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检测水产品食物中副溶血弧菌基因分型方法的建立 总被引:1,自引:1,他引:0
目的建立副溶血弧菌的基因分型技术,应用于广州市水产品食物中毒居前列的致病菌——副溶血弧菌的检测,寻找一种简便快速准确的检验方法。方法分析副溶血性弧菌分离株的16S-23S rDNA IGS的相关信息(电泳图谱、序列分析等),找出合适的16S-23S rDNA IGS作为基因分型依据,建立副溶血性弧菌的基因分型技术。结果通过克隆和测序,分析了副溶血性弧菌的16S-23S rDNA IGS片段,初步确定了以16S-23S rDNA IGS为分子标记的副溶血性弧菌基因分型技术。结论本检测方法不但快速、灵敏,还对深入了解副溶血性弧菌的发病机制,研究其分子流行病学特征具有重要的意义。 相似文献
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目的尝试从慢性乙型肝炎患者外周血扩增培养出大量树突细胞,为进一步临床应用树突细胞治疗慢性乙型肝炎提供物质基础.方法分别取健康人和患者外周血分离培养单核细胞,加入rhGM-CSF、rhIL-4,经7天培养后收获即为不完全成熟树突细胞(DC).以倒置显微镜观察摄影、透射电镜摄影、流式细胞仪测定表面特异性分子的表达、混合淋巴细胞反应测定功能,对DC进行鉴定.结果第七天记数有明显树突状突起的大个细胞或细胞团,产率为0.2~4.5×105/6ml血;透射电镜可见细胞表面伸展的突起;70%以上细胞有DC特异性标志CD1a高表达,而单核细胞特异性标志CD14表达小于4%;能刺激同种异体淋巴细胞强烈增殖,随刺激细胞数目的增加,其促增殖作用增强,P<0.01.结论在本实验条件下,从慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞可诱导扩增出大量DC. 相似文献
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目的:了解分泌肽序列在HepG2细胞中对人内皮抑素基因(hEndostatin)的cDNA表达和分泌差异的影响。方法:构建不含hIL-2分泌肽序列的真核表达载体pBlast-hEndo质粒, 转染人的HepG2细胞株, 用RT-PCR的方法检测HepG2(pBlast-hIL2-hEndo), HepG2(pBlast-hEndo), HepG2(pBlast-Mcs)和HepG2中hEndostatin的mRNA表达水平, 及制备4种细胞的总蛋白和收集各自的培养上清, 进行Westernblot分析蛋白表达和分泌的差异。结果:发现HepG2(pBlast-hIL2-hEndo)中hEndostatin的mRNA的水平显著高于HepG2(pBlast-hEndo)。而仅在HepG2(pBlast-hIL-2-hEndo)的细胞总蛋白和上清, 及HepG2(pBlast-hEndo)的细胞总蛋白中检测到hEndostatin表达, 在其它各株细胞总蛋白及上清中, 未检测到hEndostatin。结论:hIL-2分泌肽序列能促进hEndostatin基因在HepG2细胞中表达及分泌。 相似文献
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急性淋巴细胞性白血病微小残留病与中枢神经系统白血病的相关分析 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨急性淋巴细胞性白血病(简称急淋)缓解时和缓解期微小残留病(MRD)的水平和变化以及与发生中枢神经系统白血病(CNSL)的关系。方法 用改良一步煮沸法提取脑脊液DNA,酚/氯方法提取骨髓DNA,巢式聚合酶链反应(PCR)法和极限稀释定量PCR法追踪检测微小残留病,数据处理用Kaplan-Meier方法及COX回归模型等。结果 46例急淋患儿缓解时骨髓MRD定量值与中枢神经系统白血病的发生呈正相关(COX回归模型,γ=0.3496,P<0.05),脑脊液MRD阳性可预示发生CNSL的相对危险度(P<0.05);缓解期脑脊液MRD持续阳性或由阴性转为阳性,发生中枢神经系统白血病的相对危险度明显增高(P<0.05)。结论 缓解时骨髓MRD定量值和脑脊液MRD定性结果以及缓解期间脑脊液MRD的变化可以预示CNSL的危险度,MRD检测对判断急性淋巴细胞性白血病的预后和指导治疗有重要意义。 相似文献
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HBV转录后调节元件结合蛋白克隆筛选和分析 总被引:1,自引:1,他引:0
转录后调节是基因表达调控的重要环节之一。乙型肝炎病毒表面抗原S基因下游 3′端含有一个转录后调节元件(PosttranscriptionalRegulatoryElement,PRE)。该PRE在S基因转录产物从细胞核向细胞浆转运的过程中起着重要的作用。已经清楚有两个细胞核蛋白与PRE结合 ,相对分子质量 (Mr)分别为 45× 10 3 和 30× 10 3 ,统称为PRE相互作用蛋白 (PRE interactingprotein ,PIP)。其中一个已鉴定为甘油醛 3 磷酸脱氢酶基金项目 :国家自然科学基金资助项目( 3 9670 65 3… 相似文献
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呼吸道合胞病毒是婴幼儿支气管炎和肺炎最常见的病原之一。应用逆转录-聚合酶链式反应对检测RSV的方法进行了研究。采用的引物特异性扩增RSV F糖蛋白F1亚基的一个片段,计算机检索与其它常见呼吸道病毒无同源性。敏感性测定显示该方法RSV最低量为10TCID50S。这些结果表明RT-PCR可作为快速诊断RS的有效方法,在临床上推广应用。 相似文献
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目的:总结急性淋巴细胞白血病(急淋)患儿脑脊液中微小残留病(minimal residual dis-ease,MRD)的变化及其临床意义。方法:确诊为急淋患儿18例,采用一步煮沸法提取脑脊液白细胞DNA,采用常规酚-氯仿抽提法提取骨髓DNA。追踪并采用改良的极限稀释法定量检测MRD值。分析初治病例在骨髓诱导达到缓解时脑脊液MRD值与预后的关系。结果:诱导缓解的18例中,9例脑脊液MRD阳性,9例阴性。经随访MRD阳性者,有5例发生中枢神经系统白血病(central nervous system leukemia,CNSL);而阴性者无l例发生CNSL。结论:急淋完全缓解时,脑脊液MRD高水平者发生CNSL的危险性较高,故追踪检测脑脊液MRD对临床CNSL的预防、治疗有一定的指导意义。 相似文献
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外周血甲胎蛋白mRNA和白蛋白mRNA在评估肝癌微小转移中的比较研究 总被引:2,自引:1,他引:2
目的 探讨肝病患者外周血甲胎蛋白mRNA(AFPmRNA)和白蛋白mRNA(ALBmRNA) ,作为肝癌微小转移标志物的特异性。方法 提取患者和健康志愿者的外周血单个核细胞总RNA ,进行RT PCR ,扩增产物再进行Southern杂交。结果 原发性肝癌 (HCC)组外周血AFPmRNA的检出率为 4 1.4 % ,对照组为 0 % ,差异显著 (P <0 .0 5 ) ;HCC组外周血ALBmRNA的检出率为4 4 .8% ,对照组为 2 9.2 % ,二者差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论 作为肝癌微小转移的标志物 ,外周血AFPmRNA的特异性高于ALBmRNA 相似文献
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慢性乙型肝炎患者外周血树突细胞CD40、CD80表达和免疫活性的体外研究 总被引:5,自引:1,他引:5
目的 :探讨慢性乙型肝炎患者DC表面协同刺激分子CD4 0和CD80表达与其抗原呈递功能的关系 ,为进一步研究慢性乙型肝炎的发病机制及治疗提供新的思路。方法 :分离培养慢性乙型肝炎患者和健康人外周血DC ,流式细胞仪测定DC表面CD4 0和CD80的表达 ,混合淋巴细胞反应测定两组DC的功能。结果 :慢性乙型肝炎患者DC表面CD4 0和CD80的表达较健康人低 ,刺激同种异种T细胞增殖反应也较健康人低。结论 :乙肝病毒感染可通过抑制患者DC表面CD4 0、CD80等协同刺激分子的表达 ,从而使其抗原呈递功能降低 相似文献
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目的:明确外科手术对HBsAg阳性肝癌患者乙型肝炎病毒(HBV)复制的影响。方法:以常规聚合酶链反应(PCR)方法检测了20例HBV血清学标志阳性肝癌患者血清中的HBVDNA;应用荧光能量转移定量聚合酶链反应(QPCR)测定肝癌手术切除前后病人血清中HBVDNA量的变化情况。结果:在部分肝癌病人(40%)血清中可以检测到HBVDNA;外科手术后较手术前病人血清HBVDNA拷贝数增高(P<0.01)。结论:乙型肝炎病毒仍然在大部分肝癌病人体内进行着活跃的复制;外科干预在部分病人中引起病毒复制增加。 相似文献