串联质谱技术在脂肪酸氧化代谢病诊断中的应用研究

目的探讨利用串联质谱技术检测干血滤纸片中酰基肉碱水平,诊断脂肪酸氧化代谢病。方法对象为2941例临床遗传性代谢病高危儿童,利用串联质谱技术检测患儿干血滤纸片中酰基肉碱水平,结合临床资料和常规生化结果,进行脂肪酸氧化代谢病诊断。结果诊断了14例脂肪酸氧化代谢病(0.5%),其中肉碱棕榈酰转移酶Ⅰ缺乏症1例,肉碱棕榈酰转移酶Ⅱ缺乏症1例,短链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症1例,中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症7例,极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症2例,多种酰基辅酶A脱氢酶缺乏症2例。结论通过串联质谱技术检测干血滤纸片中酰基肉碱水平,可对部分脂肪酸氧化代谢病进行诊断。     

1例糖原累积病患儿酸性-α-葡萄糖苷酶基因的新无义突变p.W738X

目的 探讨1例临床疑似糖原累积病Ⅱ型患儿的临床特点和酸性-α-葡萄糖苷酶(GAA)基因突变情况.方法 分析患儿病史,并检测患儿及其父母外周血白细胞酸性-α-葡萄糖苷酶活性,聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增GAA编码区,直接测序分析GAA基因突变情况.结果 该患儿生后2个月即出现喂养困难和全身肌无力,4个月发现心脏增大,6个月时死于心肺功能衰竭.患儿白细胞酸性-α-葡萄糖苷酶活性明显降低,仅为正常对照中位数的17.3%.DNA测序分析显示患儿携带一个新无义突变p.W738X和一个已报道的p.E888X突变.患儿及其母亲均携带假性缺陷等位基因c.1726G ＞ A;2065G ＞ A.结论 GAA酶活性测定结合基因诊断明确诊断1例临床疑似糖原累积病(GSD)Ⅱ型,发现1个GAA基因新无义突变p.W738X.根据患儿临床表现可诊断为婴儿型GSD Ⅱ,推测p.W738X突变对GAA酶活性影响严重.由于假性缺陷等位基因c.1726G ＞ A;2065G ＞ A可引起正常人GAA酶活性降低,故GAA基因突变分析对明确GSDⅡ型患者的诊断及其家系的产前诊断有重要意义.     

串联质谱分析干血滤纸片中酰基肉碱质控

目的：串联质谱技术是近几年应用于临床检验的新技术,具有特异性强、灵敏度高,一次试验可检测数十种物质的优点。本文通过对近4年的质控结果进行分析,探讨影响检测结果的因素及应对措施。方法：美国CDC每年提供4批酰基肉碱质控干血滤纸片,酰基肉碱检测方法为取直径为3mm的质控干血滤纸片放入96孔聚丙烯板,经含酰基肉碱内标的甲醇萃取,盐酸正丁醇衍生后,进行串联质谱检测。分析本实验室质控结果与美国CDC检测结果的偏差及其他实验室质控结果（169个实验室的均值）与美国CDC检测结果的偏差之间的差异。结果：本实验室每次质控结果所有酰基肉碱均在美国CDC检测结果95％可信区间内,且每一批结果的临床评价与美国CDC质控临床评价完全一致。本实验室质控结果与美国CDC检测结果的偏差与其他实验室质控结果与美国CDC检测结果的偏差比较,无显著差异,丙酰基肉碱差异显著（Z=-2．638,P〈0．005）,戊二酰基肉碱差异亦显著（Z=-2．482,P〈0．005）。结论：本实验室酰基肉碱质控结果,达到美国CDC的质控要求,丙酰基肉碱检测值偏高,其阳性判断切割值设定也相应增高,而戊二酰基肉碱检测值偏低,其阳性判断切割值设定也相应降低。     

52例急性主动脉夹层术前监护体会

目的总结急性主动脉夹层入院后监护治疗经验,以提高早期监护质量,为患者顺利接受手术治疗提供必要条件。方法患者入院后采取紧急措施包括：①有效镇痛、充分镇静;②控制血压和心率,延缓夹层进一步发展;③严格控制活动量;④严密观察生命体征,正确进行病情判断和处理;⑤实施健康教育。结果本组患者入院后配合治疗,心率、血压控制良好。1例在术前麻醉过程中因夹层破裂死亡,其余51例均顺利接受手术治疗。术后痊愈出院47例,死亡5例（8%）,死亡患者均为急性A型夹层,死亡原因分别为夹层破裂、心衰、急性肾功能衰竭和吻合口出血。结论个体化止痛、镇静治疗;密切观察并及时、有效的控制血压、心率等生命体征变化;及时处理相关并发症,可使患者平稳渡过早期危险期,平稳接受手术治疗。     

ICU护士对心脏手术患者及家属实施术前宣教的效果观察

目的:探讨ICU护士对心脏手术患者及家属实施术前宣教的效果。方法:将2012年6~12月在我科二病区行心脏手术的100例患者分为对照组,给予常规术前宣教;将同期在我科三病区行心脏手术的100例患者分为研究组,在常规术前宣教的基础上由ICU护士给予系统术前宣教。比较两组治疗依从性、角色行为、治疗效果、对护理工作满意度等。结果:两组依从性、角色行为、治疗效果及满意度等方面比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论:由ICU护士进行系统术前宣教能有效促进心脏术后患者康复,提高患者及家属依从性、对护士工作的满意度,有利于充分体现护士自身价值,提高ICU病区管理质量。     

12例多种羧化酶缺乏症的基因突变分析

目的 旨在从基因水平证实多种羧化酶缺乏症(multiple carboxylase deficiency,MCD)的诊断,探讨我国MCD患儿的基因突变情况.方法 12例MCD患儿接受基因诊断.采用PCR及直接测序法分别对4例生物素酶(biotinidase,BT)缺乏症和8例全羧化酶合成酶(holocarboxylase synthetas,HLCS)缺乏症进行BT基因和HLCS基因突变分析,对基因新突变通过限制性片段长度多态性分析及患儿父母和50名正常对照者基因检测以证实.结果 12例患儿基因突变检出率100%.4例BT缺乏症中发现BT基因突变6种:c.98-104del7ins3,c.1369G>A(V457M),c.1157G>A(W386X),c.1284C>A(Y428X),c.1384delA,c.1493_1494insT,后4种为新突变.8例HLCS缺乏症中发现HLCS基因突变4种:c.126G>T(E42D),c.1994G>C(R665P),c.1088T>A(V363D),c.1522C>T(R508W),后两种为热点突变[75%(12/16)],c.1994G>C为新突变.结论 本研究从基因水平上证实了12例MCD的诊断.共发现了6种BT基因突变,4种HLCS基因突变,其中5种为新突变;得出2种HLCS基因的热点突变.     

红细胞二氢蝶啶还原酶活性测定方法的建立和应用

目的建立红细胞二氢蝶啶还原酶(DHPR)活性测定方法,对高苯丙氨酸血症(HPA)者进行DHPR缺乏型四氢生物蝶呤(BH4)缺乏症筛查。方法采用UV-2450型双光束分光光度仪、1 mmol/L细胞色素C及20 mmol/L 6-甲基四氢蝶呤等试剂测定外周干滤纸血片中DHPR活性。结果DHPR活性与年龄无关,该实验室儿童DHPR活性参考值为(2.2±0.7)nmol/(m in.5 mmd isc)[(1.02~3.35)nmol/(m in.5 mmd isc)];实验批内变异系数(CV)为9.1%,批间CV为11.5%,实验最好在37℃恒温下进行;30例HPA患儿DHPR活性测定结果为(2.4±0.8)nmol/(m in.5 mmd isc),未发现DHPR缺乏者。结论干滤纸血片中红细胞DHPR活性测定是DHPR缺乏症有效、可靠且易行的诊断方法。     

心脏手术后监护期临床路径标准化诊疗护理项目的确立

目的探讨患心脏手术后监护期临床路径标准化诊疗护理项目的确立。方法选择在我院行非体外循环冠状动脉搭桥术(Off-pump Coronary Artery Bypass Grafting,OPCAB)患72例,根据心外科重症监护室(ICU)管理的现状设计临床路径表,确立临床诊疗的护理项目,并使用随机数据法选取30％病例为研究样本,对医嘱信息进行医嘱项目整理和医嘱项目频数统计;对非医嘱类项目则在相关规定基础上,结合临床实际调查与一临床专家咨询来确定。结果通过现有病例调查和临床专家调查,入选的项目基本涵盖了全部常规医嘱内容。结论根据一临床路径确立标准化诊疗护理项目,有助于提高对监护患的服务质量,减少术后并发症,缩短患在ICU的时间,有利于促进患的康复。