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应用地高辛标记探针原位杂交法和单克隆抗HCV-NS3-HRP建立直接酶标免疫组化法分别测定52例肝炎患者肝组织HCVRNA和HCAg-NS3。结果抗HCV阳性组HCVRNA检出率57.1%(16/28),HCAg-NS3检出率53.6%(15/28);抗HCV阴性组其两项检出率均为12.5%(3/24)。肝组织中HCVRNA阳性物呈蓝紫色细小颗粒存在于肝细胞核或胞浆内,其在肝小叶中的分布可分为3型,即弥漫型、局灶型、散在型。肝组织中HCAg-NS3阳性物呈棕黄色细小颗粒分布于肝细胞核或胞浆内,以单个或数个阳性细胞散布于肝小叶中。23例HCVRNA或/和HCAg-NS3阳性病例以肝炎后肝硬化(LC)病例占多数(14/23),其次为慢性重型肝炎(CSH)和中度慢性肝炎(CAH)。此两种检测方法具有较高符合率(90.4%,47/52),表明病毒核酸及其表达产物均存在于肝细胞内,与HCV感染密切相关。这为HCV感染诊断提供了直接依据,有利于研究HCV感染中病毒复制、慢性化进程、抗病毒治疗监测及重叠感染时病毒相互关系。 相似文献
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地高辛素标记探针原位杂交法检测肝及肝外组织中的TTV DNA 总被引:4,自引:1,他引:3
1997年底,日本学者报道了一种与肝功能异常有关的新型病毒,并将之命名为输血传播病毒(transfusiontransmittedvirus,TTV)[1]。为了解我国病因不明患者肝及肝外组织中TTV感染状况,我们采用原位杂交的方法进行了检测,现报道如下。一、对象与方法1标本来源:选自北京佑安医院1996~1999年经血清学方法及肝组织的免疫组织化学法检测,排除了甲~庚型肝炎病毒感染的27例患者的肝穿组织。患者年龄20~68岁,男19例,女8例,均无饮酒史、自身免疫疾病及药物史。另又选取8例1990~1997年收集的非甲~庚的慢性肝病死亡病… 相似文献
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肝组织中HBsAg,HBcAg与临床分型的关系 总被引:1,自引:0,他引:1
我们对61例不同临床类型的乙型肝炎及肝硬化患者作了乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和核心抗原(HBcAg)的免疫组化染色,就其检出率、在肝细胞内的形态特点、与临床分型的关系作了初步分析。 1 材料和方法 1.1 病例 选自北京佑安医院病理科1989~1994年活检及尸检标本61例,依据全国第六届病毒性肝 相似文献
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对40例经临床及肝穿刺病理诊断的 HBsAg 阳性及 HBeAg 阳性的慢性病毒性肝炎病例的 e 系统追踪4~25月。12例出现抗 HBe 转化,12例 HBeAg 阴转,其余16例 HBeAg 持续阳性,据此分三组观察。结果表明:向抗 HBe 转化组中血清 HBsAg 滴度低于 HBeAg 阳性持续组(P<0.05),而其急性期 SGPT 水平则高于后者(P<0.01),该组病人多有急性肝炎病史。在缓解期,该组病例约有半数表现临床症状、肝功能、DNA-P 活性等全面好转,血消 HBsAg 阴转或转为低滴度,其近期预后明显优于 HBeAg 阳性持续组。对慢性乙型肝炎病程中出现 HBeAg 向抗-HBe 转化的有关因素、临床特点和转归问题进行了分析和讨论。 相似文献
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定量聚合酶链反应检测慢性乙型和丁型肝炎患者血清HBV DNA 总被引:1,自引:0,他引:1
本研究应用新型定量PCRHBV检测法—AcuGenAmplisensorTMHBV法对70例慢性乙型与丁型肝炎病例进行血清HBVDNA水平测定,观察乙肝在丁肝病毒重叠感染时是否对HBVDNA复制存在抑制作用。实验结果:乙肝组(34例)及丁肝组(36例)定量PCR测HBVDNA阳性率为88.2%(30/34)和91.7%(33/36)(P>0.05)。乙肝组HBeAg阳性与抗HBe阳性病例之HBVDNA复制水平无明显差异;而丁肝组则表现明显性差异(P<0.01)。结果提示:本组丁肝重叠乙肝感染病例中血清HBVDNA复制被抑制的现象并不明显,其中HBeAg阳性病例HBVDNA大多处于高水平复制状态;而抗HBe阳性病例则以低水平复制为主,提示肝炎病情活动和慢性化趋向与病毒复制有密切关系,定量PCR检测HBVDNA的技术可以为该领域研究提供有效手段。 相似文献
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非甲-非庚型肝炎患者血清及肝组织中TT病毒DNA的检测 总被引:2,自引:0,他引:2
1997年底 ,日本学者报道了一种与肝功能异常有关的DNA病毒 ,并命名为TT病毒 (TTV) [1] 。为了解我国病因不明肝炎患者中TTV感染状况 ,我们采用聚合酶链反应(PCR)和原位杂交的方法检测了血清及肝组织中TTV表达情况 ,现报道如下。一、研究对象及标本来源患者年龄 2 0~ 6 8岁 ,男 19例 ,女 8例 ,均无饮酒史 ,自身免疫疾病及药物肝损史等。肝组织标本 2 7份选自北京佑安医院 1996~ 1999年不明原因肝炎患者活检肝组织 (两例有随访 ) ,组织经甲醛固定 ,石蜡包埋 ,5 .0 μm厚连续切片备检。同时采集相应的血清标本冻存于 - 2 0… 相似文献
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构建含适当限制酶切位点的adr 亚型乙肝病毒(HBV) 中蛋白基因克隆,比较分析序列变化,用作HBV 疫苗表达及诊断试剂的研究。患者血清经蛋白酶K 消化,再以酚 氯仿抽提,对提取物进行PCR 扩增。回收PCR 阳性产物,经琼脂糖酶消化后直接克隆至T 载体。转化后提取质粒经PCR 及酶切鉴定,再行序列分析。结果:10 份血清提取物的PCR 有3 份获阳性产物,分别经T 载体克隆后转化DH10b 菌,3 株阳性克隆经酶切及序列分析显示同属于adr 亚型,与国内已发表序列的同源性大于99 .6 % 。提示该克隆是用作HBsAg 蛋白表达或探针标记研究的理想克隆。 相似文献
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以单克隆抗-HCV-NS3直接酶标法对石蜡包埋肝组织中丙型肝炎病毒抗原(HCAg-NS3)进行测定,该抗体系应用基因重组表达丙肝抗原(HCV-NS3区-C33-C)免疫小鼠并通过细胞融合术后获得。49例病毒性肝炎患者肝组织测定结果,抗-HCV阳性组的HCAs-NS3检出率为51.9%(14/27),抗-HCV阴性组为13.6%(3/22),两组有显著性差异(P<0.01),以慢性重症肝炎和肝硬化患者检出率最高,HCAg-NS3阳性物在肝细胞的胞核或胞浆中均可见,呈棕黄色细小颗粒状,以核型居多。直接酶标法测定HCAg与原位杂交法测定HCVRNA的比较,其符合率为81.6%(40/49)。本项技术具有简便、快捷、特异性、敏感性佳、图象清晰等优点,易于推广应用,为HCV感染的临床和发病机理研究提供重要检测手段。 相似文献
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目的 应用丙型肝炎病毒(HCV)聚合酶链反应杂交酶联法(HCV-PCR-H ELISA)152份各型肝炎血清进行HCV RNA测定和分析。方法 利用标记生物素的寡核苷酸引物对患者血清进行PCR扩增,扩增产物与结合在微孔反应板的HCV特异探针快速杂交,通过抗生物素-酶联反应判定结果。结果 152份肝炎患者中,HCV RNA的检出率为57.9%(88/152),其中抗-HCV阳性组的检出率为81.8%(72/88)。抗-HCV与HCV RNA的总符合率为78.9%(120/152)。对5例丙型肝炎患者应用α干扰素治疗者追访显示,HCVRNA的消长与抗病毒药物疗效一致。结论 HCV-PCR-H ELISA方法简便、稳定、敏感、特异,为半定量指标,可应用于HCV感染的临床诊断和抗病毒药物疗效判定。 相似文献