肝细胞条件培养液对人脂肪问充质干细胞向肝细胞分化和增殖的作用

目的 探讨人脂肪间充质干细胞在改良的诱导体系下向肝细胞的分化和增殖情况,为肝组织工程提供新的种子细胞来源.方法 从人脂肪组织分离出脂肪间充质干细胞,用含有碱性成纤维细胞生长因子、肝细胞生长因子、成纤维细胞生长因子-4的肝细胞诱导液进行诱导,并于诱导7 d后加入抑瘤素M.用细胞计数试剂盒-8法检测整个诱导过程细胞的增殖情况;通过光学显微镜观察诱导细胞的形态变化;用RT-PCR法和免疫荧光法分别检测肝细胞特异性基因和蛋白的表达;并对多种肝细胞特异性功能进行检测.组间比较采用t-test检验.结果 用改良肝细胞诱导液培养的人脂肪间充质干细胞在培养第5、7、14、21天时,细胞数均明显多于用对照培养液培养的细胞(f值分别为6.59、8.69、15.94和24.64,P值均＜0.05).诱导细胞表现出上皮样肝细胞形态,表达肝细胞特异性基因和蛋白;具有多种肝细胞特异性功能,如靛青绿摄取/排泌、糖原合成以及白蛋白分泌功能.结论 人脂肪间充质干细胞在含碱性成纤维细胞生长因子、肝细胞生长因子、成纤维细胞生长因子-4和抑瘤索M的诱导体系中能够分化为更加成熟的具有多种肝细胞特异性功能的细胞,且此诱导体系同时具有促进细胞增殖的作用.     

脂肪来源干细胞的多向分化性及其在组织工程中的应用

近期研究表明间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSC）可以从脂肪组织获得,这类细胞被称为脂肪来源干细胞（adipose-derived stem cells,ADSCs）。ADSCs与骨髓来源MSC具有相似的多向分化性,并且存在容易获取、取材创伤小和细胞获得量大等优点,因此有望成为组织工程中另一种很有前景的种子细胞来源。本文介绍了ADSCs多向分化性的最新研究进展,以及在各种组织工程中的应用情况。     

信号转导与血小板激活

血小板通过一系列信号转导机制，主要包括磷脂酶C-β(PLC-β)通路、酪氨酸蛋白激酶(PTK)通路、磷脂酰肌醇-3激酶(PI3-K)通路、丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)通路、环磷酸腺苷-蛋白激酶A(cAMP—PKA)通路和磷脂酶A2(PLA2)花生四烯酸通路等介导被激活。本文就血小板信号转导及其激活作一概述。     

新型冰冻红细胞洗涤机洗涤效果的研究

目的研制一种全自动、封闭式,体积小、重量轻,洗涤程序设计简单的新型冰冻红细胞洗涤机。方法全血采自健康献血者,ACD抗凝,离心获浓缩红细胞,加入甘油到终浓度为40%,-80℃保存。42℃条件下冻融红细胞,利用自行设计的透析式新型冰冻红细胞洗涤机,使用3种自动化洗涤程序洗涤红细胞,直至可输注。结果洗涤后红细胞形态正常,3种程序洗涤后红细胞的回收率(%)分别为69.73±8.36,85.09±6.03和88.43±4.72;红细胞血红蛋白的回收率(%)分别为45.30±2.66,70.80±3.76和81.26±5.55;洗后上清液中游离血红蛋白的含量(g/L)为0.20±0.08,0.14±0.03和0.25±0.13,采用单因素k水平方法对数据进行统计学分析,得出了最佳洗涤程序。结论该新型冰冻红细胞洗涤机采用优化的洗涤程序,洗涤后的冰冻红细胞达到了国家的质量标准。     

冷冻干燥血小板保存技术研究

为了探索新的血小板保存方法,对血小板进行了冷冻干燥的研究.采用乙醛对血小板做预处理,在冷冻干燥过程中为了稳定血小板的结构,加入了人白蛋白或海藻糖作为保护剂,并对再水化液进行了筛选.对冷冻干燥后的血小板进行了形态学观察和表面膜糖蛋白表达的检测.结果表明,乙醛处理后血小板的回收率基本稳定在60%以上,血小板的聚集活性与处理前相比有轻微的降低;5%人血白蛋白冷冻干燥保护液的保存效果明显优于40mmol/L海藻糖冷冻干燥保护液,在血小板聚集活性保持方面,用贫血小板血浆（PPP）再水化结果明显优于磷酸缓冲盐溶液（PBS）.透射电子显微观察显示,冷冻干燥后血小板胞内细胞器和颗粒物质清晰可见,其中包括线粒体和各种分泌颗粒.乙醛处理后血小板膜糖蛋白的表达与新鲜血小板相比明显降低.结论：乙醛作为一种新的保护剂,对血小板冷冻干燥有良好的效果,值得进一步研究.     

胚胎干细胞:从基础到临床有多远

尽管随着医学技术的快速发展，越来越多的疾病被彻底征服，然而，组织、器官的不可逆损伤或功能衰竭仍是困扰人类健康的世界性医学难题。全世界每年有数以百万计的患者因为遭受各种形式的疾病及创伤，导致组织器官和功能丧失，需要进行移植重建。但令人遗憾的是，组织、器官移植作为一种替代治疗方法，尽管有其巨大的治疗作用，但仍然是一种“拆东墙补西墙”的有损伤和有代价的治疗方法，很难满足临床救治工作的需要。[第一段]     

知母皂苷AⅢ抗血栓作用研究

目的:确定知母皂苷AⅢ体内、外给药对大鼠血小板聚集和血栓形成的抑制作用。方法:比浊法测定血小板聚集,动-静脉旁路血栓模型测定大鼠在体血栓的形成。结果与结论:体外血小板聚集模型研究证明,知母皂苷AⅢ可以抑制由ADP、胶原和凝血酶诱导的大鼠血小板的聚集,并呈剂量效应。体内给药同样可以有效抑制血小板的聚集率,当给药剂量达到40 mg/kg.d-1时对血小板聚集的抑制率可以达到26.7%。动-静脉旁路血栓形成实验结果显示,知母皂苷AⅢ体内给药可减小血栓的湿重和干重,说明知母皂苷AⅢ体内给药具有抗血栓的作用。知母皂苷AⅢ体内给药不影响出凝血时间。推测其抗血栓形成的功效可能是通过抑制血小板的黏附、聚集和活化而实现的。