血糖升高水平对大鼠低血糖性脑损伤的影响

目的探讨胰岛素诱导大鼠低血糖后,血糖升高水平对大鼠低血糖性脑损害的影响。方法30只Wistar4月龄雄性大鼠,体重（300±50）g,用简单随机抽样方法分为实验组（20只）、正常血糖对照组（A组,5只）和空白对照组（B组,5只）。实验组根据血糖再灌注水平分为1〈血糖≤3mmol／L组（C组）、3〈血糖≤6mmo]／L组（D组）、6〈血糖49mmol／L组（E组）、血糖〉9mmol／L组（F组）,每组5只。采用TUNEL染色观察大鼠海马神经元凋亡,Fluoro—JadeB（FJB）染色观察神经元轴突和胞体的退变。染色组问计量资料采用单因素方差分析。结果（1）TUNEL染色：与A组及B组相比（海马CAl区：3．2±1．9、2．8±0．8;海马DG区：4．1±2．4、3．4±1．2）,C组、D组、E组、F组海马凋亡细胞数（海马CAl区：40．2±3．1、38．7±2．4、36．8±2．6和76．4±6．3;海马DG区：62．4±4．2、59．8±3．7、68．1±2．8和125．4±5．8）凋亡细胞数增多,差异有统计学意义（海马CAl区：F=13．52,P〈0．05;海马DG区：F=14．29,P〈0．05）;F组（海马CAl区：76．4±6．3;海马DG区：125．4±5．8）大鼠海马凋亡神经元数目比C组、D组、E组（分别为海马CAl区：40．2±3．1、38．7±2．4、36．8±2．6;海马DG区：62．4±4．2、59．8±3．7、68．1±2．8）显著增多,差异有统计学意义（海马CAl区：F：5．08,P〈0．05;海马DG区：F=6．52,P〈0．05）;（2）FJB染色：与A组及B组相比,C组、D组、E组、F组海马退变神经元数目显著增多,差异有统计学意义（海马CAl区：F=18．49,P〈0．05;海马DG区：F=11．37,P〈0．05）;F组大鼠海马轴突退变神经元数目比C组、D组、E组显著增多,差异有统计学意义（海马CAl区：F=7．83,P〈0．05;海马DG区：F=14．29,P〈0．05）。结论在同一低血糖水平且持续时间相同的情况下,大鼠脑损害程度与低血糖后血糖升高水平有关：血糖升高水平过高,脑损害明显。     

反复轻度低血糖与低血糖性脑损害的关系

重度低血糖对脑组织有严重危害,但轻度低血糖,尤其是反复轻度低血糖对脑组织的影响目前尚不完全清楚。近年来的研究表明,反复轻度低血糖(轻度RH)可以对神经中枢及认知功能造成损害,但对严重低血糖(SH)造成的脑损伤和认知功能障碍可能有一定保护作用。本文介绍了反复轻度低血糖对大鼠神经元、代谢和认知功能等方面的影响的研究现状,以及对患者认知功能的影响的最新研究进展。     

升糖速度对低血糖大鼠脑损伤影响机制初探

目的 研究及探讨不同升糖速度对低血糖性大鼠脑损伤影响的机制.方法 采用健康SD雄性大鼠36只,体重250～ 300 g,采用简单随机抽样分组的方式将其分为6组：空白组、假手术组和4个实验组,每组6只大鼠.空白组不作任何处理,假手术组胰岛素腹腔注射的同时静脉泵注葡萄糖并维持正常血糖,4组实验组在胰岛素诱导的低血糖后按照不同的泵注速度进行升糖,根据1h后血糖的不同水平分为＞ 1.0 ～ 3.0 mmoL/L组、＞3.0 ～6.0 mmoL/L组、＞6.0 ～9.0 mmol/L组和＞9.0 mmol/L组.采用Western blotting法检测不同组之间抗凋亡基因Bax及Bcl-2蛋白在大脑皮层及海马神经细胞上表达,采用流式细胞仪检测不同组之间大脑海马及皮层神经细胞内Ca^2＋的浓度.各组间计量资料比较采用单因素方差分析.结果 Bax/Bcl-2比值：相对于空白组,假手术组、4个实验组大脑皮层及海马的Bax/Bcl-2比值有显著性的提高,差异有统计学意义（F=265.8、42.7,均P＜0.05）,其中＞9.0 mmol/L组Bax/Bcl-2最大,＞1.0～3.0 mmol/L组次之,与＞3.0～ 6.0 mmol/L组、＞6.0 ～9.0 mmol/L组之间差异有统计学意义（F=212.1、27.4,均P＜0.05）.钙离子浓度：相对于空白组,假手术组和4个实验组的钙离子浓度显著性的提高,差异有统计学意义（F=79.8、355.0,均P＜0.05）,其中＞9.0 mmol/L组钙离子浓度最大,＞1.0～ 3.0 mmol/L组次之,与3.0 ～6.0 mmol/L组、＞6.0 ～ 9.0 mmol/L组之间差异有统计学意义（F=50.1、71.1,均P＜0.05）.结论 过慢、过快的升糖速度都不利于低血糖性脑损伤的恢复.     

大鼠低血糖后血糖升高水平对脑损伤的影响

目的 探讨大鼠低血糖后不同升高血糖水平对大鼠脑损伤的影响及脑损伤产生的机制.方法 将4月龄SD雄性大鼠36只随机分为模型组(24只)、空白对照组(6只)、假手术组(6只).参照Sang Won Suh等方法制作低血糖大鼠模型,将模型组大鼠按血糖升高水平再分为1～3 mmol/L、3～6 mmol/L、6～9 mmol/L和＞9 mmol/L亚组.空白对照组为不作任何处理的正常大鼠,假手术组即正常血糖组.采用HE染色方法观察造模术后7d大鼠海马CA1区、齿状回(dentate gyrus,DG)和皮层神经元坏死情况,采用透射电镜观察造模术后7d大鼠海马神经元超微结构变化,采用阴离子荧光探针检测灌注结束时海马活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)的产生.结果 (1) HE染色:与空白对照组比较,假手术组、1～3 mmol/L组大鼠海马CA1、DG及颞叶皮层细胞坏死数变化无统计学差异(P＞0.05),3～6 mmol/L组、6～9 mmol/L组、＞9 mmol/L组海马CA1、DG及颞叶皮层细胞坏死数较假手术组明显增加(P＜0.05,P＜0.01).(2)透射电镜:与假手术组比较,各模型组海马细胞均有不同程度损伤,其中＞9 mmol/L组损伤程度最重,1～3 mmol/L组损伤程度最轻.(3)ROS检测:与假手术组比较,1～3 mmol/L组、3～6 mmol/L组、6～9 mmol/L组、＞9 mmol/L组海马CA1区和DG区荧光信号均明显增加(P＜0.05,P＜0.01).与1～3 mmol/L组比较,3～6 mmol/L组、6～9 mmol/L组和＞9 mmol/L组海马CA1区和DG区荧光信号均升高(P＜0.01),而3～6 mmol/L组和6～9 mmol/L组相比则无统计学差异(P＞0.05).结论 大鼠严重低血糖后升高血糖水平过高会促进ROS的产生并且加重脑损伤.