CH-VAD左心辅助装置动物体内实验研究

验证磁悬浮左心辅助装置(CH-VAD)动物体内植入后的安全性及可靠性。选择健康雄性绵羊6只,经麻醉诱导、呼吸插管后开胸,在心脏不停跳的情况下开通由左心尖到辅助装置,再到降主动脉的辅助循环通路。术后常规予以密切监护及抗凝治疗,持续监测装置运行状况,实验动物在术前及术后分别进行细胞学及血液生化指标检测。实验观察结束后,动物予以安乐死,进行尸检及组织病理检查。6例实验动物中:2例因室颤或窒息死亡,1例因肺部感染于20 d终止观察,2例观察至实验结束(60 d)后取材进行病理检查,1例60 d后继续观察并因肺部感染于135 d终止实验。对成功植入的实验动物进行有效观察,装置悬浮状态良好,运转正常;CH-VAD植入后,细胞学及血液生化检查均在正常范围内。尸解及组织病理检查发现:2例存活 20和135 d的动物,出现肺炎和肾脏多发性梗死;2例存活 60 d的动物,出现肾脏单发小梗死,其余脏器未见明显异常。该实验为CH-VAD临床前评价及临床操作提供理论及技术支持,并证明其具有相对稳定的工作性能;提出建立左心辅助装置临床前评价标准的思路和想法,为后期装置的植入及临床操作提供研究的方向。     

超声造影团注法注射一过性右心扩大的实验研究

目的:观察SonoVue~(TM)超声造影剂(UCA)在实验猪团注法超声造影时出现的一过性右心扩大现象,并探讨其发生的可能机制及原因。方法:24只健康中华小型猪,按注射的造影剂剂量进行分组,即2 ml组、1 ml组和0.5 ml组,每组8只。采用团注SonoVue,然后5 ml生理盐水冲管的方法进行超声造影,运用超声心动图留取心脏基线参数并检测造影时心脏结构和功能的变化。以出现右心扩大、左心被压现象为行下一步注射的判断标准,待右心大小及功能完全恢复至基线水平后进行再次注射。每组分别依次以造影剂基线浓度、稀释2倍、4倍、6倍注射。结果:2 ml组不同注射浓度出现一过性右心扩大的只数分别为7、6、4、3;1 ml组不同注射浓度出现该现象的只数分别为6、5、3、1;0.5 ml组不同注射浓度出现该现象的只数分别为5、5、2、0;三组比较差异有统计学意义(P0.001)。各组间比较可见,随着造影剂注射剂量减少、浓度减低,出现右心扩大的现象明显减少。该现象约在注射造影剂(26±15)s后出现,持续时间(47±21)s。结论:以中华小型猪为实验动物,团注法行超声造影时,易出现一过性右心扩大现象,推测其可能与注射造影剂的浓度、剂量、注射方法及动物品种有关。     

动态CT心肌灌注成像评价猪冠状动脉微循环障碍模型的实验研究

目的:探讨动态CT心肌灌注成像(CT-MPI)定量指标评价猪冠状动脉微循环障碍(CMD)模型的价值。方法:10只实验中华小型猪,麻醉后经股动脉选择性插管,通过导丝缓慢注入左前降支远段1 ml微球混合液(含微球0.5×10⁵/0.5 ml),建立CMD模型。分别于建模前60 min及建模后10 min行CT-MPI静息态和负荷态扫描。测量CT-MPI的定量指标,包括心肌血流量(MBF)、心肌血容量(MBV)。以实验猪建模前后CT-MPI指标的变化为自身参照标准,采用配对样本t检验比较建模前后静息和负荷状态下MBF、MBV的差异。之后处死动物并行病理检查证实CMD心肌节段。结果:8只猪完成实验(2只猪于建模时死亡)。CMD区静息MBF、MBV分别为(98.6±20.9)ml·100 ml^-1·min^-1、(9.0±2.8)ml/100 ml;负荷MBF、MBV分别为(87.6±14.6)ml·100 ml^-1·min^-1、(8.0±1.8)ml/100 ml。CMD区静息和负荷MBF及MBV与非CMD区比较均减低(P<0.001)。HE染色低倍镜下显示损伤心肌与正常心肌并存,高倍镜下显示心肌细胞质黏附,嗜酸性粒细胞增多,心肌细胞排列疏松,细胞核部分出现皱缩以及心肌细胞间质水肿。结论:本研究通过动态CT-MPI评价CMD动物模型,表明CMD心肌节段在静息和负荷状态下的MBF值和MBV值均较造模前明显减低,MBF、MBV变化值可作为动态CT-MPI评价CMD的定量指标。     

腺苷负荷动态CT心肌灌注定量评价冠状动脉微循环的实验研究

目的 观察腺苷对心肌灌注的影响，对比腺苷负荷前后心肌灌注变化，并得出定量指标。方法 对10只中华小型猪依次行静息态及负荷态动态CT心肌灌注成像（CT-MPI），测量左心室心肌17个节段、右冠状动脉（RCA）、左前降支（LAD）及回旋支（LCx）3支血管支配心肌，基底部、中间部、心尖部（包括心尖）3个区域及心肌各壁所属节段心肌血流量（MBF）、心肌血容量（MBV）、达峰时间（TTP）及组织通过时间（TTT）。将心肌节段分为静息组和负荷组，比较组间MBF、MBV、TTP及TTT差异。通过腺苷负荷后心肌血流灌注量化指标改变，观察腺苷对冠状动脉微循环的负荷效能。结果 静息组MBF、MBV、TTP及TTT分别为（199.82±66.24）ml/（100 ml·min）、（15.71±5.58）ml/100 ml、（6.38±2.03）s及（13.39±4.91）s；负荷组分别为（278.87±123.24）ml/（100 ml·min）、（20.91±7.66）ml/100 ml、（5.83±1.68）s及（12.53±4.49）s。相比静态组，负荷组MBF、MBV显著升高、TTP缩短（t=8.757、7.738、3.367，P均<0.05），2组TTT差异无统计学意义（t=1.743，P>0.05）。结论 腺苷可增加心肌小型猪血流灌注、缩短灌注TTP；结合动态CT-MPI，可定量分析负荷前后心肌灌注变化及程度。正常心肌组织灌注储备不受腺苷影响。     

心腔内超声心动图等方法在经导管主动脉瓣膜植入手术实验中评价主动脉瓣环直径的比较研究

目的:探讨心腔内超声心动图(ICE)、经胸超声心动图(TTE)及多层螺旋计算机断层摄影术(MSCT)测量中华小型猪主动脉瓣环直径的差异,为经导管主动脉瓣膜植入术选择最佳的人工瓣膜型号的影像学方法。方法:12只中华小型猪分别采用ICE、TTE及MSCT测量主动脉瓣环直径,比较三种方法测量的准确性和一致性,以及三种方法测量结果在人工瓣膜型号选择方面的差异。结果:ICE、TTE和MSCT测量的瓣环直径分别为(23.69±0.83)mm、(22.91±1.11)mm和(23.81±0.76)mm,测量结果之间具有显著的差异(配对t检验)。不过Bland-Altman分析的结果提示TTE测量的结果较MSCT有显著的偏小趋势(差值均数:-0.91 mm,一致性界限:-2.78~0.97 mm),而ICE不存在这种趋势。使用三种方法指导人工瓣膜型号选择时,ICE结果与MSCT有很好的一致性(Kappa=1.000),而TTE选择的瓣膜尺寸在33.3%(4/12)的动物较MSCT结果偏小一个型号。结论:对于经导管主动脉瓣膜植入手术术前的主动脉瓣环测量,ICE与MSCT的结果一致性更好,TTE的结果则有低估瓣环直径的趋势,在一定的瓣膜选择策略下,ICE与MSCT的结果对瓣膜的选择具有很好的一致性,而TTE的结果易造成人工瓣膜的型号偏小。     

局部应用辛伐他汀和机械预处理方法预防静脉移植物再狭窄的研究

目的 探究局部应用辛伐他汀和机械预处理方法对静脉移植物内膜增生的影响及机制。方法 在体实验选用新西兰兔12只，随机分为4组：空白对照组、辛伐他汀局部处理组、机械预处理组、药物机械联合预处理组，每组3只。超声评价移植物管壁改变和移植物内血流速度，病理切片评价血管内膜增生情况。体外实验培养人脐血管内皮细胞，设辛伐他汀组和溶剂对照组，检测YAP磷酸化、下游靶基因表达量和细胞增殖情况。结果 血管超声显示除辛伐他汀局部处理组外，其它3组术后21 d静脉移植物内流速均较术后7 d明显升高（P<0.01）。病理切片显示辛伐他汀局部处理组、机械预处理组、药物机械联合预处理组、空白对照组的新生内膜厚度分别为：（45.56±4.11）μm、（201.28±16.71）μm、（143.57±7.82）μm、（249.45±13.33）μm，与空白对照组相比差异均有统计学意义（P<0.05）。体外实验结果显示，与溶剂对照组相比，高浓度辛伐他汀（5 mmol/L）组细胞死亡，低浓度辛伐他汀（2.5 mmol/L）组细胞增殖受抑制（P<0.05），辛伐他汀组YAP蛋白表达量不变，磷酸化YAP蛋白...     

缺血后适应对大鼠移植心脏心肌细胞凋亡的影响

目的:观察缺血后适应对大鼠移植心脏缺血再灌注时心肌细胞凋亡及对抗凋亡基因Bcl-2(简称Bcl-2)、凋亡基因Bax(简称Bax)蛋白表达的影响。方法:30只Lewis大鼠随机分成3组,每组10只,供体、受体各5只。假手术组:仅行腹部开关手术,不行心脏移植;模型组:行心脏移植术;后适应组:行心脏移植手术,心脏复灌前进行缺血后适应,即再灌注10 s、关闭10 s,循环3次。实验结束后取心肌标本行生物素切口末端标记法(TUNEL)检测,并采用蛋白免疫印迹(Western Blot)方法检测Bcl-2、Bax蛋白表达。结果:假手术组无心肌细胞凋亡,后适应组心肌细胞凋亡指数明显低于模型组,差异有统计学意义(P<0.01)。Western Blot显示:模型组Bcl-2、Bax蛋白表达水平与假手术组比升高(P<0.05);后适应组Bcl-2蛋白表达水平与模型组相比明显升高(P<0.01),而Bax蛋白表达水平降低(P<0.05),差异均有统计学意义。结论:缺血后适应对大鼠移植心脏缺血再灌注心肌能够上调Bcl-2蛋白表达、下调Bax蛋白表达,并可减少缺血再灌注引起的心肌细胞凋亡。