以CpG ODN为靶点应用生物传感器技术筛选抗炎中药

目的:筛选具有拮抗CpGODN作用的抗炎中药。方法:将CpGODN包被于生物传感器的生物素化样品池上,测定78种中药水煎液与CpGODN的亲和力;选择具有较高亲和力的中药水煎液,与CpGODN(33μg·ml-1)37℃孵育30min后,再次测定与CpGODN的亲和力。结果:78种中药中,地榆、大黄、藏青果等14种中药含有结合CpGODN的活性成分;鸦胆子、赤芍、地榆等9种中药活性成分含量较高。结论:筛选得到9种活性含量较高的中药,为下一步分离提纯有效成分单体提供了实验依据。     

非骨水泥型与骨水泥型全髋置换术治疗强直性脊柱炎髋关节病变的临床疗效比较

目的 探讨非骨水泥型与骨水泥型全髋关节置换术治疗强直性脊柱炎髋关节病变的临床疗效比较.方法 将63例(103髋)强直性脊柱炎累及髋关节的患者随机分成行A、B两组,A组33例(58髋)行骨水泥型全髋置换术,B组30例(45髋)行非骨水泥型全髋置换术,平均随访时间为21.3(16～50)个月.比较两组患者手术后Harris 评分优良率和术后假体松动发生率.结果 所有患者术后临床症状及髋关节功能均得到明显改善.A、B 两组Harris 评分明显提高,但两组优良率比较差异无显著性意义(P>0.05);而A组术后有6例发生假体松动,B组无假体松动病例,假体松动发生率两组比较差异有显著性意义(P<0.05).结论 非骨水泥全髋关节置换术是治疗强直性脊柱炎髋关节病变预防假体松动的有效方法.     

丙型肝炎5''''非编码区末端快速基因扩增方法的建立及应用

目的 建立快速获得丙型肝炎（HCV）基因组5’非编码区（5’uTR）真末端序列的分子生物学方法。方法 逆转录后利用末端聚合酶（TOT）进行加尾反应，再利用套式聚合酶链反应（PCR）扩增出目的末端基因的cDNA片段，A-T克隆，用限制性内切酶片段长度多态性分析（RVLP）与PCR鉴定重组子，全自动序列分析仪测定插入子序列。结果 cDNA末端快速扩增技术（RACE）获得5株HCV5’UTR克隆，包括3株全长克隆和2株缺失克隆。2株缺失克隆，一条在5’末端缺失53个碱基，另一条缺失144个碱基。结论 RACE技术快速、有效、实用，可有效获得丙型肝炎病毒基因组的5’非编码区末端序列。     

基因1b型丙型肝炎病毒NS5A区变异及其与聚乙二醇干扰素α-2a联合利巴韦林治疗应答的相关性

目的探讨基因1b型慢性丙型肝炎患者NS5A区基因变异与聚乙二醇干扰素α-2a（PEG—IFNα-2a）联合利巴韦林（RBV）抗病毒治疗疗效的关系。方法回顾性选择15例应用PEG—IFNα-2a／RBV抗病毒治疗的基因1b型慢性丙型肝炎患者,其中7例为快速应答（RVR）,8例为无应答（NR）,应用RT—PCR法扩增NS5A全长片段,用克隆测序方法进行核苷酸和氨基酸序列测定。结果没有发现与治疗应答相关的单个氨基酸或基序变异,RVR组和NR组在NS5A、ISDR、PKRBD和IRRDR区的氨基酸突变数目差别均无统计学意义,RVR组在V3区（aa2356～2379）的氨基酸突变数目高于NR组（分别为5．3±0.5和3．4±0．6,P=0．03）。结论V3区的氨基酸突变数目与PEG—IFNα-2a联合RBV抗病毒疗效可能相关。     

肾病综合征患者血清Ig和补体C3的测定及临床意义探讨

目的通过对肾病综合征和其他常见的几类肾脏疾病进行血清免疫球蛋白(Ig)的测定,探讨肾病综合征体液免疫功能的变化。方法采用散射免疫比浊法(nephelometry)和酶联免疫吸附法(ELISA)分别对肾病综合征(NS)、慢性肾小球肾炎(CN)、慢性肾衰竭(CRF)氮质血症期和尿毒症期及正常对照组进行Ig和补体C3的测定。结果NS患者IgG为(5.92±3.71)g/L,明显低于其他各组(P<0.01),而IgM和IgE水平高于其他肾病组及正常对照组(P<0.05),慢性肾衰竭(CRF)尿毒症期血清补体C3水平低于其他各组(P<0.05)。结论血清Ig测定在肾病综合征的诊断和治疗过程中具有重要的临床意义。     

妇女泌尿生殖道支原体检测和耐药性分析

目的了解妇女泌尿生殖道支原体的感染及耐药情况．为临床提供用药参考。方法采用一体化试剂盒,对疑似非淋菌性尿道炎（NGU）女性患者宫颈分泌物进行支原体培养、鉴定及药敏试验。结果441例疑似非淋菌性尿道炎患者中,支原体培养阳性率为35．8％（158例）。其中主要为解脲支原体（Uu）感染,占感染者的81．0％;人型支原体（Mh）阳性率为5．1％;Uu和Mh混合感染阳性率为13．9％。药敏试验显示支原体主要对美满霉素（82．2％）、强力霉素（80．4％）等抗生素敏感,对环丙沙星（50．3％）、螺旋霉素（48．6％）、氧氟沙星（42．7％）等抗生素耐药。结论NGU女性患者支原体感染主要为解脲支原体,对环丙沙星、螺旋霉素、氧氟沙星等抗生素耐药性较高,而对美满霉素、强力霉素等抗生素较敏感,并提示该类抗生素可作为治疗NGU支原体感染的首选药物。     

23S rRNA通用引物的设计及在气性坏疽快速检测中的应用

目的 设计23S rRNA通用引物并将其用于气性坏疽快速检测基因芯片.方法 (1)设计23S rRNA通用引物,并对气性坏疽的主要致病菌进行聚合酶链反应(PCR)扩增.(2)对外伤感染中常见其他微生物进行检测.(3)测定该通用引物PCR的灵敏度.结果 (1)设计出1对23S rRNA通用引物,该通用引物对气性坏疽主要病...     

恒温核酸扩增方法的建立及其扩增产物的鉴定

目的建立一种快速、简便的恒温核酸扩增（ＮＡＳＢＡ）方法。方法用由ＡＭＶＲＴａｓｅ、ＲＮａｓｅＨ、Ｔ７ＲＮＡ聚合酶以及相应的缓冲成分组成的恒温扩增系统，对４例丙型肝炎患者血清中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）Ｅ区ＲＮＡ序列进行扩增，并通过Ｎｏｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交及限制性内切酶对扩增产物进行鉴定。结果经９０分钟或１８０分钟反应后均可扩增出预期大小的产物，放射自显影在预期位置出现阳性杂交信号。扩增产物经聚合酶链反应（ＰＣＲ）及内切酶ＳｍａⅠ消化后产生预期大小的１４４ｂｐ和３５９ｂｐ的片段，第１次ＰＣＲ产物经转录实验后与ＮＡＳＢＡ直接扩增的产物具有较好的同源性。结论ＮＡＳＢＡ法是一种快速简便的核酸扩增方法，此法扩增出的产物具有良好的特异性。     

5-杂氮-2′-脱氧胞苷诱导肝癌细胞株癌/睾丸抗原基因表达的研究

目的探讨使用5杂氮2′脱氧胞苷(5DC)诱导肝癌细胞株癌/睾丸抗原(cancer/testis,CT)基因的可行性。方法使用5DC处理前后,用RTPCR方法检测肝癌细胞株QGY7703、HepG2215、HepG2、SMMC7721、HLE、BEL7402、Huh7、BEL7404中CT抗原基因MAGEA1、A3、A6和A10表达;Southern杂交检测细胞株基因组DNA去甲基化状态。结果CT抗原家族中MAGEA1在QGY7703、SMMC7721、BEL7402、HLE、BEL7404中表达,MAGEA3在HepG2、HLE中表达,MAGEA4和MAGEA10表达均为阴性,而MAGEA6表达均为阳性;使用5DC后,MAGEA4在QGY7703、HLE中出现表达,MAGEA10在HepG2和HLE出现表达。去甲基化后基因组DNA相对去甲基化程度明显升高(t=-4.966,P<0.01)。结论尽管5DC使肝癌细胞株基因组去甲基化程度明显升高,但不能有效地诱导CT抗原基因广泛表达。