神经胶质细胞和神经退行性疾病

神经胶质细胞是神经系统的间质细胞,数目为神经元的10～50倍,对中枢神经系统(CNS)的生理病理起着重要作用,支持和保护神经元、参与免疫应答、调节神经递质、影响突触的形态与功能。在神经退行性疾病(如阿尔茨海默病、帕金森病、肌萎缩侧索硬化等)中,神经胶质细胞通过各种途径参与疾病的发病机制,并影响疾病进展。     

腰椎穿刺脑脊液置换对动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者血管内栓塞术后脑脊液核因子κB和转归的影响

目的 探讨动脉瘤性蛛网膜下腔出血(aneurysmal subarachnoid hemorrhage,aSAH)患者动脉瘤栓塞术后早期脑脊液置换对脑脊液核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)水平和临床转归的影响.方法 纳入接受动脉瘤栓塞术的aSAH患者,按治疗方案分为脑脊液置换组与非脑脊液置换组.所有患者均在入院3d内行脑动脉瘤弹簧圈栓塞,脑脊液置换组在弹簧圈栓塞后24 h内进行腰椎穿刺脑脊液置换,隔日1次,每次置换脑脊液20 ～30 ml,鞘内注射地塞米松3 mg.在弹簧圈栓塞治疗后1、7和14d检测脑脊液NF-κB水平.主要转归指标为发病后3个月时改良Rankin量表(modified Rankin Scale,mRS)和格拉斯哥转归量表(Glasgow Outcome Scale,GOS)判定的临床转归,转归良好定义为mRS评分0～2分或GOS评分＞3分.次要转归指标包括严重并发症(脑积水、脑动脉痉挛、脑梗死、再出血)和死亡.结果 共纳入81例接受动脉瘤栓塞术的aSAH患者,其中脑脊液置换组42例,非脑脊液置换组39例.脑脊液置换组基线资料与非脑脊液置换组无显著性差异(P均＞0.05).脑脊液置换组颈强直持续时间显著短于非脑脊液置换组[(11.3±3.2)d对(16.5±3.5)d;t =6.985,P＜0.001].脑脊液置换组和非脑脊液置换组在弹簧圈栓塞治疗后1d、7d和14 d时脑脊液NF-κB水平均呈进行性降低(P均＜0.05),但在各时间点脑脊液置换组脑脊液NF-κB水平均显著低于非脑脊液置换组(P均＜0.01).脑脊液置换组在治疗后3个月时根据mRS评分(92.9％对56.4％;x2=14.446,P＜0.001)和GOS评分(97.6％对76.9％∥=8.004,P=0.005)评价的转归良好率均显著高于非脑脊液置换组,脑血管痉挛发生率显著低于非脑脊液置换组(14.3％对33.3％;x2 =4.086,P=0.043).结论 脑脊液置换治疗可降低接受动脉瘤栓塞术的aSAH患者的脑血管痉挛发生率并改善临床转归,其机制可能与降低脑脊液NF-κB水平有关.     

SVA反转录转座子的研究进展

SVA反转录转座子在人类基因组中的拷贝数约2 700个,可通过DNA-RNA-DNA的途径实现反转录转座,SVA插入到基因组中,从而改变基因组的结构和功能.SVA反转录转座子不仅对人类基因组的进化做出了重要贡献,还是多种疾病的重要原因.     

LMNA突变体HEK293、C2C12模型的构建及其核纤层蛋白A/C亚细胞定位

目的构建A型核纤层蛋白基因(LMNA)野生型、突变体的融合蛋白真核表达载体及LMNA突变体慢病毒载体,研究其在HEK293、C2C12中表达、核纤层蛋白A/C亚细胞定位及细胞核改变。方法将野生型全长LMNA cDNA克隆入pEGFP-N1质粒,构建LMNA野生型质粒pEGFP-N1-LMNA,以野生型质粒为模板构建c.1117A>G定点突变质粒pEGFP-N1-LMNA-I373V。将构建的2种质粒分别转染HEK293、C2C12,用G418筛选转染的C2C12,荧光显微镜下观察细胞核形态及GFP标记的核纤层蛋白A/C亚细胞定位。以pEGFP-N1-LMNA-I373V为模板,构建pHBLV-h-LMNA-I373V-3*flag-GFP-PURO慢病毒,对慢病毒进行包装与滴度测定。pHBLV-GFP-PURO、pHBLV-LMNA-C1117-3*flag-GFP-PURO分别转染C2C12,免疫荧光染色法观察转染后细胞核形态及核纤层蛋白A/C亚细胞定位的改变。结果构建的pEGFP-N1-LMNA、pEGFP-N1-LMNA-I373V及pHBLV-h-LMNA-I373V-3*flag-GFP-PURO测序与目的基因序列完全一致。pEGFP-N1-LMNA转染的HEK293、C2C12核纤层蛋白A/C均匀表达于核膜下,pEGFP-N1-LMNA-I373V转染的HEK293、C2C12内核纤层蛋白A/C核内异常聚集,呈散点样分布;与HEK293相比,C2C12细胞转染效率明显降低。慢病毒转染C2C12的转染率高,突变体慢病毒转染的细胞核形态异常及核纤层蛋白A/C核内分布异常。结论成功构建2种LMNA突变体真核表达载体及突变体转染的HEK293、C2C12模型,为LMNA突变体导致疾病的机制研究奠定科学基础。     

常染色体显性遗传Emery-Dreifuss肌营养不良一家系研究并文献复习

目的 分析一个常染色体显性遗传Emery-Dreifuss肌营养不良(AD-EDMD)家系的临床、肌活检组织病理特征,探讨其致病基因突变.方法 收集AD-EDMD家系先证者及其父母的临床资料,对先证者进行腓肠肌活检;提取先证者及其父母外周血基因组DNA,PCR扩增LMNA基因的12个外显子,以琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物,PCR产物纯化后DNA直接测序,确定基因突变的类型,并综合文献进行分析.结果 先证者,女,现4岁5个月,自幼四肢无力,以近端为著,轻度漏斗胸,肌酶水平升高,肌电图提示肌源性损害,腓肠肌活检病理学检查提示肌肉病样改变.其父亲具有相同症状,随病程进展表现为早期出现肘关节挛缩,颈部僵硬,脊柱侧弯,跟腱紧,四肢缓慢进行性肌无力,窦性心动过缓等.LMNA基因突变分析发现先证者及其父亲LMNA基因第9外显子发生杂合错义突变c.1580G＞ C(p.Arg527Pro),此为已报道致病突变.结论 对早期出现肘关节挛缩、屈颈受限、脊柱强直、双上肢近端和双下肢远端肌无力明显、心律失常的患者应分析LMNA基因,有助于早期诊断EDMD,判断预后;及时有效监测心律失常的变化,适时干预,从而改善生活质量,延长寿命.基因分析是确诊EDMD最可靠的方法.     

同患两种罕见遗传病患儿9例的临床与遗传学特点

目的分析同患两种罕见遗传病患儿的临床特征。方法回顾性分析2021年1月至2022年2月北京大学第一医院确诊的同患两种罕见遗传病的患儿病例资料, 总结其临床及遗传学特征。结果 9例患儿中男6例、女3例, 末次就诊或随访年龄为5.0(2.7, 6.8)岁, 主要临床表现包括运动发育落后、智力发育落后、表观畸形、骨骼异常等。例1～4均为男性, 表现为步态异常、跑跳差, 血清肌酸激酶明显增高, 遗传学分析证实为DMD基因致病性变异所致的Duchenne型或Becker型肌营养不良, 同患另1种遗传病, 分别为原发性肥大性骨关节病、脊髓性肌萎缩症、脆性X综合征、脑海绵状血管瘤3型。例5～9分别为COL9A1基因相关多发性骨骺发育不良6型和NF1基因相关神经纤维瘤病Ⅰ型, COL6A3基因相关Bethlem肌病和WNT1基因相关成骨不全症ⅩⅤ型, Turner综合征(45, X0/46, XX嵌合体)和TH基因相关Segawa综合征, 22q11.2微重复综合征和DYNC1H1基因相关常染色体显性遗传下肢受累脊髓性肌萎缩症1型, ANKRD11基因相关KBG综合征与IRF2BPL基因相关神经发育障...