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1.
用EBV LMP2A重组痘苗病毒 (rVV LMP2A )转染人树突状细胞 (DC ) ,转染后的DC分别在第 1、 7、 14天刺激相同MHC背景的T细胞 ,在IL 2作用下诱导LMP2A特异性CTL。用LDH释放法检测CTL杀伤活性 ;流式细胞术 (FACS )检测CTL诱导分化过程中CD3+ 、CD4 + 、CD8+ 、CD5 6 + 等细胞的分群变化 ;RT PCR检测细胞分化过程中FasLmRNA表达 ;生物活性法检测功能性细胞因子IFN γ的分泌。结果显示本法诱导的CTL对靶细胞有特异性杀伤活性 ,第 2次和第 3次DC刺激后杀伤活性有所上升 ;在CTL诱导分化的第 7、 14、 2 1天细胞分群以CD4 + 、CD8+ 细胞为主 ;RT PCR证实所诱导的细胞内有FasLmRNA的表达 ;随细胞培养天数的增加IFN γ分泌增加 ,在第 14天达到较高水平。研究表明重组痘苗病毒载体rVV LMP2A转染的DC刺激T细胞可诱导出EBV LMP2A特异性CTL。 相似文献
2.
目的 探讨合并糖调节受损早发稳定型冠心病(PSCHD)患者(〈50岁)循环炎症指标与动脉粥样硬化(AS)特征。方法将208例PSCHD患者分为糖调节正常(NGR)组和糖调节受损(IGR)组,分析其临床和生化资料。结果IGR组的BMI、TG、尿酸(UA)、高敏C反应蛋白(hsDRP)、WBC计数、颈动脉内膜中层厚度(IMT)值和斑块比例、代谢综合征和高血压患病率、冠状动脉斑块积分以及多支病变比例均高于NGR组;hsC-RP与WBC计数、BMI及TG正相关,与HDL-C负相关;WBC计数与BMI及UA正相关;P均〈0.05或〈0.01。结论合并IGR的PSCHD患者循环炎症指标和AS程度均显著增加。 相似文献
3.
目的:用EBV潜伏膜蛋白2A(EBV-LMP2A)重组腺病毒转染树突状细胞(DC)激发特异性细胞毒性T细胞(CTL),分析CTL的特性。方法:用AdS-LaMP2A重组腺病毒转染EBV健康携带者及鼻咽癌患者的DC,与自体来源的外周血单个核细胞(PBMC)混合培养,激发LMP2A特异性CIL。用LDH释放法检测CIL杀伤活性;流式细胞术(FACS)检测培养细胞群体中CD3^ 、CD4^ 、CD8^ 、CD56^ 细胞的组成;生物活性法检测细胞培养上清中IFN-γ含量;RT-PCR分析CTL的FasL mRNA表达。结果:EBV健康携带者及鼻咽癌患者的PBMC,经AdS-LMP2A转染的自体DC两次刺激后,都能诱导出显著的EBV-LMP2A特异的CIL。EBV健康携带者CTL的杀伤活性,随DC刺激次数的增加而逐渐增强,诱导的CTL细胞群体以CD^4 和CD8^ 细胞组成为主,且CD4^ 细胞比例高于CD8^ 细胞,另含少量CD56^ 细胞;在不同时段所诱导的CTL上清中,均含一定量的IFN-γ并随刺激次数和诱导时间的延长呈上升趋势;RT-PCR研究表明,所诱导的CTL有FasL mRNA的表达。结论:以腺病毒载体介导EBV-LMP2A基因转染的成熟DC,在体外能激发较强的LMP2A特异的功能性CTL,可用于EBV相关NPC的免疫治疗。 相似文献
4.
通过EB病毒LMP2A重组痘苗病毒转染的DCS体外诱导LMP2A特异性CTL,并通过GM-CSF、IL-4和TNF-a培养体系,我们诱导出了人外周血单核细胞来源的DC。同时选用在鼻咽癌患者中表达的EB病毒潜伏蛋白之一LMP2A作为靶基因,利用重组痘苗病毒转染诱导的DCS。DCS与自体PBMCS混合培养,在IL-2的刺激作用下获得特异性CTL。结果如下:1.人外周血单核细胞经GM-CSF、IL-4、TNF-a的混合培养,10天可获得成熟的功能性DCS。FACS检测显示DC表面相对特异性标志CD83… 相似文献
5.
痘苗病毒载体介导爱泼斯坦-巴尔病毒潜伏期膜蛋白2A基因转染树突状细胞对其功能的影响 总被引:3,自引:1,他引:2
目的:探讨痘苗病毒载体介导爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)潜伏期膜蛋白2A(LMP2A)基因转染树突状细胞(DC)对DC的表型和功能的影响,以及EBV相关肿瘤免疫治疗性疫苗的可行性,方法:用EBV-LMP2A基因重组痘苗病毒(Vac-LMP2A)转染成熟的DC,流式细胞术(FACS)检测转染前后DC表面分子CD1a,CD83,CD40,CD80,HLA-DR变化,3H-TdR掺入法检测转染前后DC刺激同种异体T淋巴细胞增殖等功能的改变。结果:转染后LMP2A蛋白在DC细胞内高表达,Vac-LMP2A转染成熟DC前后对其表面共刺激分子及特征性表面标志无影响,转染后的DC仍具有较强的刺激同种异体TI林巴细胞增殖的能力。结论:痘苗病毒载体是介导外源基因LMP2A转染DC的有效载体,Vac-LMP2A转染成熟DC对DC表型和功能无明显影响,是EBV相关肿瘤如鼻咽癌免疫治疗的理想载体。 相似文献
6.
目的:用负载鼻咽癌细胞(CNE)可溶性抗原的树突状细胞(dendritic cells,DC)诱导自身淋巴细胞,使之活化为鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)特异性细胞毒性T细胞(cvtotoxic T lymphocyte,CTL),观察其对鼻咽癌细胞的体外特异性杀伤作用。方法:用GM-CSF、IL-4和TNF-α体外诱导健康成人外周血单核细胞,使其分化为高纯度DC。用鼻咽癌细胞(CNE)可溶性抗原负载成熟DC,流式细胞仪检测负载前后DC的表型特征,MLR检测负载前后DC对同种异体T淋巴细胞增殖的能力。在白细胞介素-2(IL-2)的作用下,用负载鼻咽癌细胞可溶性抗原的DC诱导自身淋巴细胞成NPC特异性CTL,通过杀伤活性实验观察它对鼻咽癌细胞(CNE)的特异性杀伤效应。结果:人外周血单核细胞体外在GM-CSF、IL-4、TNF-α诱导下获得具典型表型特征的成熟DC。负载CNE可溶性抗原对成熟DC表面共刺激分子及特异性表面标志无影响,仍有较强的刺激同种异体淋巴细胞增殖能力,所诱导的CTL对鼻咽癌细胞(CNE)有明显的特异性杀伤作用。结论:负载鼻咽癌细胞(CNE)可溶性抗原的DC所诱导的CTL在体外对鼻咽癌细胞有特异性杀伤作用,对NPC的临床治疗有潜在的应用价值。 相似文献
7.
腺病毒载体介导EB病毒潜伏期膜蛋白2A基因转染树突状细胞对其功能的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨腺病毒载体介导EB病毒(EBV)潜伏期膜蛋白2A(LMP2A)基因转染树突状细胞(DC)对其功能的影响。方法 通过同源重组法构建带有EBV-LMP2A基因的重组腺病毒Ad5-LMP2A,用不同感染滴度(MOI)的Ad5-LMP2A转染成熟的DC,用流式细胞术(FACS)检测DC的LPM 2A蛋白表达细胞百分率及用台盼蓝染色计数DC死亡百分率,选择最佳MOI;用最佳MOI的Ad5-LMP2A转染成熟的DC,FACS检测转染前后DC表面分子CD1a、CD83、CD40、CD80及HLA-DR的变化;并用^3H-TdR掺入法检测转染前后DC刺激同种淋巴细胞增殖能力及荧光定量PCR检测表达IL-12 P40 mRNA等功能的改变。结果 MOI 200为Ad5-LMP2A转染DC的最佳滴度,此时约80%的DC表达LMP2S蛋白及92%以上细胞为活细胞。Ad5-LMP2A转染成熟DC前后对细胞表面共刺激分子及特征性表面标志无影响;转染后的DC仍具有较强的刺激同种异体淋巴细胞增殖能力和表达IL-12 P40 mRNA的功能。结论 腺病毒载体能高效介导EBV LMP2A基因在DC中表达,Ad5-LMP2A转染成熟DC对其功能无明显影响,便于进一步用于EBV相关肿瘤的免疫治疗。 相似文献
8.
雷公藤多甙和白细胞介素-1 0对人树突状细胞表面人类白细胞抗原-DR和CD80表达及白细胞介素-12 p40转录和分泌的影响 总被引:15,自引:3,他引:12
目的:研究雷公藤多甙和IL-10对人树突状细胞(DC)表面人类白细胞抗原-DR(HLA-DR)和CD80表达及IL-12p40转发洋和分泌的影响。方法:通过粒细胞-巨噬细胞型集落刺激因子(GM-CSF)、IL-4和肿瘤坏死因子α(TNF-α)体外培养体系,从人外周血单个核细胞中获得DC,细胞表面HLA-DR和CD80表达采用流式细胞仪分析,IL-12p40转录和分泌分别采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术和ELISA法。结果:雷公藤多甙(5-20ug/ml)、IL-10(50-200ng/ml)能下调DC表面HLA-DR和CD80的表达,同时雷公藤多甙、IL-10能抑制DC内IL-2p40mRNA的转录和分泌。结论:雷公藤多甙、IL-10能通过抑制表面分子的表达和细胞因子的合成而干扰DC的成熟和功能。 相似文献
9.
目的探讨合并非酒精性单纯性脂肪肝(NAFL)的早发稳定性冠心病患者(〈50岁)心血管危险因素聚集特征。方法收集106例早发稳定性冠心病患者的临床资料,检测生化指标、超敏C反应蛋白(hsCRP)、白细胞计数,采用国际糖尿病联盟的代谢综合征标准,用B型超声检测合并NAFL及颈动脉粥样硬化(CA)情况,将研究对象按合并NAFL及不同胰岛素抵抗指数(Homa IR)进行分组分析。结果研究对象中合并NAFL32例(30.1%),非脂肪肝74例(69.9%)。合并NAFL组空腹血糖、胰岛素、总胆固醇、甘油三酯、ALT、hsCRP和白细胞计数及体重指数、Homa IR、血糖异常和CA比例、高血压和代谢综合征患病率均高于非脂肪肝组(P均〈0.05)。hsCRP与体重指数、甘油三酯、ALT和Homa IR正相关(r=0.420,P=0.000;r=0.200,P=0.040;r=0.218,P=0.048;r=0.546,P=0.000),与高密度脂蛋白胆固醇负相关(r=-0.220,P=0.023)。白细胞计数与空腹血糖正相关(r=0.211,P=0.030)。高胰岛素抵抗组体重指数、hsCRP、ALT、高血压、糖尿病、代谢综合征和NAFL患病率及CA比例均高于低胰岛素抵抗组(P均〈0.05)。结论合并NAFL的早发稳定性冠心病患者慢性炎症反应、胰岛素抵抗和心血管危险因素聚集程度更显著。 相似文献
10.
谢芳艺 《南京医科大学学报(自然科学版)》2012,(3):230-233
以授课为基础的学习(lecture-based learning,LBL)和以问题为基础的学习(problem-based learning,PBL)是两种不同的学习方法,各有其特点?在教学对象构成多元化和教学改革实践不断深入的背景下,重视PBL和LBL在医学微生物及免疫学课程教学中的有机结合可以提高教学质量和医学生的综合素质? 相似文献