3种重要虫媒病毒的RT-PCR检测

目的：建立快速、敏感、特异的虫媒病毒RT-PCR检测方法。方法：采用改进的核酸制备方法，分别从感染的乳鼠脑和细胞培养上清液中提取病毒RNA，再用RT-PCR和套式PCR方法进行检测。结果：通过对肌PCR反应条件的优化，用3种虫媒病毒的特异引物均可从不同稀释度的感染小鼠脑和细胞上清中提取的病毒RNA扩增出特异的目的基因片段。甲病毒属的东部马脑炎病毒和西部马脑炎病毒之间，及与黄病毒属的黄热病毒均无交叉反应，表明建立的RT-PCR检测方法特异性强。套式PCR与肝PCR比较可提高检测敏感性10～10000倍。结论：建立的肝PCR和套式：PCR法可用于3种虫媒病毒的快速检测。     

一种达到面具防护水平的生物防护口罩

用0．075μm的NaCl气溶胶和金黄色葡萄球菌及大肠杆菌F2噬菌体气溶胶，对FS9901型平面-腔式可变的一次性生物防护口罩进行了滤材过滤效率、通气阻力和负载能力的评价；用口罩脸形密合度测试仪在8种规定的动作下进行了实际佩戴效果的测试。结果表明，口罩对3种气溶胶的过滤效率达到99％以上，通气阻力〈250Pa，口罩负载达到150mg时的通气阻力仍低于其正常使用标准．大部分受试者用一次性防护口罩检测模式检测，实际佩戴时的脸形密合度超过了国际通用检测仪器的极限．用防护面具检测模式检测的脸形密舍度平均值为134．5，是目前国际上防护性能最高的一次性防护口罩，基本达到了半脸式面具的防护水平。本口罩储存时为平面结构，使用为腔式结构，体积小，重量轻，便于部队装备和使用。     

一种新型高效生物防护口罩的防护性能测试

目的对FS9901型生物防护口罩的防护效果进行测试评价。方法采用国家标准测试方法对该口罩的滤材过滤效率、通气阻力、负载能力、口罩脸形密合度进行测试。结果该口罩的过滤效率达到99%以上;通气阻力<250 Pa,低于正常使用标准;脸形密合度>200,超过了国际通用检测仪器的极限。结论该口罩是目前国内外防护用品市场上已有的防护性能最好的一次性生物防护口罩。此外,该口罩在使用时自动变为腔式结构,而在储存时为平面结构,体积小,重量轻,非常易于储运和使用。     

鼠疫耶尔森菌caf1基因缺失株体外生物学特性和对小鼠致病性分析

目的 探索caf1基因缺失对鼠疫耶尔森菌体外生物学特性与对小鼠致病性的影响。方法 利用CRISPR/Cas12a介导的基因编辑技术构建鼠疫耶尔森菌caf1基因缺失株,并通过PCR技术对caf1基因缺失验证。比较鼠疫耶尔森菌caf1基因缺失株和野生株201在生长速率、液体培养状态、聚集情况等体外生物学特性和对小鼠致病性等方面的差异。结果 PCR扩增结果证实,caf1基因缺失株构建成功。体外生物学特征分析表明,与野生株相比,caf1基因缺失株的形态学和生长速率并未发生明显变化,自凝聚率升高。肺递送途径LD₅₀分析表明,caf1的缺失导致鼠疫耶尔森菌气溶胶感染小鼠半数致死剂量显著降低。结论 不同途径感染结果表明,caf1基因缺失株相较于野生株,在肺递送、滴鼻、皮下、尾静脉注射4种途径下对BALB/c小鼠的毒力均降低。caf1基因的缺失导致鼠疫耶尔森菌自凝聚率升高,对BALB/c小鼠致病性下降。     

登革2型病毒PrM基因对不同型登革病毒复制的特异抑制作用

目的 :将我国登革 2型病毒PrM(D2 _PrM)基因导入甲病毒载体系统 ,探讨含正、反义PrM基因的重组病毒对不同血清型登革病毒复制的特异抑制作用。方法 :采用体外转录和电穿孔的方法 ,首先分别将构建的含正、反义PrM基因的重组质粒DNA和辅助载体DNA转录成RNA ,然后将这两种RNA共转染BHK细胞 ,进而包装成重组病毒颗粒。再将经激活的重组病毒感染宿主细胞 ,分别用不同型登革病毒攻击 ,然后通过免疫荧光法 ,观察对不同型登革病毒复制的抑制作用。结果 :含登革 2型正、反义PrM基因的重组甲病毒 ,不仅可完全抑制该型病毒在宿主细胞中的复制 ,而且对其他 3个型病毒的复制也具有不同程度的抑制作用。含反义PrM基因的重组病毒对 4个型登革病毒复制的抑制作用最强。结论 :登革 2型病毒的正、反义PrM基因在宿主细胞中通过重组甲病毒 ,可介导对登革 1～ 4型病毒复制的特异抑制作用     

湖北省东北部地区蜱携立克次体的调查

目的 调查湖北省东北部地区蜱携带的立克次体.方法 对采集的蜱种类进行鉴定,提取单个蜱总DNA,采用巢式PCR对DNA样本做斑点热群(SFGR)、无形体属(Anaplasma spp.)和埃立克体属(Ehrlichia spp.)、柯克斯体属(Coxiella spp.)、贝氏柯克斯体(Coxiella burnetii...     

质粒基因注释可视化系统VPA V1.0的研建

目的 建立临床医学研究中便捷易用的质粒基因注释可视化系统,用于直观展示质粒结构与基因分布.方法 运用Perl语言编写VPA系统4个主要模块(文件配置模块、颜色系统模块、图形生成模块和出错帮助模块),生成Perl脚本VPA.pl.结果 构建了质粒基因注释可视化系统VPA,该系统可实现多种类别、不同长度质粒的基因注释可视化...     

两个来自非脱羧勒克菌的MDR质粒耐药机制研究

目的 探究2个来自非脱羧勒克菌的多药耐药(MDR)质粒p707804?CTXM和pP12375?CTXM的耐药机制.方法 采用16S rDNA基因扩增初步鉴定菌种,得到测序数据后进行平均核苷酸一致性(ANI)比对最终核定菌种;全自动细菌鉴定及药敏分析系统检测细菌的MIC值;随后进行全基因组测序,获得细菌的全基因组序列,...     

新发传染病出现的机制和影响因素分析

通过资料检索、文献综述和实践工作总结,讨论了新发传染病的出现机制,新病原体出现的原因,较全面地分析了新发传染病出现的影响因素,并结合我国当前社会经济发展状况,探讨了国外新发传染病传入我国的主要危险。我国可能不断有新发传染病的出现、流行,将对我国传染病防制体系带来新的挑战。