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邻苯三酚自氧化法测定血中超氧化物歧化酶的活性 总被引:26,自引:0,他引:26
[目的]为改善目前SOD活性测定结果混乱的现状,提高测定结果的可比性,[方法]对邻苯三酚自氧化法测定超氧化物歧化酶活性的方法进行了研究,就测量波长、底物浓度、加样量等因素对测定结果的影响进行了探讨.测定了79例健康儿童血清和29例健康成人红细胞中的SOD活性.[结果]测定结果分别为49.0±19.2U/ml(x±s)和6187±1236U/g Hb(x±s).[结论]建议尽快建立标准化的测定方法,严格控制测定条件,以获得满意的测定结果. 相似文献
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目的评价新型灭螺药氯代水杨胺(LDS)的急性毒性。方法按照《农业登记毒理学试验方法》GB 15670-1995,将LDS分别进行大鼠急性经口、经皮、吸入毒性试验,家兔急性眼刺激和皮肤刺激试验,以及豚鼠皮肤致敏试验。结果依据分级评价标准,LDS对大鼠急性经口、经皮、吸入毒性属微毒级,对家兔属无急性眼刺激性及无急性皮肤刺激性,对豚鼠皮肤致敏属弱致敏类。结论 LDS对哺乳动物的毒性属微毒级,是一种新型的安全灭螺药。 相似文献
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高效液相色谱法测定抑制剂对肿瘤坏死因子-α转化酶的抑制作用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 对高效液相色谱法(HPLC)测定抑制剂对肿瘤坏死因子-α转化酶(TACE)的抑制作用进行方法 改进,以提高其准确度和普及性,并用于测定抑制剂GM6001及抑制剂A对TACE的抑制作用.方法 TACE与多肽底物经37℃孵育15 min后,加入Ala-Dpa作为内标物,用高效液相色谱法进行分析.以55%甲醇水溶液为流动相,检测波长353 nm.根据剩余底物与内标物的色谱峰面积比,从校准曲线中得出底物的转化量,据此计算TACE的酶活性.结果底物与内标物的色谱峰面积比与底物浓度呈良好线性关系,相关系数为0.996 8,线性范围10 μmol/L 至 400 μmol/L.精密度试验表明,采用内标法定量,精密度得到显著改善.经测定,抑制剂GM6001及抑制剂A对TACE的半数抑制浓度IC50分别为317.5 nmol/L和175.8 nmol/L.结论 以Ala-Dpa作内标物,HPLC测定TACE 酶活性,为TACE抑制剂的筛选提供了一种更准确、更实用的方法 . 相似文献
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Nycodenz-密度渗透压介质离心分离人外周血单核细胞研究 总被引:1,自引:1,他引:0
目的研究人外周血单核细胞分离方法。方法采集24名健康志愿献血者外周血,分别以EDTA-K2、肝素钠、枸橼酸钠抗凝,将抗凝全血或单个核细胞悬液缓慢加入不同密度和渗透压组合的Nycodenz-NaCl溶液上层,离心分离单核细胞;EDTA抗凝血经Ficoll-Hypaque密度梯度离心获得的单个核细胞,再分别用Nycodenz-NaCl密度渗透压介质离心法、Percoll密度梯度离心法、贴壁法、MACS(抗CD-14磁珠)分离单核细胞。结果如上4种方法获得的单核细胞纯度和收获率中位数(M)分别为98.9%和68.5%、89.6%和64.5%、64.8%和60.5%、94.1%和73.5%,比较显示Nycodenz法获得的单核细胞纯度最高(P<0.01);吞噬指数和趋化指数分别为188.8±11.2和26.8±5.9、187.8±12.2和26.1±5.1、144.4±24.8和15.4±7.3、177.1±18.3和18.9±6.7,统计表明Percoll法和Nycodenz法获得的单核细胞的吞噬指数、趋化指数高于贴壁法和MACS法(P<0.05);单核细胞受LPS刺激分泌细胞因子IL-12p70、IL-10、TNF-α水平(pg/ml)分别为2 545±341、1 216±397、3.999±418,2 489±425、1080±277、3 891±446,2 147±223、794±180、3268±411,35±12、142±81、407±199,比较得知MACS的单核细胞受LPS刺激分泌细胞因子IL-12p70、IL-10、TNF-α水平非常显著低于其他方法(P<0.01);单核细胞经典亚群CD14+CD16-HLA-DR+百分比和非经典亚群CD14+CD16+HLA-DR+百分比(M)分别为89%和5%、88%和1%、73%和1%、51%和36%,统计表明MACS法的单核细胞经典亚群百分比明显低于其他分离方法(P<0.01),而非经典亚群百分比明显高于其他方法(P<0.01)。结论 Nycodenz-NaCl密度渗透压介质离心法能够分离获得较高纯度、较多经典型的单核细胞。 相似文献
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本世纪50年代,Mertx和Schwa,发现用缺铬饲料喂养的动物出现糖耐量异常。进一步的研究表明铬能键合胰岛素及其受体,从而加强胰岛素的作用。为观察人体内铬与血糖、血胰岛素的关系,我们对6例健康者和16例Ⅱ型糖尿病人进行了糖耐量试验,发现血浆中铬含量与血糖、血胰岛素呈负相关。 相似文献
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Tumor necrosis factor-α (TNF-α) is a critical cyto-kine in organism. It has been discovered that elevated TNF-α levels are implicated in a number of chronic dis-eases such as rheumatoid arthritis, multiple sclerosis, type II diabetes, inflammatory bowel disease, and other human ailments[1]. The recent clinical successes of monoclonal TNF-α antibody Infliximab[2] and the soluble TNF p75 receptor fusion protein Entanercept[3] in RA patients suggest that anti-TNF-α is a valid target … 相似文献
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目的观察新型灭螺剂氯代水杨胺(LDS)的灭螺效果。方法采用浸杀法、喷洒法和撒粉法,将10% LDS和50%氯硝柳胺乙醇胺盐(WPN)在实验室分别配成0.05、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6、3.2 mg/L (g/m2)7个浓度,在现场分别配成0.2、0.4、0.8 mg/L (g/m2)3个浓度,平行比较两种药物实验室24、48、72 h和现场1、3、7d的灭螺效果。两种药物均以0.4 mg/L (g/mz)浓度评价其灭螺效果。结果 在实验室温度23-25℃条件下,LDS和WPN的钉螺死亡率,浸杀72 h分别为100. 0%和96.7%;喷洒7 d分别为100.0%和96.0%;撤粉7d分别为92.0%和94.0%。在现场温度15-24℃条件下,LDS和WPN的钉螺死亡率,浸杀72 h丹别为100.0%和96.0%;喷洒7d分别为100.0%和96.9%;撒粉7d分别为100.0%和94.1%。结论新型灭螺剂氯代水杨胺的灭螺效果与氯硝柳胺乙醇胺盐基本相同,但灭螺费用降低。 相似文献
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超氧化物歧化酶间接测定法的活性定值的探讨 总被引:2,自引:0,他引:2
以连苯三酚自氧化法为例,探讨了抑制率、指示反应速率差与超氧化物歧化酶(SOD)浓度之间的关系。采用下列定值方法,即根据指示反应速率差计算SOD活性,并以酶活性的国际单位表示,可使不同条件和方法得出准确一致的测定结果。 相似文献
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钒化合物的降血糖作用 总被引:1,自引:0,他引:1
赵云斌 《国外医学:医学地理分册》1993,14(4):149-150
迄今为止,已发现三种无机钒对糖尿鼠具有降血糖作用,其机理为钒化合物,作用于胰岛素受体或胰岛素受体或胰岛素受体后。钒化合物有一定程序的毒性,须研制低毒,高效的钒化合物用于糖尿的治疗。 相似文献
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目的建立一种无致癌性、无放射性、灵敏的33,’,55,’-四甲基联苯胺(TMB)检测ADCC实验中靶红细胞自然释放的微量Hb含量的改进方法。方法利用Hb类似过氧化物酶效应催化双氧水氧化33,’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB),使其发生显色反应,改进吸光度在600 nm处的检测体系。采用Nycodenz密度渗透压介质分离单核细胞作为ADCC的效应细胞。比较2种情况的灵敏度,并与51Cr释放法进行方法学对照。在ADCC实验中,分别用51Cr释放法和改良TMB法测定Hb自然释放率。结果显色反应结束后加硫酸酸终止测定最大吸收波长移至450 nm,不加酸终止测定波长为600 nm。不加硫酸终止的TMB法检测Hb低检出限是0.0075 g/L,显色时间20min,TMB最优浓度是0.62 g/L,空白吸收始终稳定的维持在<0.003的较低值。而加酸终止的TMB法低检出限仅为0.5 g/L。显然不加酸终止的改良TMB法的灵敏度非常显著地高于加酸终止的TMB法。在测定ADCC靶红细胞自然释放率试验中,不加酸终止的改良TMB法仅需4 h孵育时间以及2.5×106 cell/ml红细胞浓度即可测定出释放Hb含量,而加酸后孵育时间要长达14 h并且需要更高浓度的红细胞才能测出自然释放Hb含量。用不加硫酸终止的TMB法检测ADCC活性与51Cr释放法相关性良好(r=0.999)。结论改良TMB比色法可以代替51Cr释放法检测ADCC的靶红细胞细胞毒效应。加酸终止、测定波长为450 nm的TMB比色法的灵敏度与51Cr释放法的灵敏度有显著差距,不适用低活性ADCC效应检测。 相似文献