制系膜细胞的增殖;随着他克莫司浓度的增大,抑制作用更显著,呈一定的剂量—效应关系;随着他克莫司作用时间的延长,抑制作用更显著,呈一定的时间—效应关系。②5μmol/L的他克莫司作用48、72h,G0/G1期的系膜细胞百分比增高,S期的系膜细胞百分比降低,细胞周期阻滞于G0/G1期。③5μmol/L的他克莫司作用72h,对系膜细胞的凋亡无明显影响。结论他克莫司显著抑制体外培养的人肾小球系膜细胞增殖,且呈剂量和时间依赖性;其可能机制是使系膜细胞的细胞周期阻滞于G0/G1期。     

VEGF通过激活ERK/MAPK通路促进三阴性乳腺癌肿瘤干细胞的形成

目的 探讨血管内皮生长因子（VEGF）对三阴性乳腺癌肿瘤干细胞的调控作用并探索其作用机制。方法 通过Oncomine数据库、UALCAN数据库及Human Protein Atlas数据库分别验证VEGF在乳腺癌中的表达情况,分析VEGF表达与不同分子亚型的关系,利用在线数据库分析VEGF的表达情况与乳腺癌预后的关系。选取三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞,加入外源性hVEGF165通过体外微球形成实验观察体外成球能力,并利用Western blot、RT-qPCR等方法检测肿瘤干细胞相关标志物CD44、c-Myc、Nanog、ALDH1的表达以及相关通路的激活情况。结果 利用Oncomine、UALCAN、HPA数据库分析显示,VEGF在乳腺癌中表达较癌旁组织增高（P<0.0001）,其表达与分子亚型相关,三阴性乳腺癌中VEGF表达显著升高。Kaplan-Meier Plotter数据库分析结果提示高表达VEGF的乳腺癌患者预后更差,总生存期OS缩短,差异具有统计学意义（P<0.0001）。与VEGF低表达患者相比,VEGF高表达的乳腺癌患者无进展生存期、无远处转移生存期以及复发后生存期均显著缩短,差异具有统计学意义（P<0.0001）。体外实验发现加入外源性的hVEGF165后三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的成球能力显著增强,差异具有统计学意义（P=0.0029）。Western blotting、RT-qPCR结果表明乳腺癌MDA-MB-231微球体中VEGF/NRP-1及肿瘤干细胞相关标志物CD44、Nanog、c-Myc的表达量显著升高。加入外源性的hVEGF165促进了肿瘤干细胞相关标志物CD44、c-Myc、Nanog及ALDH1的表达,而CD24的表达量则显著下降,上述作用具有时间依赖性。Western blotting实验提示加入外源性的hVEGF165能够激活三阴性乳腺癌细胞ERK/MAPK通路。 结论 VEGF可能通过激活ERK/MAPK通路促进了三阴性乳腺癌肿瘤干细胞的形成。     

重组生长激素改善肾病综合征患者低蛋白血症的研究

目的观察基因重组生长激素(recombinanthumangrowthhormone,rhGH)对肾病综合征(nephro-ticsyndrom,NS)患者血清总蛋白、白蛋白、胰岛素样生长因子-1(insulin-likegrowthfactor-1,IGF-1)和胰岛素样生长因子结合蛋白-3(insulin-likegrowthfactorbindingprotein-3,IGFBP-3)的作用。方法原发性NS患者100例,随机分为2组,治疗组50例,在常规治疗的基础上加用rhGH治疗;对照组50例用常规治疗。以放射免疫法测血清IGF-1及IGFBP-3水平,S-丽春红测24h尿蛋白定量,全自动生化仪检测血清蛋白。结果①rhGH治疗2周后血清IGF-1、IGFBP-3和血清蛋白与对照组相比显著上升;②rhGH治疗组与NS对照组相比尿蛋白排出差异无统计学意义。结论短期小剂量使用外源性rhGH能在不增加尿蛋白排出的情况下提高NS患者血清蛋白水平,且安全可靠。     

血清降钙素水平在慢性泌尿系统感染定位诊断中的价值

目的:探讨降钙素原(PCT)对慢性上、下尿路感染的诊断价值。方法:回顾性分析临床确诊慢性肾盂肾炎(CPN)及慢性膀胱炎(CC)的患者血清PCT、全血白细胞(WBC)的变化,判断PCT与泌尿系感染之间的定位关系。PCT的测定采用金标(LUM Itest)法。结果:慢性肾盂肾炎患者组PCT值明显高于下尿路感染组,当血清PCT≥0.5μg/L时,预测肾脏受累的灵敏性和特异性分别为86%和91%,并且随着感染的加重而增加,随着治疗的好转而减少。结论:血清PCT水平的检测对鉴别慢性上、下尿路感染有一定的参考意义。     

肾上腺髓质素真核表达质粒的构建及其在大鼠近端肾小管上皮细胞中的表达

目的构建大鼠肾上腺髓质素(ADM)真核表达质粒,观察其在大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK-52E)中的表达。方法提取大鼠肾上腺组织总RNA,RT-PCR扩增ADM全长cDNA;将扩增产物连接于pMT-18T载体,双酶切及测序鉴定重组质粒。用限制性内切酶BamHⅠ/EcoRⅠ分别对pMT-18T-ADM和真核表达质粒pcDNA3.1双酶切;将目的基因定向克隆到pcDNA3.1载体上;对重组质粒进行双酶切鉴定。将重组质粒通过脂质体介导转染NRK-52E,RT-PCR检测ADM表达。结果特异扩增出ADM片段,大小为585 bp;片段成功插入pcDNA3.1载体中。RT-PCR方法证明NRK-52E中存在ADM高表达。结论成功构建大鼠ADM真核表达质粒,并将其成功转染NRK-52E。     

非瓣膜病心房颤动住院患者抗凝治疗现状及影响因素分析

目的:了解非瓣膜性心房颤动(房颤)患者接受指南推荐的抗凝剂应用状况及影响因素.方法:依据2006年ACC/AHA/ESC房颤抗凝管理指南将患者按照年龄,脑卒中危险因素分成亚组,统计临床抗凝剂应用情况. 结果:①在符合标准的220例房颤住院患者中,高危组患者占69.3%,所有房颤患者中仅20.9%的患者接受指南推荐的抗凝剂,其中高危组、中危组、低危组分别为15.7%、28.2%、36.3%.②对152例高危组房颤患者的非条件多因素logistic回归分析表明,年龄≥75岁(OR=7.12)、高血压(OR=12.44)、冠心病(OR=13.38)、临床医师的治疗决策(OR=7.11)、患者因素(OR=4.10)都是影响华法林使用的影响因素.结论:目前我国基层医院住院的非瓣膜病房颤患者多数未接受指南推荐的抗凝剂,尤其是房颤脑卒中高危患者.     

全反式维甲酸对高糖培养的人肾小球足细胞synaptopodin蛋白表达的影响

目的 探讨高糖培养的人肾小球足细胞synaptopodin蛋白表达的变化以及全反式维甲酸对其表达的干预效应.方法 以体外培养的条件性永生人肾小球足细胞为研究对象,平均分为正常糖(NG)组、高糖(HG)组、HG+5tmol/L全反式维甲酸干预组、HG+ 15 μmol/L全反式维甲酸干预组.蛋白质印迹法检测HG组足细胞培养0、3、6、9d时和其他各组足细胞培养9 dsynaptopodin蛋白的表达.结果 HG组足细胞培养3、6、9d时synaptopodin蛋白表达灰度值与培养0d时比较明显降低[(1.15±0.04)％、(0.78±0.04)％、(0.41±0.05)％比(1.49±0.07)％,P＜0.05].培养9d后,与NG组比较,HG组、HG+5μmol/L维甲酸干预组、HG+ 15 μmol/L维甲酸干预组足细胞synaptopodin蛋白表达灰度值均明显下降[(0.41±0.05)％、(0.86±0.04)％、(0.90±0.07)％比(1.47 ±0.08)％,均P＜0.05].结论 高糖可以使体外培养的足细胞synaptopodin蛋白表达下降,全反式维甲酸具有潜在的保护足细胞和防治糖尿病肾病的作用.     

大鼠肾脏缺血再灌注损伤中Intermedin及其受体表达的变化

目的 观察大鼠肾脏缺血/再灌注损伤(IRI)模型中,血管活性肽Intermedin(IMD)及其受体系统降钙素受体样受体(CRLR)、受体活性修饰蛋白(RAMPs)在肾组织表达的变化.方法 健康雄性Wistar大鼠16只随机分为假手术组和IRI组,双侧肾动脉夹闭45min、再灌注12h制备IRI模型.比色法测定血清肌酐(SCr)和尿素氮(BUN)的浓度;放射免疫分析法测定血浆、肾组织IMD及血浆肾上腺髓质素(ADM)的含量;半定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肾组织IMD、ADM、CRLR、RAMPs的mRNA表达.结果 与假手术组相比,IR1组大鼠SCr和BUN明显升高(P＜0.05);血浆和肾组织的IMD含量增加(分别升高了53.76%、36.85%),血浆ADM含量升高了143.22%(均P＜0.05);IRI组大鼠肾组织IMD、ADM、CRLR、RAMP1、2、3的mRNA表达较假手术组均上调(分别升高了22.1%、41.1%、32.8%、33.7%、35.9%、29.4%,均P＜0.05).结论 肾脏IRI过程中IMD及其受体系统表达增加,可能参与了肾脏IRI的病理生理过程.     

原发性肾病综合征肾小管功能异常与肾小管间质病理损害的相关性分析

目的：探讨原发性肾病综合征（NS）患者临床肾小管功能异常与肾小管间质病理损害的相关性。方法：回顾性分析2006年5月2008年9月确诊并行肾穿刺活检的原发性NS患者82例,观察肾小管间质病理改变,并进行半定量评分;同时测定患者肾小管功能损害指标——尿视黄醇结合蛋白（RBP）、尿α1微球蛋白（α1-MG）、N-乙酰-β-D-尿氨基葡萄糖苷酶（NAG）水平,观察肾小管功能异常与肾小管间质病理损害的相关性。结果：不同病理类型的原发性NS患者肾小管间质病理损害程度及尿RBP、α1-MG、NAG水平均不同（P〈0．05）;肾小管间质病理损害重的患者尿RBP、α1-MG、NAG明显增高（P〈0．05）。结论：原发性NS患者肾小管功能异常与肾小管间质病理损害密切相关,肾小管功能测定能在一定程度上评价患者肾小管间质病理损伤程度。