日本血吸虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂干预脂多糖诱导的小鼠脓毒症

目的探讨日本血吸虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂（SjCystatin）对脂多糖（LPS）诱导的小鼠脓毒症的干预效果。方法54 只 BALB/c小鼠适应性饲养1 周后,随机分为正常对照组(PBS 组,A组)、脓毒症造模组（PBS+LPS组,B组）、蛋白干预组（PBS+ LPS+SjCystatin组,C组）。A组腹腔注射PBS（100 μL）,B组、C组腹腔注射含LPS（10 mg/kg）的PBS（100 μL）,其中C组小鼠于 注射LPS后30 min腹腔注射含25 μg SjCystatin蛋白的PBS（100 μL）。每组随机抽取10只,造模后24 h取小鼠血清及肝、肺、肾 组织,酶联免疫吸附试验（ELISA）验检血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10（IL-10）水平,全自 动生化分析仪检测ALT、AST、BUN和Cr水平;肝、肺和肾组织HE染色观察其病理损伤;每组余8只小鼠,造模后记录小鼠72 h 生存率的差别且观察小鼠状态的改变。结果3组小鼠的72 h生存率具有统计学差异（P<0.05）,与A组（100%）相比,B组（0%） 72 h生存率降低（P<0.05）,经过SjCystatin蛋白治疗后,C组生存率较B组增高（36%）。与A组相比,B组肝、肺、肾组织切片病理 损伤加重,血清中ALT、AST、BUN、Cr、IL-6、TNF-α水平明显升高（P<0.05）;与B组相比,C组调节因子IL-10水平明显升高,肝、 肾、肺组织损伤明显减轻,且血清中上述肝肾功能检测指标及促炎因子水平明显降低（P<0.05）。结论SjCystatin对LPS诱导的 脓毒症有显著的治疗作用。     

胚胎学数字化资源库在显微数码互动实验室的应用

胚胎学数字化资源库的应用包括：（1）实验教学录像的应用;（2）实验教学多媒体课件的应用;（3）数字化资源和传统实验教学相结合的应用.和传统实验教学相比,通过胚胎学数字化资源库在显微数码互动实验室的应用,学生观看模型的结构更清楚,重点知识更明确,教学资源更丰富,最终改革实验教学,提高教学质量.     

旋毛虫成虫排泄?分泌蛋白对卵清蛋白诱导的小鼠变应性鼻炎的保护作用

目的　探讨旋毛虫成虫排泄?分泌蛋白（Adult?worm excretory?secretory protein, AES）对卵清蛋白（Ovalbumin, OVA）诱导的小鼠变应性鼻炎的保护作用。方法　18只雌性BALB/c小鼠随机分为3组：A组为空白对照组，B组为变应性鼻炎组，C组为AES治疗组。A组小鼠给予PBS；B组小鼠经腹腔注射抗原佐剂混悬液进行基础致敏，隔日1次，共7次，后以5% OVA溶液滴鼻进行局部激发，每日1次，共7次，诱导建立变应性鼻炎模型；C组小鼠在诱导变应性鼻炎基础上，于基础致敏和局部激发时分别加入25 μg AES进行干预。末次激发后观察各组小鼠30 min，并进行行为学评分；采用酶联免疫吸附试验检测小鼠血清中IFN?γ、IL?4、IL?5、IL?10及TGF?β水平变化，HE染色后镜下观察小鼠鼻黏膜病理改变。结果　3组小鼠行为学评分差异有统计学意义（F = 110.12, P < 0.01）；B组小鼠行为学评分显著高于A组[（7.17 ± 0.75）分和（1.33 ± 0.52）分，P < 0.01]，且鼻黏膜病理损伤更为显著；经AES治疗后，C组小鼠行为学评分[（3.83 ± 0.75）分]显著下降（P < 0.01），鼻黏膜病理损伤亦显著缓解。3组小鼠血清中IFN?γ水平差异有统计学意义（F = 7.50，P < 0.01），B组小鼠血清中IFN?γ水平显著低于A组（P < 0.05）；经AES治疗后，C组小鼠血清中IFN?γ水平较B组显著升高（P < 0.05）。3组小鼠血清中IL?4 （F = 470.81，P < 0.01）、IL?5水平（F = 68.20，P < 0.01）差异均有统计学意义，B组小鼠血清中IL?4、IL?5水平均显著高于A组（P均 < 0.01）；经AES治疗后，C组小鼠血清中IL?4、IL?5水平均较B组显著降低（P均 < 0.01）。3组小鼠血清中IL?10（F = 174.91，P < 0.01）、TGF?β水平（F = 9.39，P < 0.01）差异均有统计学意义；经AES治疗后，C组小鼠血清中IL?10、TGF?β水平均显著高于B组（P均 < 0.05）。结论　旋毛虫AES对OVA诱导的小鼠变应性鼻炎有显著的保护作用。     

重症疱疹样脓疱病1例

1病例资料患者,女,20岁,因全身起皮疹伴瘙痒3 d于2011年10月5日就诊。发疹前1周因中止妊娠手术而使用过帕珠沙星和奥硝唑。既往无药物过敏史和银屑病史。入院时检查:一般情况良好,无发热。皮肤检查:躯干及四肢近端为弥漫性水肿性红斑,皮疹颜色呈暗红色或暗红带黑色,压之褪色或褪色不全。皮疹由躯干向上蔓延至上胸部锁骨、双上臂上     

NF-κB特异性抑制剂PDTC对鼠黑素瘤B16细胞增殖及VEGF表达的影响

目的:探讨核因子-κB(NF-κB)特异性抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)对鼠黑素瘤B16细胞增殖及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:不同浓度的PDTC作用于B16细胞不同时间后,MTT法测定其对B16细胞增殖的抑制率,ELISA检测PDTC作用下B16细胞VEGF的表达情况。结果:经PDTC处理的实验组,肿瘤细胞增殖活性明显受到抑制(P0.01);与对照组相比,PDTC作用后B16细胞VEGF表达降低(P0.01)。结论:PDTC具有显著抑制鼠黑素瘤B16细胞生长及VEGF表达的作用,是一种有潜力的抑制黑素瘤增殖的药物。     

旋毛虫成虫排泄?分泌蛋白对卵清蛋白诱导的小鼠变应性鼻炎的保护作用

目的　探讨旋毛虫成虫排泄?分泌蛋白（Adult?worm excretory?secretory protein, AES）对卵清蛋白（Ovalbumin, OVA）诱导的小鼠变应性鼻炎的保护作用。方法　18只雌性BALB/c小鼠随机分为3组：A组为空白对照组,B组为变应性鼻炎组,C组为AES治疗组。A组小鼠给予PBS;B组小鼠经腹腔注射抗原佐剂混悬液进行基础致敏,隔日1次,共7次,后以5% OVA溶液滴鼻进行局部激发,每日1次,共7次,诱导建立变应性鼻炎模型;C组小鼠在诱导变应性鼻炎基础上,于基础致敏和局部激发时分别加入25 μg AES进行干预。末次激发后观察各组小鼠30 min,并进行行为学评分;采用酶联免疫吸附试验检测小鼠血清中IFN?γ、IL?4、IL?5、IL?10及TGF?β水平变化,HE染色后镜下观察小鼠鼻黏膜病理改变。结果　3组小鼠行为学评分差异有统计学意义（F = 110.12, P < 0.01）;B组小鼠行为学评分显著高于A组[（7.17 ± 0.75）分和（1.33 ± 0.52）分,P < 0.01],且鼻黏膜病理损伤更为显著;经AES治疗后,C组小鼠行为学评分[（3.83 ± 0.75）分]显著下降（P < 0.01）,鼻黏膜病理损伤亦显著缓解。3组小鼠血清中IFN?γ水平差异有统计学意义（F = 7.50,P < 0.01）,B组小鼠血清中IFN?γ水平显著低于A组（P < 0.05）;经AES治疗后,C组小鼠血清中IFN?γ水平较B组显著升高（P < 0.05）。3组小鼠血清中IL?4 （F = 470.81,P < 0.01）、IL?5水平（F = 68.20,P < 0.01）差异均有统计学意义,B组小鼠血清中IL?4、IL?5水平均显著高于A组（P均 < 0.01）;经AES治疗后,C组小鼠血清中IL?4、IL?5水平均较B组显著降低（P均 < 0.01）。3组小鼠血清中IL?10（F = 174.91,P < 0.01）、TGF?β水平（F = 9.39,P < 0.01）差异均有统计学意义;经AES治疗后,C组小鼠血清中IL?10、TGF?β水平均显著高于B组（P均 < 0.05）。结论　旋毛虫AES对OVA诱导的小鼠变应性鼻炎有显著的保护作用。     

亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与2型糖尿病的相关性

目的：探讨亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）基因C677T和A1298C多态性与2型糖尿病（T2DM）的关系。方法：选取106例T2DM患者（病例组）和109名健康对照个体（对照组）,采用聚合酶链反应一限制性片段多态性分别检测C677T和A1298C多态位点等位基因频率和基因型并统计分析。结果：2组MTHFR基因C677T和A1298C位点基因型和等位基因频率比较差异均无统计学意义（P〉0．05）,T2DM发病中2个突变位点之间没有协同作用（P〉0．05）。结论：MTHFR基因C677T和A1298C多态位点与T2DM的易感性无明显的相关性。     

流式细胞术检测人外周血产生IL-22的淋巴细胞亚群及其在结核病患者中的应用

目的建立用流式细胞术(FCM)检测人外周血产白细胞介素22(IL-22)的不同淋巴细胞亚群的方法,并探讨其在结核病(TB)患者中的应用,以了解产IL-22的淋巴细胞亚群在抗结核感染免疫中的作用。方法采集22例TB患者和18名健康对照者外周血,与相同体积RPMI-1640培养液混匀,加入佛波醇酯(PMA)和钙离子霉素,混匀后于37℃5%CO2静置培养2 h,再加入莫能霉素后继续培养4 h,收集细胞,用荧光素标记进行细胞表面抗原和胞内细胞因子染色,用FCM检测表达IL-22、IL-17的不同淋巴细胞亚群比例。结果 PMA浓度为100 ng/mL,钙离子霉素浓度为1μg/mL,刺激培养2 h可最有效刺激IL-22的产生;TB患者外周血中产IL-22的γδT细胞比例(7.37%)明显高于正常人(1.81%,P<0.05),而在CD4+T、CD8+T、自然杀伤(NK)细胞和B细胞等其他细胞亚群中,产IL-22的阳性细胞比例在TB患者和健康对照者之间差异无统计学意义(P>0.05);Th22和Th17细胞比例在TB患者和健康对照者之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论建立了一套简便、完整、可靠的FCM检测产IL-22的淋巴细胞亚群的方法,产IL-22的γδT细胞在抗结核感染免疫中可能发挥免疫效应。     

旋毛虫及其虫源性蛋白对盲肠结扎穿孔诱导的小鼠脓毒症的影响

目的观察旋毛虫及其虫源性蛋白对盲肠结扎穿孔（CLP）诱导的小鼠脓毒症的影响。方法80只雄性BALB/c小鼠随机 分为假手术组、CLP组、旋毛虫肌幼虫（ML）预感染组、旋毛虫肌幼虫虫体可溶性蛋白（SMP）处理组和排泄分泌蛋白（MES）处理 组。ML预感染组于术前28 d经口感染300条旋毛虫肌幼虫,其余各组分别于术后30 min腹腔注射PBS或SMP（25 μg/只）或 MES（25 μg/只）。观察小鼠术后状态和72 h生存率,检测术后12 h小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移 酶（AST）、尿素氮（BUN）和肌酐（Cr）水平及TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10、TGF-β水平,观察小鼠肝和肾组织病变。结果与假手术 组相比,CLP组72 h生存率降低,血清中ALT、AST、BUN和Cr水平及细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10和TGF-β水平均明显 升高（P<0.05）。肝中肝索排列紊乱,肝细胞水肿,肾中部分血管球皱缩,肾小管细胞水肿。与CLP组相比,ML预感染组血清中 ALT、AST、Cr、TNF-α和IL-1β水平降低,IL-10和TGF-β水平升高（P<0.05）;SMP处理组血清中ALT、AST、Cr、TNF-α和IL-1β水 平降低,TGF-β水平升高（P<0.05）;MES处理组72 h生存率明显升高,血清中ALT、AST、BUN、Cr、TNF-α、IL-6和IL-1β水平明显 降低,IL-10和TGF-β水平明显升高（P<0.05）,肝和肾组织结构损伤明显减轻。结论旋毛虫及其虫源性蛋白可减少CLP诱导的 脓毒症小鼠血清中促炎因子的释放,促进免疫调节因子的释放,其中MES效果更为显著,并能减轻肝和肾结构和功能的损伤。     

小胶质细胞在VPA孤独症模型大鼠脑增龄过程中的变化

目的:检测小胶质细胞在孤独症发病相关脑区的活化改变,探讨小胶质细胞在孤独症发病中的作用。方法:免疫组织化学技术检测丙戊酸盐(valproic acid sodium salt,VPA)孕鼠注射法建立的子代孤独症模型大鼠脑内小胶质细胞在不同周龄时前额叶皮层,海马及小脑中的活化改变;Western Blot检测小胶质细胞内电离钙绑定衔接分子-1(ionized calcium binding adaptor molecule-1,Iba-1)的表达。结果:小胶质细胞免疫组化染色显示:与正常组相比,VPA模型组大鼠不同脑区小胶质细胞的数量和密度增多,胞体增大、突起的长度和直径均增加,表明小胶质细胞的活化现象明显。Western Blot检测显示:孤独症VPA模型组前额叶皮层、海马、小脑内Iba-1的表达不同程度高于正常对照组(P0.05),同样印证小胶质细胞在VPA模型组大鼠不同脑区的活化改变。结论:小胶质细胞的活化改变广泛存在于孤独症大鼠脑内,这可能是导致孤独症脑神经元发育与连结异常及脑内神经炎症病理过程的部分原因。