新型分化培养基增强HepG2肝细胞功能的研究

目的探讨自行研发的肝细胞成熟培养基(Hepatic Maturation Medium,HMM)是否能够提高肝肿瘤细胞系HepG2的肝细胞功能,并联合3D培养开发一种更适于HepG2的培养体系。方法从细胞库中取得人类肝癌细胞株HepG2。分别用DMEM及HMM进行细胞的2D及3D培养,通过定量PCR、PAS染色、尿素合成等方法进行功能评价,最后在3D模型下比较DMEM及HMM培养的HepG2与氯丙嗪肝毒性的敏感性,综合评价HMM对HepG2的作用。结果 HMM可以提高HepG2的糖原合成能力,并使其CYP3A4、NTCP、ALB、CPS1、G6PC等肝细胞功能基因的表达水平分别上调4.7±0.2、1.3±0.1、1.4±0.1、4.9±0.2、5.6±0.1倍。当HMM联合3D培养后,相对于2D培养HepG2,其CYP3A4、NTCP、CPS1、G6PC等肝细胞功能基因的表达水平及尿素合成能力进一步提高6.5±0.6、2.0±0.03、2.3±0.2、77±1.2、479±196倍。此外,HMM显著改善了3D环境下的HepG2对于氯丙嗪毒性的敏感性。结论不论是在2D还是3D条件下,HMM均可以改善HepG2的肝细胞功能,HMM联合3D培养将有利于HepG2为基础的研究。     

麻醉相关神经网络在麻醉深度监测中的研究进展

麻醉深度把握不当不仅不利于麻醉的快速平稳复苏,也可影响患者术后转归。因此,精准把控麻醉深度是麻醉学领域亟待解决的临床和科学问题。目前临床主要基于脑电图(EEG)信号监测衍生出的不同算法模型进行麻醉深度的监测,然而并不能满足麻醉医生对于麻醉深度精准把握的要求。近年来,有关麻醉相关神经网络机制及其调制的研究提示,其作为麻醉深度监测的方法具有潜在价值。麻醉相关神经网络主要包括睡眠觉醒环路、丘脑-皮质环路及皮质-皮质网络。深入理解参与麻醉引起意识消失的神经网络,将更为精准地指导麻醉深度监测,为提高临床麻醉复苏质量提供可能。     

永生化肝脏前体样细胞可用于生物人工肝治疗的研究

目的对肝前体样细胞(hepatocyte-derived liver progenitor-like cells,HepLPC)进行功能验证,为生物人工肝应用寻找新的种子细胞。方法通过两步分离法分离人原代肝细胞,荧光激活细胞分选术纯化肝细胞以排除CD24+或EpCAM+阳性祖细胞获得HepLPC,采用Large T抗原对HepLPC进行永生化(iHepLPC),从细胞形态、增殖状态、功能基因水平、解毒与合成水平以及急性肝衰竭毒性血浆的反应对iHepLPC进行综合评估,判断其是否具有相应的功能。结果永生化后iHepLPC可以在不同代次间快速稳定的增殖,P0、P10与P20代次之间同一时间点细胞的增殖速度相似,差异无统计学意义(P0.05),细胞形态保持不变,增殖过程中的细胞解毒与合成功能稳定,代次之间差异无统计学意义(P0.05);对iHepLPC细胞进行M7分化,分化后细胞的功能基因有显著的提高,尿素生成(13.683±1.238)高于未分化的7.769±0.323(P0.01);分化后白蛋白合成11.270±0.63,高于未分化的5.655±0.025(P0.01);对于急性肝衰竭血浆具有一定的耐受力同时发挥着解毒与合成功能,6 h候后尿素合成达到(8.25±0.31)mg/(dL·10~6细胞·d),白蛋白合成达到(12±0.41)ng/(mL·10~6细胞·d)。结论永生化后的HepLPC在快速增殖的过程中可以保持细胞形态、解毒与合成功能不变,对急性肝衰竭血浆具有一定的耐受力是新的生物人工肝细胞源。     

间充质干细胞来源的外泌体对脂多糖诱导的血管内皮损伤的影响及其机制

目的 探究间充质干细胞来源外泌体(MSC-Exos)在脂多糖(LPS)诱导的内皮细胞功能障碍中的作用.方法 从人脐带组织中分离出间充质干细胞(MSC),采用超速离心法从细胞上清液中分离出外泌体并进行鉴定.将脐静脉内皮细胞(HUVEC)随机分为对照组、LPS组和MSC-Exos组,每组8例.以LPS诱导HUVEC损伤,M...     

B42-06金门改组:基于限制性内切酶的一锅法DNA体外改组

发展了一个新的DNA体外改组方法,即金门改组(Gold Gate shuffling),该方法能在一个试管内只需一步将至少9个DNA片段装配到一个受体载体,所获90%的重组克隆含     

抗抑郁药筛选模型的研究进展

抗抑郁药是近年药物研发领域的热点之一.现有抗抑郁药主要通过系统筛选途径获得,本文回顾多种体内和体外药物筛选模型,综述其在抗抑郁药筛选中的研究进展.     

甘草总皂苷及水提物对肝损伤大鼠肠道菌群的影响

目的探讨甘草总皂苷及水提物对肝损伤大鼠肠道菌群的影响。方法采用ip四氯化碳诱导大鼠慢性肝损伤模型,模型大鼠分为4组,分别ig给予甘草总皂苷和甘草水提物,并以联苯双酯作为阳性对照组,模型组ig生理盐水。同时设对照组,ig给予生理盐水。于给药结束后,测定各组大鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平;收集大鼠粪便,通过16 S rRNA测序对各组大鼠肠道菌群的多样性进行分析。结果与对照组比较,模型组大鼠血清中ALT、AST水平显著升高(P0.05、0.01);与模型组比较,各给药组大鼠血清中ALT、AST水平均显著降低(P0.05、0.01);与模型组比较,联苯双酯组大鼠菌群结构未发生显著变化,而甘草总皂苷组及甘草水提物组均表现出不同的群落组成。并且相对于水提物组,总皂苷组显著提高了乳酸杆菌属和杆菌门S24-7科菌群的相对丰度。但甘草总皂苷组和甘草水提物组的大鼠肠道菌群与对照组大鼠肠道菌群之间仍存在差异,并没有完全恢复到正常状态。结论甘草总皂苷与甘草水提物均可以改善慢性肝损伤,并对肝损伤大鼠肠道菌群发挥不同的调控作用。     

基于发展性学业辅导 构建药学类学业指导教师体系

发展性学业指导是从传统的重指导、重矫正的指导模式向重发展、重预防的辅导模式的转变,是在遵循人的成长规律和教育目标的基础上,面向全体学生实施的学生内在行为潜能的开发。构建药学类学业指导教师体系从建立健全的学业指导组织体系、建设专业性学业指导教师队伍、开展药学类学业指导的特色工作及常规工作、规范学业指导教师的考核等多方面进行实践改革,给学生提供更加专业化、个性化的发展性学业指导服务。