雌激素受体基因多态性与女性类风湿关节炎相关性的研究

目的分析雌激素受体(ER)基因XbaⅠ和PvuⅡ酶切多态性在女性类风湿关节炎(RA)中的分布,探讨其与人类白细胞抗原(HLA)-DRβ1*04基因亚型、类风湿因子(RF)以及RA患者临床表现的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)技术,对81例女性RA患者和146名女性正常对照者的ER基因(XbaⅠ、PvuⅡ位点)进行分型,并计算基因分布频率。分析患者的HLA-DRβ1*04基因亚型、RF以及临床表现与ER基因多态性之间的关系。结果女性RA患者的ER基因X、P基因频率均明显高于健康对照组,ER基因的XX和PP基因亚型的阳性率分别高于正常对照组(P<0.05)。而RA患者的xx基因亚型的阳性率明显低于健康对照组(P<0.05)。RA患者XXPP基因型的阳性率明显高于健康对照组,而xxpp基因型的阳性率明显低于健康对照组(P<0.05)。携带PP基因型的RA患者HLA-DRβ1*04基因亚型的阳性率明显升高(P<0.05)。ER基因中pp基因型、XXpp和xxPP基因型的患者关节受累数明显增高(P<0.05)。结论女性RA患者ER基因的X和P的基因频率表达明显增高。ER基因酶切多态性分析中,XX、PP及XXPP基因型可能与女性RA的易感性相关。PP基因型可能与HLA-DRβ1*04基因有一定的相关性,pp基因型、XXpp和xxPP基因型可能与RA关节病变的程度相关。     

自身抗体联合检测在系统性红斑狼疮诊断中的意义

目的研究抗细胞膜DNA(cmDNA)抗体、抗核小体抗体(AnuA)、抗脱氧核糖核蛋白(DNP)抗体及抗双链DNA(dsDNA)抗体等特异性抗体在系统性红斑狼疮(SLE)诊断中的意义,并与抗核抗体(ANA)的敏感性和特异性进行比较。了解特异性自身抗体联合检测在SLE的诊断及临床应用中的意义。方法测定了125例SLE及118例疾病对照组(包括原发性干燥综合征、多发肌炎、系统性硬化症、未分化结缔组织病、类风湿关节炎、骨关节炎、强直性脊柱炎及银屑病关节炎)患者血清中的自身抗体。利用间接免疫荧光法测定抗cmDNA抗体和ANA,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定AnuA、乳凝法检测抗DNP抗体、金标法测定抗dsDNA抗体。结果AnuA、抗cmDNA抗体、抗DNP抗体、抗dsDNA抗体和ANA在SLE患者中的阳性率分别为68%、38.4%、51.2%、49.6%和95.2%,均明显高于疾病对照组(3.4%、4.2%、1.7%、0.8%和25.4%),差异有统计学意义(P<0.001)。ANA与AnuA的敏感性显著高于其他三种抗体,差异有统计学意义(P<0.05);AnuA、抗cmDNA抗体、抗DNP抗体、抗dsDNA抗体和ANA的特异性分别为95.8%、96.6%、98.3%、99.2%和74.6%;AnuA在抗DNP抗体、抗dsDNA抗体阴性的SLE中的阳性率明显高于其他抗体(P<0.05);自身抗体的联合检测可提高SLE诊断的敏感性,但特异性无明显改变。结论抗cmDNA抗     

rhTNFR:Fc对类风湿关节炎患者血清中致炎及抗炎性细胞因子的影响

目的探讨重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白[rhTNFR：Fc，益赛普（etanercept）]治疗类风湿关节炎（RA）的免疫学机制，了解rhTNFR：Fc对RA患者血清中致炎及抗炎性细胞因子的作用，比较rhTNFR：Fc和甲氨蝶呤（MTX）对这些细胞因子作用的不同，为rhTNFR：Fc治疗RA提供进一步的实验依据。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测RA患者rhTNFR：Fc治疗前后血清中白细胞介素（IL）-1、IL-6、IL-1、肿瘤坏死因子（TNF）-α和干扰素ONF）-γ度。观察rhTNFR：Fc对细胞因子的影响。结果①RA患者血清中的炎性细胞因子TNF-α、INF-γ、IL-1β、IL-6的水平均高于健康对照组，其中IL-6、INF-γ、TNF-α的水平与健康对照组相比差异有统计学意义（P〈0．01），抗炎性细胞因子IL-10的水平低于健康对照组，但两者相比差异无统计学意义（P〉0．05）。②rhTNFR：Fc治疗RA后血清中Th1型细胞因子TNF-α、INF-γ、IL-1β、IL-6水平均明显降低（P〈0．01），而Th2型细胞因子IL-10的水平明显提高（P〈0．01）。③RA患者血清中TNF-α水平与肿胀关节数及肿胀关节指数呈正相关（P〈0．05）。④对临床指标的分析表明，rhTNFR：Fc治疗RA疗效确切。结论rhTNFR：Fc可以降低RA患者血清中TNF-α、INF-γ、IL-1β、IL-6的水平，同时升高IL-10水平；在抑制了Th1型细胞因子的同时．增强了Th2型细胞因子的效应．从而改善RA的病情。     

瓜氨酸化人乳头状瘤病毒47 E345-3622抗原肽抗体在早期类风湿关节炎诊断中的意义

目的:类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者血清中存在高滴度的特异性针对瓜氨酸化的人乳头状瘤病毒(human papilloma virus,HPV)47型E2蛋白的345-362多肽(human papilloma virus peptide,HPVP)抗原的抗体,探讨该抗体在早期RA临床诊断中的意义。方法:以HPVP及瓜氨酸化HPVP为抗原,酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测101例病程小于1年的早期RA(early RA,E-RA)患者,149例其他结缔组织病患者以及40名正常对照血清中相关抗体的水平。并与RA患者临床相关资料和实验室指标进行统计学分析。结果:(1)E-RA患者组血清中IgG、IgM型抗瓜氨酸化HPVP抗体的阳性率(分别为62.4%和66.3%)均高于其他对照组,差异有统计学意义(P<0.01),而E-RA患者组及其他对照组血清的抗HPVP抗体阳性率差异无统计学意义;(2)抗瓜氨酸化HPVP的IgG型和IgM型抗体在E-RA诊断中的敏感性分别为62.4%和66.3%,特异性分别为89.4%和86.6%;(3)抗瓜氨酸化HPVP的IgG型和IgM型抗体在IgM-RF阴性患者中的阳性率分别是59.4%和71.9%,在抗环瓜氨酸肽(anticyclic citrullinated peptide,anti-CCP)抗体阴性的患者中阳性率分别为39.4%和51.5%,在IgM型类风湿因子(IgM-rheuwatord factor,IgM-RF)、抗角蛋白抗体(anti-keratin antibody,AKA)、抗核周因子(antiperinuclear factor,APF)三者皆阴性的患者中阳性率分别为54.5%和72.7%;(4)与E-RA临床及实验室指标比较显示,抗瓜氨酸化HPVP抗体的阳性组较阴性组疾病活动度DAS28高[IgG(6.3±1.0)vs.(5.6±0.9),P=0.002;IgM(6.2±1.1)vs.(5.6±0.8),P=0.008]、X线Ⅲ期以上改变比例高(IgG 56.1%vs.21.2%,P=0.001;IgM 50.9%vs.29.4%,P=0.036)、抗CCP抗体阳性率高(IgG 96.8%vs.55.3%,P=0.001;IgM 89.6%vs.64.7%,P=0.023)。另外,抗瓜氨酸化HPVP抗体阳性组ESR水平高于阴性组[IgG(70.3±32.4)vs.(51.9±27.8),P=0.004;IgM(67.4±31.5)vs.(53.8±27.7),P=0.035]。结论:抗瓜氨酸化HPVP的IgG型和IgM型抗体在E-RA的诊断中具有较好的敏感性和特异性,尤其对血清阴性患者的诊断有重要的参考价值,该抗体的产生与E-RA患者疾病活动度与关节破坏有关。     

外周血淋巴细胞亚群检测在系统性硬化症治疗中的应用

目的: 检测免疫抑制剂治疗中系统性硬化症 (systemic sclerosis, SSc) 患者外周血T淋巴细胞、B淋巴细胞及自然杀伤 (natural killer,NK) 细胞的表达水平,分析其与临床实验室指标之间的相关性,进而探讨外周血淋巴细胞亚群检测在SSc治疗中的意义。方法: 采用流式细胞术检测使用免疫抑制剂的32例SSc患者(SSc组)和 30例健康对照(healthy control,HC)组外周血T、CD4⁺T、CD8⁺T、B、NK细胞数量及比例,比较SSc组与HC组外周血淋巴细胞亚群的差异,分析外周血淋巴细胞亚群与SSc其他实验室及临床指标之间的相关性。结果: 与HC组相比,SSc组中T、CD4⁺T、CD8⁺T、B、NK细胞数量均明显减少 (P<0.05), 同时,NK细胞占淋巴细胞的百分比也明显降低(P=0.004); 此外,使用免疫抑制剂的SSc患者中65%以上外周血存在各淋巴细胞亚群细胞数量减少。CD4⁺T淋巴细胞数量降低组与正常组相比,其出现雷诺现象的比例明显升高(P=0.024), 红细胞沉降率和C-反应蛋白也明显升高(P<0.001,P=0.018); CD8⁺T淋巴细胞数量降低组与正常组相比,红细胞沉降率明显升高(P=0.022);B淋巴细胞数量降低组与正常组相比,发生指尖溃疡的风险明显增高(P=0.019); NK细胞数量降低组与正常组相比,发生指尖溃疡的风险明显增高(P=0.033),而体内免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)M水平明显降低(P=0.049)。相关性分析可见,红细胞沉降率与总T淋巴细胞(r=-0.455,P=0.009)、CD4⁺T淋巴细胞(r=-0.416,P=0.018)、CD8⁺T淋巴细胞(r=-0.430,P=0.014)、B细胞(r=-0.366,P=0.039)数量呈负相关。结论: ⁺T、CD8⁺T、B及NK细胞数量明显减少,某些淋巴细胞亚群的变化可能与雷诺现象、指尖溃疡的发生有关,与红细胞沉降率、C-反应蛋白呈明显负相关,使用免疫抑制剂治疗SSc中应定期检测外周血淋巴细胞亚群的细胞数量。     

类风湿关节炎相关的HLA-DRβ_1亚型对蛋白激酶A信号的影响

目的　研究类风湿关节炎 (RA)相关的HLA DRβ1基因亚型对细胞内蛋白激酶A(PKA)信号通路的影响。方法　测定HLA DRβ1 0 40 1、 0 40 2、 0 40 3、 0 40 4亚型转基因细胞内PKA、cAMP及腺苷环化酶 (AC)的浓度及活性。结果　RA相关的HLA DRβ1 0 40 1和 0 40 4转基因细胞的PKA活力、cAMP水平及AC活力明显低于HLA DRβ1 0 40 2和 0 40 3转基因细胞 (P值均 <0 .0 1)。结论　RA共同表位QK/RRAA的表达可抑制PKA、cAMP和AC的活性 ,并可能通过干扰细胞内PKA信号通路参与RA的发病     

国内自身抗体检测的现状及质控分析

目的 了解我国自身抗体的检测现状及存在的问题，以提高自身抗体检测的准确率。方法 以自愿参加的方式，通过发函确定73家医院为参与单位。以双盲法检测抗核抗体（antinuclear antibody，ANA）、抗双链DNA抗体（抗dsDNA抗体）、抗可提取性核抗原（extractable nuclear antigen，ENA）抗体、抗线粒体抗体（antimitochondrial antibody，AMA）和抗平滑肌抗体（antismooth muscle antibody,ASMA）。结果 ANA、抗dsDNA抗体、抗ENA抗体、AMA和ASMA的检测正确率分别是86．2％、75．4％、62．7％、100％和61．1％。结论 与2002和2003年的质控相比，各项抗体检测的正确率呈上升趋势，但差异仍然很大．检测的质控需进一步加强。     

抗细胞膜DNA抗体的测定及其在系统性红斑狼疮诊断中的意义

目的建立抗细胞膜DNA(mDNA)抗体测定的方法,研究其在系统性红斑狼疮(SLE)诊断中的敏感性和特异性,以及与SLE临床特点及免疫学异常的关系.方法检测SLE患者、疾病对照组和正常对照组血清中的抗mDNA抗体,并分析SLE患者的各种临床表现及实验室指标与抗mDNA抗体的关系.同时研究细胞膜DNA分子在不同细胞表面的表达,用DNA酶、RNA酶及胰酶鉴定抗原性质.结果抗mDNA抗体在SLE中检测敏感性73.3%(152/207),特异性96.4%,疾病对照组阳性率5.4%(9/167),82名正常对照组均为阴性,抗mDNA抗体阳性率在SLE组明显高于疾病对照组和正常对照组(P＜0.01).抗mDNA抗体在其他自身抗体阴性的SLE患者中有较高的检出率,在抗双链DNA(dsDNA)抗体、抗Sm抗体、快速狼疮因子(DNP)、抗组蛋白抗体(AHA)、抗核小体抗体(AnuA)阴性的SLE患者中抗mDNA抗体的阳性率分别是73.8%、62.7%、65.3%、57.8%和51.6%.该抗体阳性组SLE患者皮疹,脱发,关节痛,白细胞和C3、C4减低及IgG、IgA、IgM升高较为常见,但与SLE患者病情活动指数无关.本文还证实细胞膜DNA在人B细胞、T细胞上均有表达,以Raji细胞株表达较好.用DNA酶预处理的细胞涂片再行检测后膜荧光图形消失,而用RNA酶、胰酶预处理后并不消失,证实其为膜DNA抗原.结论抗mDNA抗体是一种诊断敏感性高、特异性强的SLE血清学指标之一,尤其对抗dsDNA、抗Sm、抗DNP、AHA、AnuA阴性的SLE的诊断有参考意义.     

抗核糖体抗体测定在系统性红斑狼疮患者中的临床意义

目的　探讨抗核糖体抗体 (ribosomeRNPantibody ,rRNP抗体 )在系统性红斑狼疮 (systemiclupuserythemato sus ,SLE)中的临床意义。方法　比较 94例SLE患者与 3 42例其他非SLE结缔组织病患者血清中rRNP抗体的阳性率 ,以及对照分析SLE患者中rRNP抗体阳性者与阴性者临床表现及实验室检查结果的差异。结果　SLE患者rRNP抗体阳性率为 2 1 3 % ( 2 0 /94) ,明显高于其他结缔组织病的总阳性率 3 5 % ( 12 /3 42 ) (P <0 0 1)。SLE患者中 ,rRNP抗体阳性患者中有 5 5 0 % ( 11/2 0 )出现神经精神系统损害 ,明显高于阴性组的 2 3 4% ( 2 2 /94) (P <0 0 1) ,且rRNP抗体阳性组神经系统损害临床表现明显重于阴性组。尿蛋白阳性率在rRNP抗体阳性组为 80 0 % ,明显高于阴性组的 41 9% (P <0 0 5 )。结论　rRNP抗体不仅对SLE的诊断有一定意义 ,而且与患者的中枢神经病变及肾损害有一定关系 ,可能提示病情活动。     

Impact of rheumatoid arthritis-associated HLA-DRβ1 subtypes on protein kinase A signaling

Rheumatoidarthritis (RA )isachronic ,disablinginflammatoryjointdisease ThepathogenesisofRAisassociatedwiththeexpressionofHLA DRβ1 0 4 0 1, 0 4 0 4 , 0 4 0 5 , 0 4 0 8,and 0 10 1subtypes 1　Themolecularbasisforthisassociationisthepresenceofasharedepitope ,aspecificmotifcontainingQKRAA ,QRRAAorRRRAA ,inposition 70 - 74intheHV3regionofHLA DRβ1 1 3 　Thesespecificaminoacidsequencesplayanimportantroleincouplingarthrogenicpeptide ThelatterisrecognizedbyTcellreceptor (TCR)onthecells…