弥漫大 B 细胞淋巴瘤患者 Th17细胞及相关细胞因子水平与预后的关系

目的：探讨弥漫大B细胞淋巴瘤（ DLBCL）患者Th17细胞及相关细胞因子水平与预后的关系及其意义。方法将60例DLBCL患者按照国际预后指数（IPI）评分分为低中危组32例和中高危组28例,另选健康者30例作为对照组。采用流式细胞术检测各组外周血中Th17细胞比例,ELISA检测外周血相关细胞因子白细胞介素（ IL）－17、IL－21、IL－23、转化生长因子－β（ TGF－β）的表达水平,分别比较各组之间Th17细胞及相关细胞因子水平的差异,并分析其与IPI评分的相关性;分析随访的54例患者Th17细胞水平与生存率的关系。结果（1）中高危组Th17细胞、IL－17、IL－21均低于对照组和低中危组,IL－23低于对照组,TGF－β高于对照组和低中危组,差异均有统计学意义（P＜0．05）。（2）DLBCL患者Th17细胞、IL－17、IL－21与IPI评分呈负相关,TGF－β与IPI评分呈正相关,相关性有统计学意义（P＜0．05）。（3）高Th17细胞者和低Th17细胞者3年生存率分别为82．1％和45．0％,Th17细胞水平对DLBCL患者生存的影响有统计学意义（P＝0．021）。结论 DLBCL患者Th17细胞及相关细胞因子水平与IPI评分密切相关,Th17细胞与IPI评分呈负相关。 Th17细胞对预后有影响,可能在DLBCL的发生发展中起着抑制作用。     

血红蛋白异常对高效液相色谱法检测糖化血红蛋白的影响

目的探讨血红蛋白（Hb）异常对高效液相色法谱检测糖化血红蛋白（HbA1c）的影响。方法使用国内常用的硼酸盐亲和层析高效液相色谱法（PDQ系统）及离子交换层析高效液相色谱法（D-10系统）进行含有不同（梯度）浓度HbF与正常人血液混合的标本的干扰实验及检测40例Hb异常的临床标本中的HbA1c。结果在干扰实验中,D-10系统在HbF在浓度超过40%时,可能无法获得检测结果,当HbF浓度在10%～40%时,结果高于实际值,HbF在浓度低于10%时,结果与实际值相似;PDQ系统在HbF浓度超过40%时,结果可能略低于实际值,HbF浓度低于40%时,可以获得好的结果。在40例Hb异常的临床标本中,D-10系统检测结果明显高于PDQ系统,差异具有统计学意义（P〈0.05）,其中有5例Hb异常总量超过35%的标本在D-10系统中无法获得检测结果,而PDQ检测获得可接受的结果;Hb异常总量低于10%时,两种方法检测结果有较好的一致性（P〉0.05）。结论硼酸盐亲和层析抗Hb异常的干扰能力优于离子交换层析。     

骨髓非清除性造血干细胞移植后供者干细胞输注治疗非肿瘤性血液病的探讨

目的探讨非清髓性移植(NST)治疗移植排斥高风险的非肿瘤性血液病的植入效果、并发症。方法对2例重型再障(SAA)和1例重型β-地中海贫血(TM)患者实施NST。2例SAA患者采用G-CSF动员的骨髓联合外周血移植,预处理方案:抗淋巴细胞球蛋白联合减低剂量的环磷酰胺;TM患者实施外周血干细胞移植,预处理方案:抗胸腺细胞球蛋白、氟达拉滨联合减低剂量的马利兰。移植物抗宿主病(GVHD)预防:环孢素A联合甲基强的松龙;于+78d、+99d和+44d行供者干细胞输注(DSI)。结果移植后均形成混合性嵌合体,3例白细胞最低值:0.26×109/L、0.50×109/L、1.26×109/L;中性粒细胞绝对值>0.5×109/L和P lt>20×109/L的时间分别为+12d、+3d、0d和+1d、+5d、0d;3例经过DSI,造血和嵌合体有改善。均无感染、GVHD发生。结论NST后行DSI治疗排斥高风险非肿瘤性血液病,可以获得造血干细胞成功植入,减少并发症。     

B族溶血性链球菌孕期感染分离株的耐药基因检测

目的了解孕期感染的B族溶血性链球菌（GroupBStreptococci,GBS）的耐药基因谱与耐药的关系。方法采用聚合酶链反应（PCR）方法对分离自孕期感染的92株GBS进行多种红霉素耐药基因的检测;采用K—B法、D试验法方法检测多种抗菌药物及克林霉素诱导型（MLSA）耐药表型。结果孕期感染的GBS未发现对青霉素、氨苄青霉素、替考拉宁、万古霉素耐药菌株,但青霉素、氨苄青霉素的中介率较高,分别是29．7％、26．2％;红霉素、克林霉素耐药率分别为52．2％、50．8％。耐药表型以结构型耐药（红霉素耐药、克林霉素耐药,cMLSa）为主,红霉素耐药基因以ermB为主,未发现ermC、ermM、ermTR基因。结论孕期感染的GBS对红霉素耐药的重要基因是ermB基因。对青霉素、氨苄青霉素仍可作为预防和治疗孕期感染的首选药物;对青霉素过敏的患者,红霉素和克林霉素作为预防和治疗孕期GBS感染的药物应用价值应给予重新评价。     

两种方法检测血红蛋白H百分比一致性比较

目的比较高效液相色谱方法(HPLC)和醋酸纤维素薄膜碱性电泳(CAFE)方法对血红蛋白(Hb)H定量的一致性。方法采用HPLC和CAFE对广州市第一人民医院已行基因确诊的50例缺失型Hb H病患者标本进行检测,详细记录和分析其相关血液学指标。结果缺失型HbH病患者经HPLC检测可出现特异HbH异常峰,出峰时间为(0.42±0.05)s,CAFE可得到特异的HbH带。两种方法得到的HbH百分比经配对t检验差异无统计学意义(P0.05)。结论 HPLC是一种高效快速检测HbH的方法,是能满足临床快速检测缺失型HbH病的有效手段。     

化疗诱发异基因造血干细胞移植后急性T淋巴细胞白血病复发患者移植物抗宿主病及其Th17／Treg细胞动态观察

 【摘要】　目的　探讨化疗诱发异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后急性T淋巴细胞白血病（T-ALL）髓外复发患者发生移植物抗宿主病（GVHD）的临床特征及Th17／Treg细胞及相关细胞因子的动态变化。方法　以20名健康体检者为健康对照。1例诊断为T-ALL患者在2个疗程化疗后血液学完全缓解时,行同胞供者HLA配型全相合的allo-HSCT。移植后对患者进行随访,同时采用流式细胞术和酶联免疫吸附法（ELISA）检测患者在供者细胞植入状态、疾病复发、GVHD各个时期外周血Th17／Treg细胞及相关因子的动态变化。结果　患者+27天获得完全供者嵌合体（FDC）,+34天造血功能完全恢复,+110天出现慢性GVHD（cGVHD）,+264天在cGVHD状态下髓外复发,Hyper-CVAD方案化疗后,+347天相继出现表现为口腔溃疡的cGVHD及伴有Ⅳ度肠道GVHD的重叠综合征。患者外周血中Th17细胞占CD+4 T细胞比例在发生重叠综合征时（1.70 %）较健康对照组[（0.56±0.35）%]有所增高,Treg细胞占CD+4 T细胞的比例在患者发生cGVHD时（4.66 %）较健康对照组[（0.59±0.33）%]及患者复发时（0.39 %）、造血干细胞植入时（1.15 %）高,发生重叠综合征时升高更加明显（7.83 %）,同时在复发时Th17／Treg比例＞1,而发生GVHD时Th17／Treg比例＜1。血清中白细胞介素-17A 在患者发生cGVHD时（6.11 pg／ml）及化疗后诱导重叠综合征时（6.81 pg／ml）均较健康对照组[（5.19±0.77）pg／ml]有所增高,TGF-β1浓度在患者移植后不同时期均较健康对照[（48.81±4.90）ng／ml]高。结论　化疗可诱发allo-HSCT术后复发的急性白血病患者发生GVHD;Th17／Treg细胞及相关细胞因子的失衡可能与疾病复发、GVHD的发生相关。     

B族链球菌皮肤软组织及创伤感染分离株的耐药基因检测

目的了解皮肤软组织及创伤感染的B族链球菌(GBS)的耐药性及耐药基因存在的特点。方法采用聚合酶链反应(PCR)方法对分离自皮肤软组织及创伤感染的132株GBS进行红霉素及四环素等11种耐药基因的检测;药物敏感试验及克林霉素诱导型(MLSB)耐药表型采用琼脂纸片扩散(K-B)法、D-试验法检测。结果皮肤软组织及创伤感染的GBS红霉素耐药基因以ermB为主,占25.0%,ermA、ermC、ermM、ermTR、mefA、mefE基因的阳性率分别为3.8%、8.3%、1.5%、9.0%、32.6%、38.6%;同时含2种或2种以上erm基因阳性的GBS占22.5%;耐药表型以结构型耐药(红霉素耐药、克林霉素耐药,cMLSB)为主(31株,占红霉素耐药GBS的50.0%);四环素耐药基因tetM、tetO、tetK、tetL阳性率分别为64.0%、47.2%、13.2%、40.0%;未发现对青霉素、氨苄青霉素、替考拉宁、万古霉素、利奈唑胺、奎诺普汀/达福普汀耐药菌株,但青霉素、氨苄青霉素的中介率分别是11.2%、6.8%;红霉素、克林霉素、四环素耐药率分别为47.0%、46.2%、86.4%。结论 ermB基因是皮肤软组织及创伤感染的GBS对红霉素耐药的重要基因,检出国内少见报道的ermC、ermM、ermTR基因。青霉素、氨苄青霉素仍可作为治疗皮肤GBS感染的首选药物;对于过敏体质的患者,红霉素和克林霉素作为预防和治疗皮肤GBS感染的药物应用价值应给予重新评价。     

骨肉瘤中p53、p21WAF1、cyclinA蛋白的表达及其意义

目的探讨骨肉瘤中p53、p21WAF1、cyclinA蛋白的表达及相互关系.方法应用免疫组化方法对骨肉瘤组织及正常软组织中p53、p21WAF1、cyclinA的蛋白表达进行检测.结果正常软组织中p53表达均阴性,28%(14/50)骨肉瘤中可检测到p53蛋白的异常积累;正常软组织中均有不同程度的p21WAF1蛋白的阳性表达,52%(26/50)骨肉瘤p21WAF1阴性,骨肉瘤中p21WAF1的蛋白表达表现为p53蛋白依赖性的方式;正常组织中cyclinA为阴性,75.6%(28/37)骨肉瘤中存在cyclinA蛋白过表达,cyclinA与p21WAF1的表达呈负相关(r=-0.874,P＜0.01);p21WAF1蛋白的表达与骨肉瘤的分化呈正相关(r=0.687,P＜0.01).结论p53蛋白的异常积聚、p21WAA1的失表达及cyclinA的过表达参与了骨肉瘤失控的增生及肿瘤的形成.     

变应性鼻炎红细胞免疫功能的实验观察

目的探讨红细胞免疫系统功能异常与变应性鼻炎的发病关系。方法用橄榄油将甲苯-2,4-二异氰酸酯配成浓度为10％溶液作为致敏剂,滴鼻,建立豚鼠变应性鼻炎动物模型8只,另8只正常豚鼠作对照。致敏结束、模型成功后取血,测定红细胞C3b受体花环率和红细胞IC花环率。结果模型组的红细胞C3b受体花环率和红细胞IC花环率均低于对照组（P〈0．05）。结论红细胞免疫系统功能异常与变应性鼻炎的发病、发展有关。     

辛夷对实验性变应性鼻炎红细胞免疫功能的影响

目的探讨辛夷对变应性鼻炎（AR）的治疗作用和对红细胞免疫功能的影响。方法8只为正常豚鼠不做模型,用单纯橄榄油滴鼻作对照（对照组1）。用橄榄油将甲苯-2,4-二异氰酸酯配成浓度为10％溶液作为致敏剂,滴鼻,建立豚鼠变应性鼻炎动物模型16只,其中8只以后用生理盐水滴鼻做对照（对照组2）,8只用0．5％生理盐水辛夷挥发油滴鼻（辛夷组）。致敏结束、模型成功后取血,测定红细胞C3b受体花环率和红细胞IC花环率。结果①对照组2红细胞C3b受体花环率和IC花环率低于对照组1（P〈0．05）,显示AR状态下红细胞的免疫功能降低。②辛夷治疗组的红细胞C3b受体花环率和IC花环率高于对照组2（P〈0.05）,表明辛夷治疗AR后可以提高红细胞的免疫功能。③辛夷治疗组的红细胞C3b受体花环率和IC花环率与对照组1相当（P〉0.05）,表明辛夷治疗后,红细胞免疫功能可恢复到正常水平。结论辛夷可改善红细胞免疫功能,用于治疗变应性鼻炎。