β连环蛋白信号通路和Wnt诱导的分泌型蛋白1在肝硬化大鼠心肌肥厚中的作用机制研究

目的探讨肝硬化大鼠心肌中Wnt诱导的分泌型蛋白1(WISP-1)表达及其与Wnt/β连环蛋白(β-catenin)信号通路在肝硬化大鼠心肌肥厚中的作用机制。方法将23只SD大鼠随机分为模型组15只和对照组8只,模型组按2ml/kg腹腔注射40%四氯化碳茶油溶液制备肝硬化大鼠模型,对照组给予相同浓度的食用油溶液腹腔注射,2次/周,连续8周。电镜观察心肌超微结构变化,采用Western blot法检测大鼠心肌组织中β-catenin和WISP-1表达。结果喂养8周,模型组和对照组大鼠体质量较喂养1周明显增长(P0.01),且模型组体质量明显低于对照组[(379.38±46.93)g vs (456.00±64.21)g,P0.05]。对照组肌丝致密,肌节排列规整,Z线清晰可见,线粒体丰富,心肌细胞结构正常,闰盘可见丰富桥粒;模型组心肌大面积空泡化,部分肌丝断裂,闰盘桥粒减少或细胞连接间断。模型组β-catenin和WISP-1表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.01)。结论 Wnt/β-catenin信号通路和WISP-1参与肝硬化所致心肌肥厚的病理过程。     

早期使用小剂量多巴胺联合呋塞米治疗心力衰竭的疗效分析

目的 探讨早期应用小剂量多巴胺联合呋塞米在心力衰竭治疗中的临床效果,为其临床应用提供参考。 方法 采用随机数字表法,将2015年2月-2016年8月就诊于杭州市西溪医院的104例心力衰竭患者分为对照组和观察组,每组52例。对照组给予呋塞米,观察组加用小剂量多巴胺。统计2组临床总有效率、收缩压、左心室射血分数(LVFE)、左心室舒张末内径(LVIDd)、N末端B型脑钠肽(NT-PROBNP)含量及不良反应。2组数据采用统计学软件进行分析,进而探讨早期应用小剂量多巴胺联合呋塞米在心力衰竭治疗中的临床效果。 结果 观察组总有效率为96.15%,显著高于对照组的82.69%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后2组LVFE水平显著升高,且观察组LVFE水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后2组LVIDd及NT-PROBNP水平显著降低,且观察组LVIDd及NT-PROBNP水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组不良反应发生率为7.69%,对照组不良反应发生率为9.62%,2组比较差异无统计学意义(P>0.05)。 结论 给予心力衰竭患者早期使用小剂量多巴胺联合呋塞米,可明显改善患者的心功能状况,利于预后恢复,值得临床应用。      

β连环蛋白在肝硬化大鼠心肌肥厚中的作用机制研究

目的探讨肝硬化大鼠心肌中的β连环蛋白(β-catenin)表达,以阐明β-catenin在肝硬化大鼠心肌肥厚中的作用机制。方法建立肝硬化大鼠模型,通过模型组和对照组比较,免疫组化法检测各组心肌组织中β-catenin表达水平; Western blot检测大鼠心肌中的β-catenin和Wnt诱导的分泌型蛋白1(WISP-1)表达差异。结果模型组体重增长较慢,且小于对照组。免疫组化及Western blot结果显示对照组β-catenin蛋白的表达水平低,肝硬化模型组β-catenin蛋白的表达水平高,二者比较差异有统计学意义(P 0. 01)。结论 Wnt/β-catenin(Wnt/β-连环蛋白)信号通路参与肝硬化所致心肌肥厚的病理过程。     

NF-κB对病毒性心肌炎小鼠心肌中促炎细胞因子的调控

目的 探讨核因子-κB （NF-κB）对A型流感病毒（IAV）性心肌炎小鼠心肌中促炎细胞因子的调控作用。方法 30只8周龄雄性BALB/c小鼠随机分3组：1正常对照组（C组）：经鼻吸入15μl生理盐水;2感染对照组（I组）：经鼻吸入40空斑形成单位（pfu） IAV;3PDTC组（P组）：经鼻吸入40pfu IAV,腹腔注射NF-κB抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸（PDTC）（10mg/kg）,每天1次。感染后第9天处死小鼠,切取心脏组织进行病理及生化检查。结果 IAV感染可诱导心肌中促炎细胞因子白介素（IL）-1β、IL-6及肿瘤坏死因子（TNF）α显著上调（P<0.01,P<0.05）,引发心肌急性炎性反应,部分心肌组织坏死。PDTC显著抑制促炎细胞因子在心肌中表达（P<0.01）,有效抑制IAV病毒复制（P<0.01）,减轻心肌炎性反应。结论 IAV感染心肌组织后可能通过NF-κB信号通路诱导心肌中促炎细胞因子表达上调,抑制NF-κB激活可能为预防和治疗流感病毒性心肌炎提供新的思路。     

瘦素对大鼠主动脉血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨瘦素对大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和凋亡的影响。方法体外培养大鼠的主动脉VSMC,按照不同浓度瘦素的处理方法将细胞分为对照组、小剂量组(瘦素40μg/L)、中剂量组(瘦素80μg/L)、高剂量组(瘦素100μg/L)及联合组(瘦素100μg/L+脂联素30mg/L),对照组细胞不做任何处理。孵育24h检测VSMC活性、VSMC凋亡率及增殖细胞核抗原(PCNA)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)mRNA表达水平。结果与对照组比较,小、中、大剂量各组及联合组VSMC的增殖率与PCNA mRNA表达水平明显升高、VSMC凋亡率与caspase-3mRNA表达水平明显降低,差异有统计学意义(P0.05)。小、中、大剂量各组VSMC的增殖率和PCNA mRNA表达水平逐渐升高、VSMC凋亡率和caspase-3mRNA表达水平逐渐降低(P0.05)。中剂量组与大剂量组VSMC的增殖率明显高于联合组,VSMC凋亡率明显低于联合组,差异有统计学意义[(17.9±1.0)%和(19.3±1.0)%vs(16.9±4.0)%,(2.5±0.6)%和(1.5±0.4)%vs(4.0±0.4)%,P0.05]。Spearman相关分析显示,血清瘦素水平与VSMC的增殖呈正相关(r=0.37,P0.05),与VSMC的凋亡率呈负相关(r=-0.19,P0.05)。结论瘦素可以促进平滑肌细胞的增殖,抑制平滑肌细胞凋亡,这一作用可以被脂联素所抑制。     

NF-κB和AP-1对A型流感病毒性心肌炎组织中异位胰蛋白酶及促炎细胞因子表达的调控

目的:探讨核因子κB(NF-κB)及激活蛋白1(AP-1)对A型流感病毒(IAV)性心肌炎心肌组织中异位胰蛋白酶及促炎细胞因子表达的调控作用。方法:40只8周龄雄性BALB/c小鼠随机分为4组:正常对照组经鼻假感染15μL生理盐水;感染对照组经鼻感染40空斑形成单位(PFU)IAV;NF-κB抑制剂组经鼻感染40 PFU的IAV,腹腔注射吡咯烷二硫代氨基甲酸(PDTC)10 mg/kg,每天1次;AP-1抑制剂组经鼻感染40 PFU的IAV,腹腔注射去甲二氢愈创木酸(NDGA)2.5 mg/kg,每天1次。感染后第9天处死小鼠,切取心脏组织分别进行病理及生化检查。结果:IAV感染可诱导心肌组织中异位胰蛋白酶及促炎细胞因子白细胞介素(IL)-6、IL-1β及肿瘤坏死因子(TNF)-α表达显著上调,引发心肌急性炎症反应。PDTC能显著抑制心肌中NF-κB激活以及异位胰蛋白酶和促炎细胞因子表达上调,有效抑制IAV复制,减轻心肌炎症反应(P0.01)。NDGA能有效抑制AP-1活性(P0.01),轻度抑制促炎细胞因子表达上调(P0.05),但对异位胰蛋白酶表达、IAV复制及心肌炎症程度无显著影响(P0.05)。结论:IAV感染心肌组织后主要通过激活NF-κB诱导心肌中异位胰蛋白酶及促炎细胞因子表达上调,AP-1通路可能仅部分参与了促炎细胞因子的表达调控。