A型肉毒毒素多表位串联体的设计、表达、纯化及鉴定

目的:设计、表达两个A型肉毒毒素多表位串联体.方法:从文献报道的A型肉毒毒素(botulinum neurotoxin type A,BoNT/A)的表位及生物信息学方法预测得到的B细胞表位中遴选表位,并加入适当的辅助性元件,设计多表位串联体A、B.对其基因进行优化后,经重叠PCR方法合成串联体A、B的全长基因.分别插入原核表达载体pQE-30,再转化E.coli M15[pREP4]感受态细胞中进行诱导表达,以金属螯合亲和层析法纯化重组蛋白,并进行鉴定.结果与结论:成功设计并构建了两个多表位串联体A、B,并在E.coli中以包涵体形式获得高效表达.Ni-NTA法纯化后分别获得纯度大于92.2%、99%的重组串联体A、B蛋白,并经透析复性法复性.Western印迹和间接ELISA显示纯化、复性后的重组蛋白与抗天然BoNT/A马血清有特异性结合反应.     

细胞凋亡与白血病

细胞凋亡（Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）或程序性细胞死亡（Ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄｃｅｌｌｄｅａｔｈ,ＰＣＤ）是细胞发生的积极的死亡过程。是细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束自己生命的过程。不仅存在于正常组织与器官,调节着机体细胞生长与更新间的平衡稳定,也存在于各种肿瘤组织,与肿瘤的发生有着密切的联系,它与白血病的关系也越来越引起人们的重视,我们就此问题进行综述。１　基本概念细胞凋亡与坏死不同,是机体清除生存组织中单个细胞的一种死亡形式。坏死是病理状态,始于细胞膜的损伤,内容物流出,可以…     

老药“变脸”谁在愚弄百姓？—— 老药换新颜，究竟为哪般

许多药品冠名五花八门．且价格差别比较悬殊。“一药多名”多见于西药尤其是抗生素类药品．有的药品甚至有数十个商品名。“一药多名”不要说消费者，就是执业的医生和药师也很难记全。“一药多名”给医生开处方、药剂师调配，护士执行医嘱等带来诸多不便。厂家挖空心思换个“好名字”,多做些广告后,销售量就大幅度上升。     

育龄期精液和孕妇生殖道分泌物B族链球菌定植和耐药性分析

目的 分析育龄期精液和孕妇生殖道分泌物中B族链球菌（GBS）定植及耐药性情况,指导临床干预治疗。方法 采集生殖中心人工辅助受精精液标本和门诊产前诊断中心、产科孕妇生殖道分泌物标本,进行培养分离和耐药性分析。结果 4480例精液标本检出GBS 369株,定植率为8.24%,2019年、2020年、2021年定植率分别为5.80%、7.44%、10.63%。2157例孕妇生殖道分泌物标本检出GBS 122株,定植率为5.66%,2019年、2020年、2021年定植率分别为6.22%、5.96%、4.73%。所有GBS对青霉素、万古霉素、氨苄西林、利奈唑胺和奎奴普汀/达福普汀全敏感,对克林霉素、红霉素和四环素的耐药率较高,对左氧氟沙星、莫西沙星的耐药率相对较低。结论 育龄期精液GBS定植呈上升趋势,而孕妇生殖道分泌物GBS定值率呈下降趋势。临床干预治疗应重视药敏试验结果合理选用抗菌药物,首选药物为青霉素和氨苄青霉素。     

运用五运六气学说辨治便血验案1则

通过分析肠风下血验案,阐述运气学说在临证中的重要性。认为对于肠风的辨治,可根据其运气特征,"岁金不及,从肺论治";运用整体思维,病在下者取之上,清肝以肃肺,养血而止血,予槐角丸、黛蛤散、胶艾汤治疗。     

中医药治疗反流性食管炎研究进展

中医药治疗反流性食管炎(RE)已取得了良好的临床疗效,在基础研究、实验研究及临床研究等方面均取得了令人瞩目的成果.然而在RE的中医药治疗及研究中还存在一些不足之处,今后应致力于构建一个比较系统的理论体系,并进一步深入研究中医药治疗RE的机理,从而更好的发挥中医的特色与优势.造福患者及全社会.     

旋覆代赭汤对反流性食管炎大鼠血清FT4、TSH的影响

目的:观察旋覆代赭汤对反流性食管炎的疗效并探讨其作用机制方法:采用"食管-十二指肠端侧吻合术",造成大鼠反流性食管炎动物模型。64只大鼠随机分为4组,予以不同治疗后,观察大鼠食管黏膜病理变化及血清游离甲状腺激素(free thyroxine,FT4)、促甲状腺激素(thyrotropic hormone,TSH)浓度。结果:①中药组、西药组体质量增加值分别与模型组比较显著增加(P<0.05)。②中药组、西药组病理形态学光镜检查积分与模型组比较有显著性差异(P<0.05)。③中药组、西药组血清浓度与模型组比较显著升高(P<0.05)。结论:旋覆代赭汤能改善模型大鼠松弛的食管下括约肌,其作用机制可能是提高血清FT4、TSH浓度,促进大鼠食管肌条的收缩幅度、收缩频率,增强消化道蠕动功能。     

旋覆代赭汤对RE模型大鼠食管黏膜Na+-K+-ATP酶及 Ca2+-Mg2+-ATP酶的影响

目的: 观察旋覆代赭汤对反流性食管炎(RE)模型大鼠食管黏膜组织Na⁺-K⁺-ATP酶及Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性的影响,探讨RE食管黏膜细胞能量代谢障碍与黏膜损伤的关系以及旋覆代赭汤治疗RE的作用机制。方法: 将96只雄性Wistar大鼠随机分成6组,即假手术组、模型组、旋覆代赭汤组高、中、低剂量组(24,12,6 g·kg^-1)及西药对照组(奥美拉唑10 mg·kg^-1+2 mg·kg^-1莫沙必利),每组16只。采用"食管-十二指肠端侧吻合术"制备胃及十二指肠液混合RE模型。从术后第3天开始,假手术组、模型组给予生理盐水灌胃,药物治疗组分别给予旋覆代赭汤高、中、低剂量、西药(奥美拉唑10 mg·kg^-1+莫沙必利2 mg·kg^-1)灌胃,连续7天,记录大鼠体重变化及死亡情况,于第8天处死大鼠留取标本,观察食管下段黏膜大体及病理组织学变化;化学法检测食管黏膜组织Na⁺-K⁺-ATP和Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性。结果: 与假手术组比,模型组大鼠体重明显减轻(P<0.05),食管黏膜肉眼及镜下病理改变明显,评分增高(P<0.05);食管黏膜组织Na⁺-K⁺-ATP酶及Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性显著降低(P<0.05);与模型组及西药组比,旋覆代赭汤高、中剂量组大鼠死亡率明显降低(P<0.05):与模型组比,旋覆代赭汤高、中剂量组、西药组肉眼及病理评分显著降低(P<0.05);食管黏膜组织Na⁺-K⁺-ATP酶及Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性明显提高(P<0.05)。结论: 旋覆代赭汤能明显提高RE大鼠食管黏膜细胞膜Na⁺-K⁺-ATP 酶及Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性, 从而保持食管黏膜细胞完整性,减轻黏膜损伤。     

耳穴贴压配合穴位按摩预防骨科术后使用PCIA患者尿潴留的护理效果观察

疼痛是骨科手术后普遍面临的一个问题,不利于患者的治疗,并影响术后康复锻炼.静脉自控止痛(patient controlled intravenous analgesia,PCIA)具有镇痛效果好、用药量少、可根据个体对止痛药的需要投放用药量等优点[1].临床上骨科手术的患者已经广泛使用PCIA,但使用镇痛泵持续自控镇痛的大部分患者可在术后1～2 d出现尿潴留[2].临床护理中有一些可以促使患者排尿的操作,但却不能杜绝尿潴留的发生,为减少术后尿潴留,缩短术后排尿时间,增加术后舒适度,我科在骨科术后使用PCIA患者的常规护理基础上,给予中医护理措施干预,使用耳穴贴压配合穴位按摩,取得满意疗效,现报道如下.