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目的建立海产品中副溶血弧菌检测的双重荧光定量PCR体系。方法针对副溶血弧菌种特异性基因tlh和tdh设计引物和TaqMan探针,建立双重荧光定量PCR体系,进行特异性与敏感性研究;利用该体系检测海产品中的副溶血弧菌。结果副溶血弧菌可得到特异性扩增,而其它与副溶血弧菌共存于海产品中的细菌均未见扩增曲线。副溶血弧菌与其它细菌的混合DNA检测表明,其它细菌基因组的存在时并不干扰副溶血弧菌检测。副溶血弧菌典型菌株FJ14和BJ97的敏感性试验显示,该体系的最低检测DNA浓度分别为49.8pg与77.8pg,最低检测细菌浓度为56CFU/mL和371CFU/mL。对舟山菜市场采集的50份样本检测表明,32份为tlh基因阳性,3份为tdh基因阳性,与传统方法的检测结果相同。结论与传统检测方法相比,副溶血弧菌的双重荧光定量PCR检测方法快速准确,结果直观。 相似文献
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弧菌显色培养基对副溶血弧菌检测效果的初步评估 总被引：2，自引：0，他引：2
目的评估弧菌显色培养基对副溶血弧菌检测效果。方法通过弧菌显色培养基(chromID Vibrio)同硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖(TCBS)琼脂培养基进行比对,采用阳性菌株污染、人工污染样品和实际样品检测的方法,对chromID Vibrio的灵敏性、特异性和检测效果进行了初步评价。结果得到粉红色副溶血弧菌典型菌落;阳性菌株污染中,在稀释度为10-7CFU/ml时,chromID Vibrio能检测出目标菌,而TCBS平板未能检测;对人工污染样品,稀释度10-8CFU/ml chromID Vibrio有检出、TCBS平板未检出;对采集的150份实际样品进行检测,用ChromID Vibrio方法检出副溶血弧菌12株,比TCBS方法检出的检测效率高。结论chromID Vibrio灵敏性和TCBS相当,并具有较好的特异性,大大提高副溶血性弧菌的检测效率。 相似文献
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