多囊卵巢综合征患者血清外泌体中miR-184的表达水平及其对卵巢颗粒细胞增殖的影响

目的研究多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清外泌体中miR-184的表达水平及其对卵巢细胞颗粒增殖的影响。方法回顾性选取2018年2月至2020年4月期间盘锦辽油宝石花医院收治的60例PCOS患者作为PCOS组,另纳入同期30名健康成年女性作为对照组,提取2组受试者血清外泌体。应用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测2组受试者血清外泌体中及人卵巢颗粒细胞KGN和人正常卵巢上皮细胞IOSE80中的miR-184的相对表达。转染miR-184抑制剂的KGN细胞设为miR-184抑制剂组,转染抑制剂对照物的KGN细胞设为对照组,不做任何处理的KGN细胞设为空白组。应用MTT法检测各组KGN细胞的增殖情况,应用平板克隆实验检测各组KGN细胞的克隆形成率。结果PCOS患者血清外泌体中和KGN细胞中的miR-184的相对表达量为4.23±0.49、5.81±0.73,显著高于对照组(1.32±0.21)和IOSE80组细胞(1.19±0.15),差异有统计学意义(P<0.05)。miR-184抑制剂组KGN细胞在24、48、72、96 h的吸光度值分别为0.20±0.05、0.22±0.07、0.26±0.08、0.29±0.07,均显著低于阴性对照组(0.31±0.09、0.52±0.11、0.78±0.12、0.96±0.18)和空白对照组(0.31±0.08、0.53±0.10、0.77±0.14、0.94±0.18),克隆形成率(26.78±5.98)%显著低于阴性对照组[(45.98±4.12)%]和空白对照组[(43.56±4.34)%],差异有统计学意义(P<0.05)。结论PCOS患者血清外泌体和人卵巢颗粒细胞KGN中miR-184呈现高表达,PCOS的发病可能与miR-184促进卵巢颗粒细胞增殖有关。     

重组汉坦病毒核蛋白的原核表达及纯化

目的 原核表达重组汉滩型病毒(Hantaan virus,HTNV)核蛋白(recombinant HTNV nuclearprotein,rHTNNP)和重组汉城型病毒(Seoul virus,SEOV)核蛋白(recombinant SEOV nuclear protein,rSEONP),并进行纯化.方法 从HTNV PS-6株和SEOV L-99株灭活病毒液中提取总RNA,依据病毒S片段多变区基因序列两端保守序列设计引物,用逆转录PCR法扩增此S基因片段,构建原核表达质粒pET-Trx-his-HTNNP和pET-Trx-his-SEONP,并在大肠埃希菌中诱导表达.表达产物经凝胶电泳初步鉴定和镍柱亲和层析纯化后,用双向免疫扩散试验检测其抗原特异性.结果 重组表达质粒经菌落PCR分析和测序证明构建正确.表达的rHTNNP和rSEONP相对分子质量约为26 000,表达量分别约占菌体总蛋白的30％和20％,主要以可溶性形式表达,且纯度可达约70％.双向免疫扩散试验证实,这2种重组蛋白具有较好的抗原性.结论 成功构建了表达rHTNNP和rSEONP的原核表达质粒,并获得了较高纯度的rHTNNP和rSEONP,为汉坦病毒型别鉴定试剂盒的开发奠定了基础.     

60例糖尿病孕妇血糖检验结果分析

目的探讨葡萄糖耐量试验(OGTT)在妊娠糖尿病中的诊断价值。方法选取2011年2月—2013年2月间在该院检测出并治疗的患有妊娠期糖尿病的患者60例,对比孕妇血糖进行OGTT实验,对比经过饮食控制、运动以及胰岛素治疗后孕妇血糖的改变。结果经过对妊娠期糖尿病患者中度、重度联合运动治疗,10例重度患者增加胰岛素治疗,所有患者均有效地控制了血糖水平并安全分娩。结论对于患病孕妇进行运动、饮食控制和胰岛素治疗能够有效控制妊娠期糖尿病患者的血糖浓度。     

基于盘锦地区259例孕妇MTHFR基因多态性与不良妊娠结局相关性分析

目的：分析盘锦地区妊娠期孕妇MTHFR基因多态性与不良妊娠结局的相关性。方法：选取2018年10月-2020年10月于本院就诊的既往有不良妊娠结局史孕妇124例为观察组,无不良妊娠结局史孕妇135例为对照组。行Hardy-weinberg平衡检验验证两组标本的群体代表性和可靠性,检测两组MTHFR基因基因型,比较组间基因型频率、等位基因频率和联合基因型频率。结果：Hardy-weinberg平衡检验表明收集的人群样本基因型频率分布达到遗传平衡,为同一孟德尔群体结果。观察组C677T位点TT频率(32.3%)高于对照组(13.3%),A1298C位点CC频率(12.1%)高于对照组(2.2%);观察组C677T等位基因T位点频率(51.6%)高于对照组(30.4%),A1298C等位基因C位点频率(28.2%)高于对照组(16.3%);观察组携带CC/CC、CT/CC、TT/AA和TT/AC联合基因型频率均高于对照组(均P<0.05)。结论：MTHFR基因多态性与不良妊娠发生有一定相关性,在备孕人群中筛查MTHFR基因多态性并早期干预,对降低不良妊娠、预防出生缺陷具有十分重要意义。