慢性乙肝病毒感染者血清血管内皮生长因子的研究

目的:检测慢性乙型肝炎病毒感染患者血清中血管内皮生长因子(VEGF)的水平,探讨其临床意义.方法:采用双抗体夹心ELISA法对50例肝细胞癌、40例乙型肝炎肝硬化、36例乙型肝炎肝纤维化、40例慢性乙型肝炎患者血清中VEGF进行检测,并以43例健康者作为对照.同时采用全自动生化分析仪检测所有人员的肝功能常规指标.结果:慢性乙型肝炎、肝纤维化、肝硬化、肝细胞癌组患者血清VEGF浓度明显高于正常对照组(P＜0.01,P＜0.05,P＜0.05,P＜0.05),同时四组患者之间比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).四组患者血清VEGF水平与肝功能指标AST、ALT无相关性,与GGT成正相关(r=0.337,P＜0.05).结论:VEGF与慢性乙型肝炎病毒感染者病情密切相关,可作为病情发展动态监测的指标.VEGF与GGT联合检测,可显著提高肝细胞癌的检出率.     

寡聚蛋白Trim34α对NF-κB报告基因的负向调节作用

目的 测Trim34α对TAB2诱导的NF-κB报告基因活化的影响.结果 经鉴定成功构建Trim34α真核表达载体,该载体表达的Trim34α蛋白能相互聚集形成寡聚体(Trim小体);Trim34α可显著抑制TAB2诱导的NF-κB荧光素酶报告基因活化.结论 Trim34α可以在胞内形成寡聚体,Trim34α能显著抑制TAB2诱导的NF-κB报告基因活化.

Abstract：

Objective To investigate the effects of Trim34α on the activation of luciferase reporter gene containing NF-κB promoter induced by adaptor proteins TAB2. Methods The total RNA was isolated from HeLa cells. After amplification with RT-PCR, the target sequences were cloned into 5'-Flag-pcDNA3.1 (+) vector. The recombinant vector was confirmed by restriction enzyme digestion, colony PCR and sequencing. It was transfected into HEK293T cells to detected Trim34α expression by Western blot. Simultaneously, the effects of Trim34α on the NF-κB activation induced by TAB2 were determined by dual-luciferase reporter assay. Results Restriction enzyme digestion, colony PCR and sequencing confirmed the vector was constructed successfully, furthermore it expressed Trim34α protein in HEK293T cells. Moreover, trim34α could form high-molecular-weight oligomeric protein, and here we called it trimsome. Interestingly, dual-luciferase assay showed that Trim34α could effectively block TAB2-induced NF-κB activation. Conclusion Trim34α was involved in negative regulation of TAB2-induced NF-κB activation and could form high-molecular-weight oligomer.     

血清CEA、CY21-1、NSE检测对原发性肺癌治疗后复发的诊断价值

目的探讨癌胚抗原（CEA）、细胞角蛋白19片段（CY21-1）、神经特异性烯醇化酶（NSE）3种标志物对原发性肺癌治疗后复发的诊断指导意义。方法回顾性分析我院2000--2005年268例原发性肺癌患者的CEA、CY21—1和NSE浓度变化。结果肺鳞癌CY21—1增高明显,肺腺癌CEA增加明显,小细胞肺癌NSE增加明显,联检阳性率比单项检查阳性率高。结论联合检测CEA、CY21—1、NSE对于诊断肺癌复发具有重要临床意义。     

闽东地区77222例抗-HCV检测结果调查分析

目的了解闽东地区人群丙型肝炎病毒（HCV）感染的性别、年龄分布状况及变化趋势。方法酶联免疫吸附法（EUSA）检测抗丙型肝炎病毒抗体（抗-HCV）,X2检验进行统计分析。结果本地区HCV感染阳性率平均为0．2／％,男性和女性分别为0．29％和0．26％,未成年人、成年人和老年人分别为0．07％、0．30％和0．23％,2010年至2012年,HCV感染阳性率呈下降趋势,2013年略有增高。结论HCV感染者性别、年龄分布有一定规律,可为丙型肝炎的预防、诊断和治疗提供参考。     

类风湿因子与抗环瓜氨酸肽抗体联合检测对类风湿关节炎诊断的意义

目的研究类风湿因子(rheumatoid factor,RF)和抗环瓜氨酸肽抗体(anti-cyclic cirtrullinated peptide,抗-CCP)联合检测在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)诊疗中的价值。方法 2010年1月—2013年5月收集RA患者327例,空腹取静脉血3⁵ ml,采用ELISA检测抗-CCP,用速率散射比浊法检测RF。比较不同检测方法对患者诊断的敏感性与特异性。计量资料采用t检验,计数资料采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果 RF联合抗-CCP(RF、抗-CCP有一项阳性)检测的阳性率(90.2%)显著高于单纯RF(70.0%)和抗-CCP检测(59.3%),也高于RF+抗-CCP(RF、抗-CCP均为阳性)阳性率(39.1%),两两比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。RF检测对RA诊断的特异性为84.4%,抗-CCP为95.8%,两者联合检测为96.6%,两者联合检测特异性高于单纯检测,两两比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论抗-CCP、RF联合检测可提高对RA诊断的敏感性和特异性。     

PKCθ激活γδT细胞转录因子NF-κB的作用

目的:探讨经T细胞受体(TCR)途径激活人γδT细胞时,新型蛋白激酶PKCθ在促进转录因子NF-κB活化中的作用.方法:常规分离健康人外周血单个核细胞(PBMC),用结核杆菌耐热性多肽抗原(MtbAg)诱导扩增,获得Vγ9Vδ2 T细胞富集的细胞群(MtbAT).PKCθ抑制剂(Rottlerin)预处理MtbAT,抗CD3单克隆抗体(mAb)刺激后收集细胞,通过电泳迁移率变动分析(EMSA)检测转录因子NF-κB活性变化;经流式细胞术(FCM)检测T细胞活化分子CD69的表达情况.结果:γδT细胞经抗CD3 mAb刺激,NF-κB活性增强;Rottlerin预处理使抗CD3 mAb诱导的NF-κB活化程度显著减弱,并抑制T细胞活化分子CD69的表达.结论:PKC0在人γδT细胞经TCR途径激活NF-κB过程中具有重要作用.     

VEGF基因沉默对肝癌HepG2细胞侵袭和迁移的影响

目的观察VEGF基因沉默对人肝癌细胞株HepG2迁移和侵袭的影响。方法采用siRNA技术沉默HepG2细胞内血管内皮细胞生长因子(VEGF)基因。体外成功构建针对VEGF的3种siRNA表达载体和1个阴性对照,分别命名为pGenesil-1-VEGF-shRNA-1、2、3和pGenesil-1-VEGF-shRNA-scramble。Lipofectamine 2000介导转染HepG2,用RT-PCR筛选出沉默效果最好的siRNA片断(pGenesil-1-VEGF-shRNA-2),将其重组质粒转染HepG2(观察组),以空质粒细胞(空载组)和空白细胞(空白组)作为对照。采用细胞创伤愈合试验、Transwell小室体外侵袭试验分别检测三组细胞迁移、侵袭能力。结果细胞创伤愈合试验显示,观察组细胞迁移速度为(3.02±0.03)μm/h,显著慢于空载组的(8.67±0.02)μm/h和空白组的(8.78±0.03)μm/h,P均<0.05;细胞侵袭试验显示,观察组穿膜细胞数为(14.0±1.3)个,显著低于空载组的(35.0±2.3)个和空白组的(36.0±2.5)个,P均<0.05。结论 VEGF基因沉默可抑制肝癌细胞株HepG2的迁移和侵袭能力。     

小鼠Trim30α人同源基因的生物信息学筛选及初步鉴定

目的 通过生物信息学方法寻找Trim30α的人同源基因,观察候选Trim蛋白对TAB2诱导的NF-κB荧光素酶报告基因活性的影响.方法 经MEGA4软件对具有RBCC和SPRY结构域的Trim分子行进化树分析,用DNAMAN 6.0软件对候选Trim与Trim30α进行氨基酸序列比对,比较Trim30α相毗邻基因在小鼠和人染色体上的排列分布规律.构建Trim22的真核表达载体,用双萤光素酶报告基因系统检测Trim22对TAB2诱导的NF- κB报告基因活化的影响.结果 Trim30α与人Trim5α.、Trim6、Trim22、Trim34α来自进化树的同一分支节点;Trim22、Trim5α与Trim30α的氨基酸序列同源性分别为42.51％、45.47％;Trim22可以抑制TAB2诱导的NF-κB报告基因的活化,而Trim5α无显著抑制作用.结论 Trim22对TAB2诱导的NF-κB报告基因活化有负向调节作用,可能与Trim30α具有相类似的生物学功能.     

过敏性皮肤病患者血清过敏原检测分析

目的了解本地区过敏性皮肤病患者过敏原的种类,为诊断和预防过敏性皮肤病提供依据。方法用免疫印迹法检测120例过敏性皮肤病患者血清总IgE及特异性IgE,对检测结果进行分析。结果 120例中有90.8%的患者血清总IgE升高,所有患者均检出至少1种过敏原;户尘螨、屋尘、桑树、猫毛皮屑、狗毛皮屑、蟑螂、鸡蛋白、牛奶等均可成为过敏原而引起过敏性皮肤病,其中户尘螨、蟑螂和混合霉菌最为常见。结论不同地区过敏原存在差异,诊断单纯依靠过敏原检测有可能造成漏诊,应依据相关实验室检查并结合病史和临床表现进行。