188株血液培养阳性病人病原菌分布及耐药分析

目的 研究2016年上半年入该院血液培养阳性病人病原菌分布和耐药情况,为临床用药提供科学依据.方法 收集2016年1月1日-2016年6月30日入院病人血培养,阳性者进行细菌培养和鉴定,用Whonet5.6软件耐药情况分析.结果2016上半年总共有1 760例病人做血液培养,188例培养阳性,阳性率是10.68%,革兰阴性杆菌102株,占54.26%,大肠埃希菌(57株)、鲍曼不动杆菌(8株)和铜绿假单胞菌(8株);革兰阳性球菌74株,占39.36%,表皮葡萄球菌(23株)、金黄色葡萄球菌(20株)和粪肠球菌(12株);真菌12株,占6.38%.大肠埃希菌对美平和亚胺培南耐药率为0.表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌对糖肽类抗生素(万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺)的耐药率均为0,未发现耐万古霉素的葡萄球菌.结论 2016上半年该院血培养阳性最多的菌株是大肠埃希菌,对血培养阳性结果进行细菌培养和药敏鉴定,为临床诊断治疗用药提供科学依据.     

血清降钙素原在社区获得性肺炎患者诊疗中的临床意义

<正>社区获得性肺炎(community-acquired pneumonia,CAP)是指在医院外罹患的感染性肺实质炎症,包括具有明确潜伏期的病原体感染而在入院后潜伏期内发病的肺炎[1]。CAP是威胁人类健康的常见感染性疾病之一。对于住院的CAP患者,目前的指南要求在应用抗生素治疗之前应采集两套血培养[2]。由于对CAP病人进行常规的血培养检测的阳性率很低[3],且往往耗时较长。临床医生很难根     

嗜麦芽寡养单胞菌D2株Ⅱ型分泌系统F和E基因序列测定

目的克隆并测定嗜麦芽寡养单胞菌D2株Ⅱ型分泌系统部分编码基因GspF和Gsp E的完整基因序列。方法分别根据已获得的嗜麦芽寡养单胞菌D2株部分序列,以及GenBank收录的K279a和R551株的序列依次设计3组引物,移步法PCR扩增GspF和E基因,产物纯化后连接pMD18T载体,经EcoRⅠ和HindⅢ双酶切鉴定后进行测序分析,将获得各PCR片段进行拼接,最终获得GspF和E基因的完整编码基因,并在GenBank中进行对比分析。结果 PCR先后扩增获得的3段序列,测序并拼接后发现其含有两个完整开放读码框架,分别为长1200 bp的GspF基因(GenBank收录号为GU377212.1)和长1434 bp的GspE基因(GenBank收录号为HM151387)。在GenBank中BLAST分析发现,D2株与嗜麦芽寡养单胞菌R551-3菌株的GspF基因及氨基酸序列同源性分别为93%和98%;GspE基因及氨基酸序列同源性与同菌种菌分别为92%和99%。结论成功克隆出嗜麦芽寡养单胞菌D2株Ⅱ型分泌系统基因簇中的GspF和GspE完整编码序列;嗜麦芽寡养单胞菌GspF和GspE种内高度保守,而其他细菌差异显著,提示其Ⅱ型分泌机制可能与其他革兰阴性菌有一定差异。     

嗜麦芽寡养单胞菌蛋白酶纤溶活性及其机制的研究

目的自双齿围沙蚕消化道内分离得到1株嗜麦芽寡养单胞菌,前期研究发现该菌株可大量胞外分泌一种具有纤溶活性的蛋白酶。文中旨在观察嗜麦芽寡养单胞菌蛋白酶(S.maltophiliaprotease,SMP)在体内外的纤维蛋白溶解活性,并探讨其纤溶机制。方法试管凝块法和纤维蛋白平板法体外观察SMP对纤维蛋白和纤维蛋白原的溶解作用,计算其比活性;建立SD大鼠动-静脉旁路血栓模型,分别给予不同剂量的SMP、等渗盐水和蚓激酶,观察各组血栓重量及表面情况,检测血浆优球蛋白溶解时间(euglobulin lysis time,ELT)、纤维蛋白原(fibrinogen,Fg)、纤维蛋白降解产物(fibrin degradation prod-uct,FDP)和D-二聚体等指标,并比较血浆中组织型纤溶酶原激活物(tissue plasminogen activator,t-PA)和血浆纤溶酶原激活物抑制物-1(plasminogen activator inhibitor type-1,PAI-1)的变化。结果 SMP同时具有溶解纤维蛋白原和纤维蛋白的活性,且活性呈一定的量效关系;SMP不依赖纤溶酶原的激活而直接溶解纤维蛋白,并...     

HSV-1感染对神经胶质瘤细胞NGF和BDNF表达变化的研究

目的:探讨单纯疱疹病毒1型(HSV-1)感染时神经胶质细胞内源性神经生长因子(NGF)和脑源性神经生长因子(BDNF)的表达变化。方法:采用RT-PCR法检测HSV-1糖蛋白D(gD)基因扩增,RT-PCR法和Westernblotting法检测正常培养和感染HSV-1的神经胶质瘤(U251)细胞的NGF和BDNF。结果:HSV-1可感染U251细胞;正常U251细胞可表达NGF和BDNF;HSV-1感染U251细胞后,NGF和BDNF在感染后第6小时达高峰,之后随感染时间延长逐渐降低。结论:HSV-1可诱导U251细胞中的NGF和BDNF表达异常。     

艰难梭菌CRISPR-Cas系统的基因组结构及其与噬菌体的关系北大核心CSCD

目的CRISPR-Cas系统是细菌和古生菌基因组中的一种适应性免疫防御系统,可保护其免受噬菌体、质粒等外源DNA的入侵,阻止基因的水平转移,从而维护自身基因组的稳定。本研究旨在分析艰难梭菌基因组中CRISPR-Cas系统的基因结构,以探讨其在防御噬菌体感染等方面的作用。方法从Nucleotide数据库中下载艰难梭菌全基因组信息,利用CRISPR-CasFinder软件鉴定基因组中的CRISPR-Cas系统,通过MEGA、BLAST等软件进行cas1基因及重复序列分析并确定间隔序列同源信息;采用PHASTER软件预测基因组中的前噬菌体含量,分析其与间隔序列数量之间的关系。结果100株艰难梭菌中有96株(96%)含有完整的CRISPR-Cas系统,共含703个确定CRISPR阵列和204个cas基因簇,CRISPR-Cas系统全部为I-B型;重复序列共26种,保守性较高,19种可形成茎环结构,32.3%的间隔序列与噬菌体、质粒同源,间隔序列与前噬菌体数量之间存在负相关关系(r=-0.4759,P<0.01)。结论艰难梭菌CRISPR-Cas系统的携带率和株均携带数量均高于多数其他临床常见病原菌,且系统基因结构完整;该菌的CRISPR-Cas系统中靶向噬菌体的间隔序列数量多,有助于抵御噬菌体的侵袭,从而对开发噬菌体治疗法带来一定困难。     

嗜麦芽寡养单胞菌D2株基因组文库的构建及部分克隆的分析

目的自双齿围沙蚕消化道内分离出的嗜麦芽寡养单胞菌D2株经前期研究发现其具有明显胞外分泌可溶性纤溶酶、蛋白酶等活性。文中构建嗜麦芽寡养单胞菌D2株基因组文库,了解其基因背景。方法用Sau3AⅠ酶切D2株基因组DNA,回收0.2~2kb的DNA片段,连接至pMD18-T质粒载体,转化大肠杆菌JM109,在含有Amp的LB平板上筛选重组子,酶切鉴定后建库保存;随机挑取15个酶切鉴定正确的阳性克隆测序,在网络数据库中进行BLASTX分析。结果共得到转化子约1124个,符合建库要求;经测序证实获得了D2株碱性磷酸酶、AMP-依赖性合成酶、荧光素样单加氧酶等蛋白的结构基因序列。结论成功构建了嗜麦芽寡养单胞菌D2株的基因组文库,为进一步了解该菌的背景及筛选其功能基因奠定基础。     

嗜麦芽寡氧单胞菌临床株与环境株的16S rRNA基因序列及系统发育分析

目的:比较嗜麦芽寡氧单胞菌临床株与环境株16S rRNA基因序列,构建系统发育树,分析其进化关系.方法:对选取的3株嗜麦芽寡养单胞菌临床株和1株环境株的16S rRNA基因进行PCR扩增并测序.将上述及从GenBank中挑选出的其他32株不同来源的嗜麦芽寡养单胞菌的16S rRNA基因序列进行对比分析.并绘制系统发育树.结果:系统发育分析表明大部分菌株可根据来源分为3个簇,序列分析显示某些高度可变区可能存在可区分临床株与环境株的关键序列.结论:嗜麦芽寡养单胞菌基因型及表现型具有多样性:大部分嗜麦芽寡氧单胞菌临床株与环境株可根据16S rRNA基因序列进行鉴别.     

降钙素原检测在脓毒血症急性肾损伤中的意义

目的探讨降钙素原(PCT)检测在脓毒血症导致急性肾损伤(AKI)中的指导意义。方法脓毒血症患者50例作为实验组,再将其分为AKI阳性组(8例)和AKI阴性组(42例),50例健康体检者作为对照组,检测各组人员的PCT、C反应蛋白(CRP)和白细胞(WBC)水平。结果实验组PCT、CRP和WBC结果较对照组均明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);AKI阳性组较AKI阴性组PCT明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);CRP、WBC结果比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论脓毒血症导致急性肾损伤患者,PCT浓度比CRP和WBC敏感,可评估由脓毒血症导致急性肾损伤的风险。     

血清降钙素原、C反应蛋白对尿路感染的诊断价值

目的探讨血清降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)对尿路感染的诊断价值。方法选择上尿路感染患者42例、下尿路感染患者39例,另选取无尿路感染症状的健康查体者45例作为对照组。分别观察各组血清PCT、CRP水平,同时计数血液及尿液中的白细胞。根据培养鉴定结果将上尿路感染组、下尿路感染组再次分为革兰阳性菌感染组、革兰阴性菌感染组和真菌感染组,并对上述指标进行比较。结果上、下尿路感染组血清PCT、CRP及血、尿液WBC明显高于对照组(P均<0.05)。在上、下尿路感染中PCT为0.05 ng/mL时,对尿路感染检测的敏感性为89.7%,特异性为79.6%;CRP为5 mg/L时,敏感性、特异性分别为79.3%、64.3%。革兰阳性菌感染组、革兰阴性菌感染组和真菌感染组4项指标比较差异均无统计学意义。结论血清PCT、CRP可作为诊断尿路感染的有效指标,但PCT更敏感,并可用于辅助鉴别尿路感染部位。