siRNA靶向沉默PcG蛋白EZH2对人胃癌细胞株MKN45增殖和侵袭力的影响

背景：PcG蛋白是一组转录抑制因子,其核心成分EZH2在胃癌组织中表达增高,并与胃癌的进展相关。目的：应用RNA干扰（RNAi）技术研究EZH2对人胃癌细胞株MKN45增殖和侵袭力的影响,从细胞水平探讨EZH2参与胃癌发生的机制。方法：使用EZH2小干扰RNA（siRNA）转染MKN45细胞,以实时逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白质印迹法检测EZH2mRNA和蛋白表达,CCK-8（Cell Counting Kit-8）实验检测细胞增殖情况,流式细胞仪分析细胞周期．MatrigelTM侵袭实验检测细胞侵袭力。结果：EZH2siRNA能有效抑制MKN45细胞的EZH2mRNA和蛋白表达。与阴性对照siRNA组相比,EZH2siRNA组MKN45细胞增殖抑制率为14．7％（P＜0．05）,侵袭能力显著降低[穿过Transwell小室膜细胞数：（38．5±3．4）个／HPF对（92．7±9．7）个／HPF,P＜0．05）,细胞周期阻滞于G0／G1和G2／M期。结论：EZH2siRNA可抑制人胃癌细胞的增殖和侵袭力,证实EZH2通过促进细胞增殖和侵袭在胃癌发生中发挥作用。     

微小RNA-218在胃癌中的表达与作用

目的 检测微小RNA-218(miR-218)在胃癌组织中的表达水平及其功能,探讨miR-218在胃癌发生、发展中的作用和意义.方法 采用发夹状引物的逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测20例非贲门胃癌组织和正常胃黏膜组织中miR-218的表达水平.通过转染不同的外源性分子,改变胃上皮AGS细胞miR-218的表达水平,检测miR-218对细胞增殖、凋亡、细胞周期和侵袭能力的影响.结果 与正常胃黏膜组织相比,miR-218在胃癌组织中呈低表达(P＜0.01),其比值平均为0.19(范围0.01～0.70).流式细胞技术检测结果显示,转染miR-218前体的AGS细胞凋亡率(21.6%)明显增加,与转染阴性参照(10.4%)的AGS细胞差异有统计学意义(P＜0.05).与转染阴性参照比较,转染miR-218前体可明显抑制细胞增殖(P＜0.01).Transwell试验证实,AGS细胞在转染miR-218前体后,细胞侵袭能力明显减弱(P＜0.05).结论 在胃癌组织中,miR-218的表达降低,miR-218具有促进细胞凋亡、抑制细胞增殖和侵袭的功能.     

邻苯二甲酸二丁酯对子代果蝇生长发育的影响

目的 研究邻苯二甲酸二丁酯(di-n-butyl phthalate,DBP)对子代果蝇生长发育的毒性作用.方法 将800只黑腹果蝇随机分为4组,分别给予含DBP为0%,0.2%,0.6%和1.8%的培养基喂饲,雌、雄蝇配对产子,观察子代生长发育情况.结果 所有染毒组子1代(F1代)和子2代(F2代)孵化速度均比对照组减慢(均P＜0.01),在相同染毒浓度下,0.6%和1.8%染毒组F2代果蝇比F1代果蝇相对更慢(均P＜0.05).F1代果蝇和F2代果蝇的1天龄死蝇率随DBP浓度增高呈明显上升趋势,F2代果蝇1.8%组1天龄死蝇率明显高于同浓度组F1代果蝇;F1代和F2代雌、雄蝇体重与DBP浓度呈负相关关系,r值分别为-0.9694(P＜0.01)、-0.8394(P＜0.01)、-0.935 3(P＜0.01)、-0.8624(P＜0.01).结论 DBP染毒后可影响雌、雄性黑腹果蝇的生长发育,并具有一定的世代蓄积效应.     

邻苯二甲酸二丁酯对果蝇生育力和寿命影响

目的研究邻苯二甲酸二丁酯（DBP）对果蝇生育力和寿命的毒性作用。方法将果蝇随机分为4组，分别给予含DBP为0，0．2％，0．6％和1．8％的培养基喂饲，雌雄配对产子，每日观察并记录子代孵化数和亲代存活数。结果各染毒组果蝇不育的比例高于对照组，1．8％浓度组果蝇的平均生育数显著低于对照组（P〈0．05）；随着DBP浓度的增加，雌蝇平均产卵期逐渐缩短；雌雄果蝇的平均寿命也逐渐缩短。结论DBP干扰了果蝇正常的生长发育和新陈代谢，使其生育能力降低，并加速其衰老。     

PcG蛋白EZH2在胃癌发生发展过程中的表达及其临床意义

背景:EZH2是表观遗传调控因子PcG蛋白的核心成分,可通过催化组蛋白H3氨基末端第27位赖氨酸发生三甲基化而抑制靶基因表达。研究发现EZH2在前列腺癌、乳腺癌、胃癌等恶性肿瘤组织中表达增高,并与肿瘤进展和预后差相关。目的:探讨EZH2在胃癌发生、发展中的作用和临床意义及其与细胞增殖的关系。方法:应用免疫组化技术检测32例正常胃黏膜、34例慢性非萎缩性胃炎、33例慢性萎缩性胃炎、40例异型增生和69例胃癌组织中EZH2、Ki-67的表达情况,分析EZH2与Ki-67和胃癌临床病理特征之间的相关性。结果:EZH2在正常胃黏膜和慢性胃炎组织中主要表达于腺颈部,在正常胃黏膜、慢性非萎缩性胃炎、慢性萎缩性胃炎和异型增生组织中,其表达水平逐渐增高(P0.05),异型增生与胃癌组织间则无明显差异(P=0.678)。各病变组织中,EZH2与Ki-67的表达水平均呈正相关(P0.01),所有组织中EZH2总体表达水平显著高于Ki-67(P0.01)。胃癌组织中EZH2的表达水平与肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移和TNM分期相关(P0.05)。结论:EZH2过表达是胃癌发生过程中的早期分子事件,其可能通过促进胃腺上皮增殖参与了胃癌的发生、发展过程。     

PcG蛋白EZH2与消化系肿瘤

PcG蛋白在控制胚胎发育、X染色质失活、基因组印迹、干细胞自我更新以及肿瘤的发生、发展中发挥重要作用。EZH2是PcG蛋白的核心成分，在多种消化系肿瘤中表达增高，并与肿瘤的进展和预后差相关。本文就PcG蛋白的结构、功能以及EZH2在消化系肿瘤中的作用及其机制作一综述。