昼夜节律紊乱与心脑血管疾病

昼夜节律参与调节多种生理、心理和行为变化,是生命活动的本质特性之一。昼夜节律的产生和维持依赖于多种时钟基因。研究表明,昼夜节律紊乱与心脑血管疾病的发生、发展存在密切的联系,表现在:(1)时钟基因广泛表达于心脑血管系统,并发挥重要的调节功能;(2)心率、血压、血儿茶酚胺水平等心脑血管系统核心指标均表现出昼夜节律变化;(3)心脑血管疾病的发病频率随时间昼夜波动;(4)肥胖、糖尿病、代谢综合征等心脑血管疾病相关病症与时钟基因多态性密切相关;(5)时钟基因对于血管内皮的再生和功能至关重要。该文结合最新研究进展阐述昼夜节律紊乱与心脑血管疾病的相关性,并探讨其可能的机制。     

老年急性脑梗死后外周血清胱抑素C水平与认知功能障碍相关性研究

<正>急性脑梗死(ACI)是老年人常见的心脑血管疾病之一,占全部缺血性卒中的69.6%～70.8%~([1])。认知功能障碍(CI)是ACI后常见的器官损害之一。胱抑素C (Cys C)可能作为心脑血管疾病预后的判定指标之一,但其与ACI后认知功能的关系研究较少~([2-3])。本研究旨在探讨外周血Cys C水平与老年ACI后发生CI的相关性,并分析CI发生的危险因素。现报道如下。     

帕金森病患者外周血白细胞中时钟基因Bmal1和Bmal2的表达

目的研究帕金森病患者时钟基因的表达,探讨帕金森病的分子时钟机制。方法实验对象为17例帕金森病（PD）患者（9例男性,8例女性）和16例正常人对照（9例男性,7例女性）,分别在夜间21：00、00：00、06：00和09：00四个时间点取血样,用实时定量RT—PCR检测时钟基因Bmal1和Bmal2的mRNA表达水平。结果PD患者中,Bmal1在21：00、00：00、06：00的表达水平与正常对照差异具有显著性：21：00[（22．17±4．09）,（51．14±8．31）,P=0．003];00：00[（30．30±5．45）,（100．00±24．71）,P=0．008];06：00[（19．02±3．33）,（65．61±14．11）,P=0．002]。Bmal2在21：00、00：00的表达水平与正常对照差异有显著性：21：00[（48．09±7．40）,（84．96±9．34）,P=0．005];00：00[（65．85±7．88）,（100．00±11．78）,P=0．025]。结论PD患者的周围分子时钟发生了改变。PD患者时钟基因Bmal1和Bmal2在外周血的相对表达水平明显减低,为疾病监控和研究疾病对药物的反应性提供分子基础。     

基于等位基因特异性引物延伸的高分辨率熔解曲线基因分型方法的建立

目的建立基于等位基因特异引物延伸的高分辨率熔解曲线法(allele-specific-extension high resolution melting curve analysis,ASE-HRM)。方法 ASE-HRM法是在普通高分辨率熔解曲线法(high resolution melting curve analysis,HRM)的PCR反应体系中加入一条等位基因特异性延伸引物(allele-specific-extension,ASE),该引物末端终止于单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点,匹配一种等位基因。增加热循环次数,使等位基因特异性引物得以延伸。选取rs1869458位点,用ASE-HRM法和直接测序法对194个人源基因组DNA样品进行基因分型。结果通过分析熔解曲线扩增峰,可区分杂合型和纯合型SNP;通过分析有无引物延伸峰,可区分2种纯合型;同时证明长度为11到13个碱基的ASE引物能得到较好的分型结果;使用锁定核酸(locked nucleic acid,LNA)修饰扩增引物可增加扩增产物和延伸产物的解链温度(melting temperature,Tm)差距,简化基因分型。2种方法对所选DNA样品基因分型所得结果完全吻合。结论 ASE-HRM是一种简单、廉价、闭管并能用于检测所有类型SNP的基因分型法。     

皮肤磷酸化突触核蛋白在路易体痴呆诊断中的应用

本研究选择2019年8月至2021年3月就诊于郑州大学第一附属医院,临床诊断为路易体痴呆、进行性核上性麻痹、阿尔茨海默病、额颞叶痴呆的患者及健康志愿者各3例。通过皮肤神经微活检,检测路易体痴呆患者皮肤磷酸化α-突触核蛋白的沉积,与其他类型痴呆患者和健康志愿者进行比较。路易体痴呆患者皮肤神经可见线状磷酸化α-突触核蛋白沉...     

帕金森病患者外周血白细胞中时钟基因Bmall和Bmal2的表达

目的 研究帕金森病患者时钟基因的表达,探讨帕金森病的分子时钟机制.方法 实验对象为17例帕金森病(PD)患者(9例男性,8例女性)和16例正常人对照(9例男性,7例女性),分别在夜间21:00、00:00、06:00和09:00四个时间点取血样,用实时定量RT-PCR检测时钟基因Bmall和Bmal2的mRNA表达水平.结果 PD患者中,Bmall在21:00、00:00、06:00的表达水平与正常对照差异具有显著性:21:00[(22.17 4±4.09),(51.14±8.31),P=0.003];00:00[(30.30 4±5.45),(100.00 4±24.71),P=0.008];06:00[(19.02 ±3.33),(65.61±14.11),P=0.002].Bma12在21:00、00:00的表达水平与正常对照差异有显著性:21:00[(48.09±7.40),(84.96±9.34),P=0.005];00:00[(65.85±7.88),(100.00±11.78),P=0.025].结论 PD患者的周围分子时钟发生了改变.PD患者时钟基因Bmall和Bma12在外周血的相对表达水平明显减低,为疾病监控和研究疾病对药物的反应性提供分子基础.

Abstract：

Objective To study the expression of clock genes in Parkinson's disease(PD) and also the molecular clock machinery of PD.Methods Seventeen PD patients(nine men,eight women)and sixteen agematched controls(nine men,seven women) were investigated in this study.Bload samples were collected over a 12h span at 21:00,00:00,06:00 and 09:00.Using a real-time PCR assay,the peripheral molecular clock was examined by measuring Bmall and Bmal2 expression in total leukocytes during the dark span(from 21:00 to 09:00)in PD patients and age-matched healthy controls.Results At PD,the relative abundance of Bmall was significantly lower at 21:00,00:00 and 06:00(21:00:(22.17±4.09)vs(51.14±8.31),P=0.003,00:00:(30.30±5.45)vs(100.00±24.71),P=0.008,06:00:(19.02±3.33)vs(65.61±14.11),P=0.002).The relative Bmal2 levels in PD patients were significantly less abundant than controls at 21:00 and 00:00(21:00:(48.09±7.40)vs(84.96±9.34),P=0.005;00:00:((65.85±7.88)vs(100.00±11.78),P=0.025).Conclusion These results suggest that a peripheral molecular clock is altered in PD patients.In addition,the relative abundance of Bmall and Bmal2 was significantly lower in PD patients versus control subjects,which can provide a molecular basis to help monitor disease progression and response to investigational drugs.     

小鼠外周组织时钟基因启动子区甲基化分析

 摘要：目的 建立一种简单快速经济的检测八个主要时钟基因BMAL1、BMAL2、CLOCK、NPAS2、PER1、PER2、CRY1和CRY2启动子区甲基化状态的方法。同时检测小鼠外周组织肝、心、肾、胸腺、睾丸时钟基因启动子区甲基化状态。方法 用偏重亚硫酸氢钠和对苯二酚对基因组DNA进行脱氨基修饰。修饰后的DNA为模板,两套不同的引物对：甲基化特异性引物对和非甲基化特异性引物扩增小鼠肝、心、肾、胸腺、睾丸组织时钟基因启动子区。PCR产物进行电泳和测序。结果 扩增产物与预期片段大小相符合。PCR产物经过直接测序得到进一步证实。结论 成功建立了检测小鼠时钟基因启动子区甲基化的方法,为检测小鼠周围组织时钟基因启动子区甲基化提供了新的方法。同时,成年小鼠所有的八个时钟基因均为非甲基化状态。