5种食源性致病微生物毒力基因重组质粒的构建、克隆表达与表达产物的研究

目的构建大肠杆菌O157∶H7、副溶血性弧菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和志贺氏菌5种主要食源性致病微生物毒力基因重组质粒载体并鉴定其表达产物,为探讨高通量磁性荧光纳米颗粒标记相应的抗体技术快速检测带毒力基因的致病微生物的可行性奠定基础。方法分别从5种食源性致病微生物毒力岛中选择特异性的毒力基因进行引物设计,分别提取5种目的细菌DNA片段,经PCR扩增、电泳回收目的基因片段,将目的基因片段与原核表达载体pET-23a、pET-28a、pET-32a构建各自的重组质粒,将重组质粒转化入大肠杆菌DH5α内并提取质粒载体,构建后的重组质粒进行酶切和测序鉴定,再转化入表达宿主E·coliBL21（DE3）。在0.1 mmol/L的IPTG诱导下,目的质粒载体在E·coliBL21（DE3）株中表达,SDS-PAGE电泳检测表达蛋白。结果实验成功构建大肠杆菌O157∶H7、副溶血性弧菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和志贺氏菌等细菌的毒力基因重组质粒载体pET-23a-eaeA、pET-28a-tdh、pET-28a-enterotoxin B、pET-32a-invA和pET-28a-ipaH,并克隆出969 bp的eaeA基因片段、567 bp的tdh基因片段、798 bp的enterotoxin B基因片段、1 041 bp的invA基因片段和771 bp的ipaH基因片段。重组质粒载体经酶切和测序与目标基因序列一致。在E·coliBL21（DE3）株中有质粒表达蛋白37.5 kDa（eaeA）、26 kDa（tdh）、34.5 kDa（enterotoxin B）、41 kDa（invA）、32 kDa（ipaH）。结论本研究成功构建了5种食源性致病微生物毒力基因重组质粒并在原核细胞中高效表达,为下一步获得相应的毒力基因抗体及快速诊断试剂的研制应用奠定了基础。     

小儿烧伤并发症的临床观察及护理

根据国内各大医院不完全统计,小儿烧伤约占烧伤病人的50%左右。由于小儿解剖和生理特点,治疗过程中出现的并发症多,死亡率比成人要高。现就小儿烧伤治疗中常见的并发症临床观察及护理综述如下。一、小儿烧伤休克由于小儿血容量与体表面积的比值比成人为小,相对血容量较少,因此小儿烧伤后对体液的丧失耐受性很差,容易发生休克。休克期的临床观察主要是:①血压明显下降,心率快、弱。一般情况下,1岁以内婴儿120～140次/分,1～5岁100～120次/分,若每分钟增快20次要警惕休克的发生。②少尿或无尿,故尿量的监测非常重要。③精神状态有二种改变:一是躁动不安,谵妄、惊厥,二是表现为嗜睡,反应迟钝,表情淡漠。护理上应做到,迅速建立静脉通道,保证液体及时补充;根据     

晚期产后出血40例分析

目的探讨引起晚期产后出血的病因及预防措施。方法回顾性分析2003—2009年新疆克州人民医院收治的40例晚期产后出血的临床资料。结果晚期产后出血主要病因是胎盘胎膜、蜕膜残留,其次为子宫内膜炎子宫复旧不良以及剖宫产术的子宫切口感染、裂开出血等。结论治疗以清宫为主,对急性出血者可行子宫切除术。     

肝硬化合并肝源性糖尿病31例临床分析

肝源性糖尿病是由于严重的肝脏实质性损害 ,导致糖代谢异常所产生的糖尿病。目前治疗糖尿病主要采用胰岛素 ,口服降糖药及饮食治疗和适合的体育锻炼 ,而长期口服降糖药可造成肝功能损害 ,故当肝硬化合并肝源性糖尿病时 ,治疗是一个较为棘手的问题。现将我院 1997～ 2 0 0 1年收治的 31例肝硬化合并肝源性糖尿病报告如下 :1　临床资料1 1　诊断标准〔1〕　本组 31例病例均遵循以下标准 :①糖尿病发生前有明确的肝硬化病史 ;②无糖尿病既往史及家族史 ;③有明确肝硬化及肝功能损害的临床表现 ,生化检查及影像学检查证据 ;④符合ＷＨＯ关于糖尿…     

区域中心医院就诊患者医疗需求影响因素分析

达川地区位于四川省东北部，辖５县２市，全区总人口６０２．４万，幅员１．６６万平方公里。达川地区人民医院位于区政府所在地，占地面积７８６７９．７６平方米，拥有７７０张病床，１０００多名职工，是该区的医、教、研中心。为了了解该院就诊患者的医疗需求状况，分析其影响因素，为医院管理者提供科学的决策依据，我们于１９９５年５月－１１月对在该院就诊的患者进行了抽样调查。一、结果与分析（一）基本状况（略）（二）就医行为及需求意向１、对医院、医生、医疗质量的选择和要求：７１．７％的患者常选择该院就医，６８．５％的…     

反流性食管炎中医病名、病机及治疗探讨

反流性食管炎(RE)属食管粘膜炎性病变，由于胃及十二指肠内容物反流进入食管，而引起的烧心反酸、胸骨后灼热疼痛等症状。本病发病率高，1998年秋罗马国际会议及1990年秋悉尼世界消化大会均为会议重点课题，但国内对RE研究较少。西医认为与胃酸及胃蛋白酶反流有关，而中医对本病病名、病因病机、临床治疗没有统一的认识，故加以探讨。……     

不同切口白内障超声乳化术对角膜屈光状态影响

目的:为了观察白内障超声乳化联合人工晶状体植入术后视力、角膜散光大小以及角膜形态改变。方法:收集在我院接受白内障超声乳化吸除联合IOL植入术的患者40例(46眼),进行分析总结。结果:术后1月、3月裸眼视力两组比较差别不明显,差异无统计学意义(P>0.05)。术前散光两组比较差别不明显,差异无统计学意义(P>0.05)。术后一周、一月、3月A组散光度数小于B组,术后3月两组散光均较术前有所减小(P<0.05)。术前角膜表面不对称指数两组比较差别不明显,差异无统计学意义(P>0.05)。术后一周、一月、3月A组角膜表面不对称指数小于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1.角巩膜隧道切口对角膜损伤更小,散光更小、更安全等优点。2.选择在角膜最大屈光轴方向作切口能在一定程度上矫正部分术后散光,对所在于午线角膜曲率有松解作用。     

阿苯达唑乳剂治疗肝囊型包虫病71例临床疗效观察

为观察阿苯达唑乳剂对肝囊型包虫病患的临床疗效，对71例包虫病患用阿苯达唑乳剂按每日每公斤体重12．5mg剂量进行治疗，以B超影像特征判定疗效。连续服药3个月复查一次（1个疗程），各疗程间不停药，停药时的结果为近期疗效，停药后最后一次随访（6个月－2年）的结果为远期疗效，平均近期疗效：有效率89％，治愈率52．1％，无效率为14．1％，平均远期疗效，有效率91．7％，治愈率83．4％，复发率为8．3％，该药比其它抗包虫药物疗效高，不良反应轻，安全可靠，可成为治疗包虫病的首选药物，值得临床推广使用。     

软性角膜接触镜引起绿脓杆菌性角膜炎2例报告

自1937年Finebloom首先应用角膜接触镜以来临床已应用50余年。1964年亲水性软性角膜接触镜问世，为接触镜开辟了新的领域，现在接触镜不但用于屈光不正的矫正还用于多种眼病的治疗及美容等目的。因此，有日益广泛应用的趋势。但接触镜亦存在某些难以克服的缺点及对眼组织的不良影响。随着角膜接触镜的日益广泛应用，其缺点也逐渐暴露出来，其中以角膜感染的并发症最为严重。1998年11月以来我院共收治2例因配戴角膜接触镜矫正近视而发生角膜感染的患者，现报告如下。