APP695K595N/M596L突变转基因小鼠的建立和病理表型动态分析

目的建立APP695K595N/M596L(Swedish突变)转基因小鼠和评价痴呆表型的发生和发展过程。方法将APP695K595N/M596L突变基因插入到小鼠朊蛋白(mouse prion protein)启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射法建立APP695K595N/M596L突变转基因C57BL/6J小鼠。PCR鉴定转基因小鼠的基因表型,Western blotting检测APP突变基因表达。Thioflavin-S染色检测不同年龄转基因小鼠大脑病理改变。Morris水迷宫动态观察小鼠行为学改变。结果建立了人APP695K595N/M596L转基因小鼠,Thioflavin-S染色显示转基因小鼠9月龄时在脑海马区可检测到老年斑形成,并且在11、12月龄时明显增多。Morris水迷宫结果发现与同月龄野生型小鼠相比,该转基因小鼠5月龄开始出现学习记忆能力缺陷,7、9、11月行为学结果证实转基因小鼠的学习记忆能力缺陷随年龄增加而日趋严重(P<0.05)。结论建立了人APP695K595N/M596L转基因小鼠,并能再现人类阿尔茨海默症的行为学及神经病理学特征,为阿尔茨海默病发病机制研究和药物研发提供了有价值的动物模型。     

敲除淀粉样前体蛋白基因促进铝诱导的小鼠认知障碍损伤

目的 淀粉样前体蛋白(APP)基因是与痴呆症发生发展相关的重要基因,利用APP基因敲除小鼠探讨铝诱导的认知障碍损伤,及APP对中
毒性认知障碍损伤的作用。方法 3月龄同窝阴性小鼠分为野生对照组（WT）和铝处理组（WT+Al）,APP敲除小鼠分为模型对照组（APP^-/- ）和
模型处理组（APP^-/- +Al）,每组10只。铝处理组在粮食中加入相应剂量的乳酸铝,同窝阴性小鼠和APP^-/-小鼠给予常规鼠粮作为对照,乳酸
铝处理8周后进行水迷宫实验。HE染色观察小鼠脑组织神经病理改变;Western blotting检测糖原合成激酶3β(GSK-3β)和Caspase-3的活性变
化。结果 与WT相比,WT+Al小鼠在原平台区域停留时间和穿越原平台区域次数减少了28.1%和18.8%,而APP^-/- +Al小鼠在原平台区域停留时间
和穿越原平台区域次数减少了44.1%和51%。Western blotting显示,WT+Al小鼠和APP^-/-+Al小鼠脑组织中p-GSK-3β分别减少了17.4%和46.4%。结论 APP基因敲除促进铝诱导的神经毒性和学习记忆损伤。APP基因敲除导致GSK-3β的磷酸化水平降低、活性增高。由于GSK-3β活性增加对痴呆症具有促进作用,推测APP通过抑制GSK-3β活性在痴呆症发生过程中发挥保护效应。     

12种中药单体对APPswe/PS△E9转基因痴呆模型小鼠学习记忆作用的比较

目的 利用APPswe/PS△E9转基因阿尔茨海默病小鼠模型探索治疗痴呆有效的中药单体.方法 根据目前的研究资料,选定12种中药单体,加入鼠粮中对APPswe/PS△E9双转基因小鼠在5月龄开始进行治疗,以安理申作为阳性药对照,4周后进行水迷宫实验,并与安慰剂组小鼠进行比较.结果 在水迷宫实验中,与安慰剂组相比,吴茱萸碱能够显著缩短寻找平台的潜伏期,显著增加穿过原平台区的次数.结论 吴茱萸碱能够显著改善APPswe/PS△E9痴呆模型小鼠的学习记忆能力.     

利用Micro-PET显像技术分析阿尔茨海默病小鼠模型的脑糖代谢

目的 利用小动物PET（Micro-PET）影像技术18氟-脱氧葡萄糖（¹⁸F-FDG）摄取率分析阿尔茨海默病(AD)小鼠模型的脑糖代谢,探索评价治疗AD药物的影像分析技术。 方法 正常对照组、APP^swe/PSΔE9转基因模型组和安理申［2 mg/(kg&#8226;d)］治疗组小鼠共9只,自腹腔注射放射性示踪剂¹⁸F-FDG,采集脑部Micro-PET图像,通过软件IRW计算并比较各组小鼠大脑与额叶、颞叶感兴趣区（ROI）每克组织¹⁸F-FDG的摄取率。 结果 利用¹⁸F-FDG 的Micro-PET影像分析可以检测AD小鼠模型的脑糖代谢,并发现APP^swe/PSΔE9转基因小鼠的脑糖摄取明显降低,与人类AD患者表现的脑糖摄取降低一致,安理申治疗可以提升APP^swe/PSΔE9转基因小鼠的脑糖摄取。 结论 ¹⁸F-FDG Micro-PET影像分析可以用于小鼠AD模型脑葡萄糖代谢水平的检测,并可以作为阿尔茨海默病治疗药物提升脑糖代谢作用的分析技术。     

柚皮苷及其与吴茱萸碱联合用药对APPswe/PSΔE9转基因痴呆模型小鼠学习记忆能力的影响

目的探讨柚皮苷及柚皮苷与吴茱萸碱联合用药对APP^swe/PSΔE9转基因痴呆模型小鼠学习记忆能力的影响,研究柚皮苷与吴茱萸碱联合使用是否具有协同或叠加作用。方法APP^swe/PSΔE9转基因痴呆模型小鼠随机分组,每组12只,雌雄各半,分别选择在3月龄和5月龄两个时间段开始进行治疗,各给药组按设定剂量分别单独或联合加入鼠粮中。3月龄给药16周、5月龄给药4周后进行水迷宫实验,以安理申作为阳性药对照,并与安慰剂组小鼠进行比较。Thioflavin-S荧光染色检测单独使用柚皮苷治疗转基因小鼠脑组织老年斑的形成。结果单独使用柚皮苷4周和16周,缩短寻找平台的潜伏期分别为22%、32%;单独使用吴茱萸碱4周和16周,缩短寻找平台的潜伏期分别为33%、10%。柚皮苷治疗16周减少海马老年斑26%。柚皮苷与吴茱萸碱联合应用能够显著缩短寻找平台的潜伏期47%。结论单独使用柚皮苷或吴茱萸碱均能改善痴呆模型小鼠的学习记忆能力,柚皮苷长期的使用优于短期的治疗效果,但是吴茱萸碱短期有效,长期作用反而下降;柚皮苷与吴茱萸碱联合应用能够显著改善APP^swe/PSΔE9痴呆模型小鼠的学习记忆能力,但联合用药组并未表现出强于单独给药组的协同保护效应。     

微生物学“创新教育”的构建与实践

在科学技术发展的今天,新型学科、交叉学科及边缘学科的不断出现,也使得各门学科的知识都在不断地更新和充实,医学微生物学的内容也不例外,所以医学微生物学的教学内容也应随着时代的变迁而变化。     

医学研究生学位论文的发展趋势与跨学科研究特点分析——以病原生物学交叉神经生物学为例

目的：分析我国医学研究生学位论文发展趋势和跨学科研究特点,为医学研究生培养及医学研究生创新和实践能力提升提供参考。方法：用中国知网“学科专业名称”模块检索2003—2022年病原生物学和神经生物学专业研究生学位论文,以论文数据库、下载和被引、学科与基金标注为对象,加以授予年度和学位类型进行整理与统计分析。结果：检索到符合条件的学位论文共7 909篇,硕士学位论文多于博士学位论文,病原生物学论文多于神经生物学论文;下载和被引次数博士论文较硕士论文多且变化大,上浮明显时博士论文先于硕士论文、病原生物学论文先于神经生物学论文发生变化;被引明显偏低,且0次被引现象普遍存在;与神经生物学论文比,病原生物学论文学科交叉保持上升态势且受硕士论文跨学科选题影响更大;基金标注数病原生物学论文多于神经生物学论文,但标注率仅病原生物学博士论文较硕士论文升高。结论：病原生物学和神经生物学专业的研究生学位论文被引次数均明显偏低,但进行学位论文研究时大多偏爱跨学科选题,尤其是病原生物学相关的博士学位论文更注重跨学科研究。     

川芎嗪对痴呆小鼠模型学习记忆能力的影响

目的研究川芎嗪对痴呆小鼠学习记忆的影响。方法对APPswe/PSΔE9双转基因小鼠在3月龄开始食物中连续给川芎嗪(100 mg/kg.d)进行治疗,停药后立即进行水迷宫实验,并与未给药APPswe/PSΔE9双转基因小鼠和及野生鼠进行比较。结果治疗组与APPswe/PSΔE9双转基因组比较,平台寻找潜伏期缩短,穿过原平台区的频次增加。结论川芎嗪能改善APPswe/PSΔE9痴呆模型小鼠的学习记忆能力。     

直接贴壁法诱导人胚胎干细胞分化为心肌细胞

摘要：目的利用直接贴壁法体外诱导人胚胎干细胞分化为心肌细胞,并检测其分化效率。方法人胚胎干细胞以1×10’个／cm2的细胞密度传代到铺备有基质胶的培养皿中培养,用带8ng／ml碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的条件培养基培养6d后,更换为RPMI1640．B27培养基,同时加入100ng／ml的人重组activinA处理24h,接着再加入10ng／ml的人重组骨形态发生蛋白4（BMP4）处理4d,之后更换为不带诱导因子的RPMI1640．B27培养基,每隔2～3d换1次培养基,持续2～3周。在光学显微镜下观察记录出现跳动心肌细胞的时间和跳动频率,并计算跳动克隆百分比,24孔板一组,共记录4组96孔;用免疫荧光染色法检测心肌细胞特异标志物心肌肌钙蛋白T（cTnT）;膜片钳实验检测心肌细胞自发性动作电位;跳动心肌细胞经过24h缺氧刺激后,用凋亡试剂盒检测心肌细胞凋亡比例。结果大量的自发跳动心肌细胞在诱导分化13d左右开始出现。分化出现自发跳动心肌细胞的时间为（13．0±1．1）d,百分比为66．7％,跳动频率为（63．0±7．0）次／分;跳动心肌细胞cTnT染色阳性;跳动心肌细胞检测到自发性动作电位;跳动心肌细胞缺氧24h后检测到凋亡比率为8．0％±0．5％。结论国内首次利用直接贴壁法在体外诱导人胚胎干细胞分化为心肌细胞,分化效率达到66．7％,分化时间13d左右。     

医学微生物学理论课中小班教学效果探讨

探讨大学本科医学微生物学理论课教学中,小班教学能否提高学生的成绩。收集卓越医师班和卓越护师班在大班和小班条件下的学习成绩,以普通班作为参照,比较两种条件下的学习情况后发现,卓越医师班和卓越护师班在小班条件下的学习效果反而不及大班条件下的学习效果。