TXNIP介导的NLRP3炎症小体激活在心肌微血管内皮细胞缺氧/复氧损伤中的作用

目的 研究硫氧还蛋白结合蛋白（TXNIP）介导的NLRP3炎症小体激活在心肌微血管内皮细胞（CMECs）缺氧/复氧（H/R）损伤中的作用。方法 分离培养C57BL/6J小鼠CMECs,随机分为对照组、H/R损伤组、H/R+Scrambled siRNA组和H/R+TXNIP siRNA组。各组处理后使用ELISA试剂盒检测细胞IL-1β水平,采用免疫共沉淀的方法检测TXNIP和NLRP3的相互作用,Western blot检测TXNIP和NLRP3的表达水平,乳酸脱氢酶试剂盒检测细胞培养上清LDH释放情况和细胞Caspase-3活性。结果 与对照组相比,H/R后CMECs的NLRP3表达水平明显升高（P<0.05）,NLRP3炎症小体激活（IL-1β水平升高,P<0.01）,且TXNIP和NLRP3的结合效果明显增强（P<0.01）。运用TXNIP siRNA抑制TXNIP表达后行H/R处理,与H/R+Scrambled siRNA组相比,NLRP3炎症小体激活水平明显下降（IL-1β水平降低）,细胞Caspase-3活力和LDH释放水平均显著降低（均P<0.05）。结论 在CMECs发生H/R损伤时,NLRP3炎症小体激活,TXNIP和NLRP3的相互作用增强;抑制TXNIP表达后,NLRP3炎症小体激活水平降低,内皮损伤减轻。说明TXNIP介导的NLRP3炎症小体激活参与CMECs的H/R损伤,可能成为CMECs的H/R损伤的新机制。     

Irisin通过激活AMPK促进小鼠骨骼肌细胞脂肪酸氧化

目的 研究irisin对C2C12小鼠骨骼肌细胞脂肪酸氧化的影响及机制。方法 将培养好的C2C12细胞分为6组:对照组,irisin(20 ng/ml)组,irisin(200 ng/ml)组，irisin(2 000 ng/ml)组，irisin(2 000 ng/ml)+compound C(irisn孵育前30 min,20 μmol/L)组,AICAR(AMPK激动剂，10 μmol/L)组。使用3H标记的油酸孵育C2C12细胞，通过检测代谢产物放射性活度反映脂肪酸氧化水平；Western blot检测C2C12细胞与骨骼肌中AMPK和ACC-β的磷酸化水平。结果 ①与对照组相比，irisin组C2C12细胞脂肪酸氧化水平升高(P<0.05)。②与对照组相比，irisin组AMPK和ACC-β的磷酸化水平增高(P<0.05或P<0.01)。③与Irisin组相比，irisin+compound-C组C2C12细胞脂肪酸氧化水平以及AMPK和ACC-β的磷酸化水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论 Irisin通过激活AMPK促进小鼠骨骼肌细胞脂肪酸氧化。